以多巴胺為功能單體的溶菌酶分子印跡整體柱的制備及其應(yīng)用研究.pdf

1、分子印跡整體柱技術(shù)融合了分子印跡技術(shù)的高選擇性和整體柱的高效分離能力的優(yōu)勢(shì)，是近年來(lái)快速發(fā)展的一種新穎的分離技術(shù)。但是將這種技術(shù)應(yīng)用于蛋白質(zhì)的富集和分離尚在起步階段。
　　 本論文將蛋白質(zhì)分子印跡技術(shù)與有機(jī)整體柱結(jié)合在一起，研究了以多巴胺(dopamine)為功能單體的溶菌酶(Lyz)蛋白質(zhì)分子印跡整體柱的制備，本論文的工作主要分為以下三個(gè)部分：
　　 第一部分，概述了蛋白質(zhì)印跡技術(shù)，整體柱技術(shù)，以及分子印跡整體柱技術(shù)的

2、基本理論及發(fā)展應(yīng)用。
　　 第二部分，合成甲基丙烯酸縮水甘油酯(GMA)-二乙烯苯(DVB)的有機(jī)整體柱骨架，并對(duì)其制孔劑選擇、單體和交聯(lián)劑比例及合成條件進(jìn)行了優(yōu)化。經(jīng)電鏡掃描、流速-背壓關(guān)系及壓汞考察，該整體柱骨架具有良好的孔徑結(jié)構(gòu)。以該骨架為基質(zhì)，利用甲基丙烯酸縮水甘油酯富含的環(huán)氧基團(tuán)采用Schiff法固載模板蛋白溶菌酶，以多巴胺為功能單體，二次聚合于基質(zhì)表面，制備共價(jià)型溶菌酶蛋白質(zhì)分子印跡整體柱，并對(duì)其識(shí)別性能進(jìn)行了探索。

3、
　　 第三部分，以甲基丙烯酸縮水甘油酯-二乙烯苯的有機(jī)整體柱骨架為基質(zhì)，多巴胺為功能單體，采用表面非共價(jià)鍵印跡法制備了多巴胺包覆的溶菌酶印跡整體柱。利用多巴胺含有的苯環(huán)與有機(jī)整體柱骨架上的苯環(huán)的π-π電子配對(duì)作用，將模板蛋白溶菌酶包覆在整體柱基質(zhì)表面，形成的2D印跡孔穴在最優(yōu)高效液相色譜條件下，對(duì)目標(biāo)蛋白溶菌酶具有良好的識(shí)別作用，印跡因子達(dá)到了5.04。并利用該印跡整體柱進(jìn)行了實(shí)際樣雞蛋清中溶菌酶的分離分析，取得了滿意的結(jié)果。