瞬間-準(zhǔn)-等速電泳——毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測(cè)定黃鱔血液中的谷胱甘肽和白蛋白.pdf

1、毛細(xì)管電泳經(jīng)歷近二十多年的迅速發(fā)展，已成為一種重要的現(xiàn)代分離分析方法。毛細(xì)管電泳具有分離效率高、分析速度快、樣品及試劑消耗少和操作成本低等優(yōu)點(diǎn)，在生物分子如肽、蛋白質(zhì)等的分離分析方面有著廣闊的應(yīng)用前景。緒論中簡(jiǎn)要回顧了毛細(xì)管電泳(CE)的興起與發(fā)展，簡(jiǎn)單介紹了CE的基本原理、分離模式及其CE的特點(diǎn)，較詳細(xì)地評(píng)述了毛細(xì)管電泳在改善檢出限方面的研究進(jìn)展。本文采用瞬間-準(zhǔn)-等速電泳-毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測(cè)定了黃鱔(M.albus)血液中的谷胱甘肽

2、和白蛋白。此項(xiàng)研究拓展了毛細(xì)管電泳技術(shù)在生物分子分析中的應(yīng)用，為黃鱔相關(guān)研究提供了新的分析技術(shù)和參考數(shù)據(jù)。論文主要研究?jī)?nèi)容如下： 1.黃鱔血漿中谷胱甘肽的測(cè)定 1)瞬間-準(zhǔn)-等速電泳—毛細(xì)管區(qū)帶電泳法本文首次利用優(yōu)化的瞬間-準(zhǔn)-等速電泳—毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(tp-ITP-CZE)紫外檢測(cè)同時(shí)測(cè)定了黃鱔血漿中GSH和GSSG。瞬間等速電泳利用乙腈-氯化鈉柱上在線預(yù)富集的原理改善了方法的檢出限，對(duì)GSH和GSSG的檢出限(S/

3、N=3)分別為0.2μmol/L and 0.05μmol/L。利用苯甲酸作為內(nèi)標(biāo)提高了定量測(cè)定的精確度。此方法簡(jiǎn)單、快速、重現(xiàn)性好，可滿足黃鱔血液中GSH和GSSG的含量檢測(cè)。本文對(duì)于黃鱔血漿中GSH和GSSG的含量首次進(jìn)行了報(bào)道，發(fā)現(xiàn)我國(guó)三種不同種黃鱔血漿中GSH和GSSG在幼年黃鱔中的含量高于成年黃鱔；種群1深黃大斑鱔血漿中GSH和GSSG的含量要高于其他兩種黃鱔；種群2淺黃細(xì)斑鱔與種群3青灰色鱔血漿中GSH和GSSG的含量無(wú)顯著

4、差異。 2)毛細(xì)管區(qū)帶電泳—熒光檢測(cè)法毛細(xì)管區(qū)帶電泳—熒光檢測(cè)法的檢出限較瞬間-準(zhǔn)-等速電泳—毛細(xì)管區(qū)帶電泳法低約一個(gè)數(shù)量級(jí)，但需要進(jìn)行衍生反應(yīng)，而且不能同時(shí)測(cè)定GSH和GSSG。毛細(xì)管區(qū)帶電泳-熒光檢測(cè)法檢出限的改善是以增長(zhǎng)分析時(shí)間和增加分析次數(shù)為代價(jià)，而且需要使用特殊衍生試劑和熒光檢測(cè)器。兩種方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。 2.采用間隔液的瞬間-準(zhǔn)-等速電泳-毛細(xì)管區(qū)帶電泳(tp-ITP-CZE)測(cè)定黃鱔血清白蛋白 本文