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文檔簡介
1、本論文由緒論、研究報告兩部分組成。第一部分為緒論,介紹了DNA傳感器原理、分類,總結(jié)了電化學(xué)發(fā)光分析體系和分析方法特點,納米粒子的特性和制備方法,評述了DNA檢測方法的研究進(jìn)展和應(yīng)用,最后闡述了本論文的研究目的和內(nèi)容。 第二部分為研究報告,由兩部分組成,第一部分為以金納米為探針載體ECL檢測DNA的研究,提出金納米粒子做探針載體,同時二(2,2'-聯(lián)吡啶)(2,2'-吡啶-4,4'-二碳酸)琥珀酰胺釕(Ru(bpy)2(dcbp
2、y)NHS)標(biāo)記DNA,制得探針:Ru(bpy)2(dcbpy)NHS-DNA-Au,以此探針與固定在金電極上的目標(biāo)DNA雜交,然后在含有三丙胺(TPA)的雜交緩沖溶液中施加電壓,記錄電化學(xué)發(fā)光信號,通過電化學(xué)發(fā)光信號對目標(biāo)DNA進(jìn)行檢測。試驗發(fā)現(xiàn),以金納米為探針載體與傳統(tǒng)的DNA檢測方法即在探針的一端只標(biāo)記一個信號分子相比,可以極大的增強電化學(xué)發(fā)光信號,這是因為在傳統(tǒng)的檢測方法中,在探針的一端只標(biāo)記一個信號分子,而以金納米為探針載體,
3、可以在金納米上負(fù)載多個探針,每次雜交,有多個信號分子,放大了目標(biāo)DNA的檢測信號,電化學(xué)發(fā)光檢測信號與目標(biāo)DNA的濃度在1.0×10-11mol/L-1.0×10-8mol/L范圍內(nèi)成線形關(guān)系,檢出限為5.0×10-12mol/L,對1.0×10-9mol/L濃度的靶DNA進(jìn)行11次測定,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4%。 研究報告的第二部分為基于金納米修飾電極和探針載體DNA電化學(xué)發(fā)光分析方法研究,建立了以金納米修飾電極和以金納米作探針載體
4、的電化學(xué)發(fā)光檢測DNA新方法。以1,6-己二硫醇分子為連接劑,將金納米自組裝在金電極上形成金納米修飾電極,再將含巰基的目標(biāo)單鏈DNA固定于金納米修飾電極上,與以金納米粒子為載體的電化學(xué)發(fā)光DNA探針進(jìn)行雜交反應(yīng),將雜交后的電極作為工作電極,在含有TPA的溶液中進(jìn)行電化學(xué)發(fā)光測量,根據(jù)電化學(xué)發(fā)光強度進(jìn)行目標(biāo)單鏈DNA的定量檢測。在選定實驗條件下,檢測囊腫纖維DNA片斷(20base)的線性范圍為1.0×10-12-1.0×10-9mol/
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