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文檔簡(jiǎn)介
1、本文研究了松江鱸(Trachidermus fasciatus)腎組織細(xì)胞系的建立過(guò)程,并分析了細(xì)胞生物學(xué)特性。結(jié)果表明組織塊培養(yǎng)法適用于松江鱸腎的原代培養(yǎng);在25℃、5%CO2培養(yǎng)箱中,原代培養(yǎng)啟動(dòng)24h后有細(xì)胞貼壁牢固,36h后有細(xì)胞遷出,30d后長(zhǎng)滿單層;主要為成纖維樣細(xì)胞;采用胰酶消化法進(jìn)行傳代,傳代細(xì)胞生長(zhǎng)與分裂狀態(tài)良好,20代后松江鱸腎5-6d便可長(zhǎng)成單層,原代培養(yǎng)和早期培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液的成分是添加5ng/mL人堿性成纖維細(xì)胞
2、生長(zhǎng)因子(bFGF)、20μg/mL硫酸軟骨素、40ng/mLI型胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-I)的20%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基;35代后,所有培養(yǎng)液為20%FBS-DMEM/F12。目前,松江鱸腎組織細(xì)胞已傳至55代,成功建立松江鱸腎組織細(xì)胞系。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定松江鱸腎組織細(xì)胞的群體倍增時(shí)間為別為56.32h,35代松江鱸腎組織細(xì)胞的核型分析結(jié)果是2n=40;核型公式為:14m+10sm+16t。病毒敏感性實(shí)驗(yàn)表明松江鱸腎組織細(xì)胞對(duì)
3、魚(yú)類(lèi)諾達(dá)病毒不敏感,對(duì)鯉春病毒血癥病毒敏感,測(cè)定病毒滴度為106.53TCID50/mL。
松江鱸腎組織細(xì)胞在不同血清濃度(0%、5%、10%、15%、20%)、不同濃度硫酸軟骨素(0、10、20、30、40μg/mL)、不同濃度人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)(0、2.5、5、7.5、10ng/mL)以及不同濃度I型胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-I)(0、10、20、30ng/mL)條件下的生長(zhǎng)特性研究結(jié)果表明:松江鱸腎組織
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