液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在小型家用電器安全和藥物代謝方面的應(yīng)用.pdf

1、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)因其具有高分離能力、高靈敏度、較廣的應(yīng)用范圍和較強(qiáng)的專屬性等特點,已成為當(dāng)代一種重要的分離分析技術(shù),它在各個領(lǐng)域的應(yīng)用不斷擴(kuò)展。本文應(yīng)用LC-MS技術(shù)在挪威PoHS指令新增的小型家用電器中有毒有害物質(zhì)的檢測和藥物代謝方面做了以下研究:
　　 1.PoHS指令新增的小型家用電器中有毒有害物質(zhì)的檢測方法研究
　　 (1)建立了加熱回流萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜檢測小型家用電器中六

2、溴環(huán)十二烷(HBCD)的方法。實驗優(yōu)化了萃取溶劑、對比了前處理方法、優(yōu)化了加熱回流萃取時間,最終選擇較優(yōu)方法—加熱回流萃取法,其提取回收率大于68％。實驗以甲苯:甲醇=10:1作為萃取劑,加熱回流4小時。萃取出的溶液經(jīng)N2吹干,初始流動相復(fù)溶,渦旋、離心、過膜,經(jīng)ACQUITYTMUPLC BEH C18色譜柱分離,質(zhì)譜的多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)進(jìn)行檢測,HBCD的三種同分異構(gòu)體在3min內(nèi)完全分開,該物質(zhì)的檢出限為0.1μg·mL-1

3、,定量限為0.5μg·mL-1,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍為1.6-32.4μg·mL-1,線性相關(guān)系數(shù)均大于0.996,萃取回收率為68％-75.2％。通過外標(biāo)法定量,并應(yīng)用于實際樣品的檢測。
　　 (2)建立了加速溶劑萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜(ASE-UPLC-MS／MS)檢測小型家用電器中雙酚A(BPA)、四溴雙酚A(TBBPA)、全氟辛酸(PFOA)的方法。實驗利用正交實驗設(shè)計法確定了ASE的較優(yōu)化條件:萃取劑為甲苯:甲

4、醇:10:1,溫度100℃,壓力1500psi,加熱時間5min,靜態(tài)萃取時間20min,循環(huán)3次,N2吹掃時間100s,沖洗體積20％。萃取出的溶液經(jīng)N2吹干,初始流動相復(fù)溶,渦旋、離心、過膜,經(jīng)ACQUITYTM UPLC BEH C18色譜柱分離,三種物質(zhì)在3min內(nèi)完全分開,BPA、TBBA、PFOA的檢出限分別為0.1、10、1ng·mL-1,定量限分別為0.5、50、5ng·mL-1,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍分別為1—100ng·mL

5、-1、0.1-10μg·mL-1、10-1000ng·mL-1,線性相關(guān)系數(shù)均大于0.996,通過外標(biāo)法定量,BPA、TBBPA和PFOA的回收率分別為84％-92％、76％-82％和72％-74％,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于5％。實驗方法和結(jié)果均用島津的離子阱-飛行時間高分辨質(zhì)譜(LC-IT-TOF)儀器進(jìn)行了驗證,通過驗證實驗進(jìn)一步證實了該方法具有可行性。并用該法對實際11種樣品進(jìn)行了檢測。
　　 2.人體血清中丁丙諾啡、諾丁丙諾啡

6、、納洛酮三種藥物的檢測方法建立及藥片中丁丙諾啡和納洛酮藥物的含量測定
　　 實驗建立了同時檢測丁丙諾啡(BP)、諾丁丙諾啡(NBP)、納洛酮(NLX)的UPLC-MS／MS方法,并對其方法學(xué)進(jìn)行了全面考察。利用固相萃取的方法對血清中BP、NBP、NLX三種物質(zhì)進(jìn)行分離富集,用內(nèi)標(biāo)法定量。實驗采用Oasis MCX(R)固相萃取柱分離富集,0.1％的鹽酸水溶液淋洗除去雜質(zhì),再用1mL5％的氨化甲醇洗脫目標(biāo)化合物,將洗脫下來的溶液經(jīng)

7、N2吹干,用1mL初始流動相復(fù)溶,渦旋、離心、過膜,經(jīng)ACQUITYTM UPLCBEH C18色譜柱分離,用電噴霧質(zhì)譜的MRM模式進(jìn)行檢測,三種物質(zhì)在4.5min之內(nèi)達(dá)到完全分離。BP,NBP,NLX的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍分別為0.1-25、0.25-25、0.05-25ng·mL-1,而且線性相關(guān)系數(shù)R均大于0.9948,回收率在97.6％-109.2％之間,BP,NBP,NLX的檢出限分別為:0.02,0.1,0.01ng·mL-1,定量