化學計量學-光譜法研究某些小分子與牛血清白蛋白的相互作用.pdf

1、本論文共分為五章，主要對近年來小分子與血清白蛋白相互作用的研究概況進行了綜述，并分別研究了幾種小分子與牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)的相互作用。光譜法在小分子與生物大分子相互作用的研究領域中的應用日益廣泛，但是用光譜法結合化學計量學方法來探討小分子與血清白蛋白的結合機理的文章還比較少。本論文嘗試將化學計量學方法平行因子和多元曲線分辨-交替最小二乘法用于解析實驗所得的光譜數(shù)據(jù)。討論了方法的原理和實際應用，

2、并探討了化學計量學在復雜體系中實現(xiàn)同時解析多組分平衡濃度和純光譜的可行性。 第一章：本章首先簡要的介紹了蛋白質的定義、結構、功能和性質等，然后依次對小分子與血清白蛋白相互作用的研究方法、研究內(nèi)容和存在的問題等方面展開了評述，探討了化學計量學在小分子與血清白蛋白相互作用研究中的應用。最后還展望了小分子與血清白蛋白相互作用研究的發(fā)展趨勢，將新探針的開發(fā)、各種儀器方法的聯(lián)用及化學計量學方法的引入作為研究重點。 第二章：熒光光譜

3、法研究異丙威及2-異丙基苯酚鈉與BSA的相互作用。實驗發(fā)現(xiàn)，異丙威與BSA通過范德華力和氫鍵結合形成復合物，而2-異丙基苯酚鈉與BSA通過靜電引力作用結合為復合物。采用同步熒光和三維熒光光譜法探討了異丙威及2-異丙基苯酚鈉對BSA構象的影響，結果表明異丙威及2-異丙基苯酚鈉對BSA構象均有影響，甚至可能破壞BSA的結構。通過競爭實驗發(fā)現(xiàn)2-異丙基苯酚鈉與異丙威在BSA上有相同的結合位點，并且2-異丙基苯酚鈉能將結合在BSA上的異丙威競爭

4、出來。 第三章：熒光光譜法結合平行因子法(PARAFAC)研究鹽酸特拉唑嗪和鹽酸哌唑嗪與BSA的相互作用，結果發(fā)現(xiàn)這兩種藥物都對BSA的內(nèi)源熒光有猝滅作用，且屬于靜態(tài)猝滅。熱力學參數(shù)證明鹽酸特拉唑嗪與BSA之間的作用力主要為氫鍵，鹽酸哌唑嗪與BSA之間的作用力主要為疏水作用力和靜電引力。本文以華法林和安定作標記藥物，采用三維熒光技術分別對競爭實驗進行掃描，用PARAFAC處理所得三維數(shù)據(jù)。根據(jù)血清白蛋白結合位上藥物的置換作用確定

5、了鹽酸特拉唑嗪和鹽酸哌唑嗪的結合位點都是BSA的site I。 第四章：紫外吸收光譜和熒光光譜法結合多元曲線分辨-交替最小二乘法(MCR-ALS)研究富馬酸比索洛爾與BSA的相互作用。由于體系中各組分的光譜曲線有部分重疊且現(xiàn)象不明顯，以及MCR-ALS解析單個矩陣時存在旋轉不確定性，本文采用擴展矩陣進行交替最小二乘迭代。MCR-ALS所分辨出的BSA和富馬酸比索洛爾的光譜曲線與實際光譜曲線很好地吻合，保證了分辨的濃度趨勢圖可靠。

6、MCR-ALS很好地分辨出各組分的平衡濃度變化趨勢圖，通過各圖可以很直觀地監(jiān)測反應過程中各個組分的濃度變化，并算出富馬酸比索洛爾與BSA相互作用的表觀結合常數(shù)。本文還通過同步熒光光譜法和紫外吸收光譜法發(fā)現(xiàn)富馬酸比索洛爾對BSA構象有一定影響。 第五章：熒光光譜法結合多元曲線分辨-交替最小二乘法研究傘形花內(nèi)酯與BSA的相互作用。本實驗采用兩種不同的試劑滴加模式對傘形花內(nèi)酯與BSA的相互作用進行研究，對經(jīng)典的熒光光譜數(shù)據(jù)矩陣加以擴展