小分子抗原的競(jìng)爭(zhēng)型免疫傳感技術(shù)研究.pdf

1、免疫傳感器是一類將免疫檢測(cè)技術(shù)與傳感器技術(shù)相結(jié)合的生物傳感器，能夠用來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)抗原抗體反應(yīng)、進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析，可以縮短測(cè)定時(shí)間。隨著生物敏感元件的研發(fā)，在過(guò)去的二十年里出現(xiàn)了表面等離子體共振免疫傳感器、平面陣列免疫傳感器、表面聲波免疫傳感器、石英晶體微量天平傳感器、光導(dǎo)纖維免疫傳感器等新型免疫傳感器。免疫傳感器的出現(xiàn)，減少了分析時(shí)間，提高了靈敏度，使檢測(cè)過(guò)程更簡(jiǎn)單，因而近年來(lái)在環(huán)境、食品、衛(wèi)生等研究領(lǐng)域引起了廣泛的關(guān)注，在不久的將來(lái)有著良

2、好的應(yīng)用前景。為了進(jìn)一步研究與開(kāi)發(fā)免疫傳感器的應(yīng)用，本論文利用壓電免疫傳感技術(shù)和化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的高靈敏性和免疫反應(yīng)的高特異性，結(jié)合磁性納米顆粒的易分離性和酶催化放大技術(shù)，設(shè)計(jì)了一系列新型競(jìng)爭(zhēng)型免疫傳感器用于探索環(huán)境、食品和衛(wèi)生領(lǐng)域小分子物質(zhì)的檢測(cè)。具體內(nèi)容包括： (1)基于酶催化信號(hào)放大原理開(kāi)發(fā)一種操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，重現(xiàn)性好的競(jìng)爭(zhēng)型壓電傳感器用于小分子物質(zhì)的免疫分析。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的半抗原通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)與抗體相結(jié)合，然

3、后在雙氧水的存在下生物催化氧化4-氯-1-萘酚生成不溶物苯并-4-氯萘醌，放大了半抗原與抗體的反應(yīng)過(guò)程。晶振表面沉積物的量受半抗原濃度的控制。將該傳感器用于對(duì)FITC的分析，結(jié)果令人滿意，線性范圍0.01-1ng/mL，檢測(cè)下限4 pg/mL。 (2)結(jié)合酶催化放大和磁納米顆粒的易分離性，構(gòu)建了一種監(jiān)測(cè)鹽酸克倫特羅的競(jìng)爭(zhēng)型壓電免疫傳感器。采用磁性納米顆?？梢栽龃罂乖墓潭浚瑫r(shí)該傳感器具有免洗、簡(jiǎn)單、易再生的優(yōu)勢(shì)，對(duì)鹽酸克倫特

4、羅的檢測(cè)顯示出了很高的靈敏度，線性范圍為0.02-1.5 ng/mL，檢測(cè)下限0.01 ng/mL。 (3)提出了一種以磁納米顆粒為載體的酶催化增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光傳感技術(shù)對(duì)鹽酸克倫特羅的超靈敏檢測(cè)。用固定有HRP-CL的磁性納米顆粒為生物傳感界面，通過(guò)以標(biāo)記的HRP酶為催化劑，對(duì)碘苯酚為增強(qiáng)劑的增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法對(duì)鹽酸克倫特羅進(jìn)行定量檢測(cè)。本傳感器實(shí)現(xiàn)了對(duì)鹽酸克倫特羅的超靈敏檢測(cè)，同時(shí)具有儀器操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)時(shí)間短的優(yōu)勢(shì)。線性范圍為0.01