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1、D1蛋白是植物PSII中不可缺失的亞基組成部分,它是Mn4Ca簇(水氧化的催化中心)中錳原子的配體。D1蛋白酶(D1 C-terminal processing protease,CtpA)是由葉綠體核ctpA基因編碼、含有389個(gè)氨基酸殘基的單亞基蛋白,分子量大小約為45kDa,廣泛存在于各種植物體中。其主要作用是剪切D1蛋白前體C端延伸的肽段,促使其轉(zhuǎn)化成具有生物活性的D1蛋白,用于PSII中錳簇復(fù)合物的組裝,該酶切過程成為植物進(jìn)行
2、光合作用所必須的步驟。由于DI蛋白酶在植物體中的含量只有D1蛋白的1%,因此被認(rèn)為是一種新型優(yōu)異的廣譜除草劑作用靶標(biāo)。建立D1蛋白酶靶標(biāo)生物活性的測(cè)定及其抑制劑先導(dǎo)化合物的篩選方法,對(duì)開發(fā)D1蛋白酶抑制劑及其分子結(jié)構(gòu)的優(yōu)化具有重要的意義。
本文根據(jù)D1蛋白酶抑制劑先導(dǎo)化合物開發(fā)和篩選的實(shí)際需要,采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳技術(shù)研究了酶蛋白活性檢測(cè)及其先導(dǎo)化合物篩選的方法。分別對(duì)分離緩沖液pH值、濃度、溫度、毛細(xì)管柱有效長(zhǎng)度等影響因素
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