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1、本文以浮萍(Lemna minor)為實(shí)驗(yàn)材料,以鎘(Cd)為毒害因子,借助組化染色、電感耦合等離子體質(zhì)譜法(IPC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS/MS)、非變性凝膠電泳(Native-PAGE)、Western-blot等生理生化技術(shù)研究了外源水楊酸對(duì)浮萍鎘毒害的緩解機(jī)制。研究結(jié)果表明:
(1)最適外源SA濃度的篩選,分析了不同濃度SA對(duì)Cd脅迫下浮萍光合色素、脯氨酸(Pro)、可溶性蛋白、丙二醛(MDA)、超氧陰離子(
2、O2·-)和抗氧化系統(tǒng)(抗氧化酶和小分子抗氧化物質(zhì))的影響。研究結(jié)果表明:單一Cd處理使浮萍體內(nèi)葉綠素a(Chl a)、葉綠素b(Chl b)、類(lèi)胡蘿卜、素和可溶性蛋白含量降低,分別比對(duì)照組下降了35%、51%、12%和68%;而MDA、O2·-產(chǎn)生速率和Pro積累量都顯著上升,分別是對(duì)照組的128%、120%和168%;抗氧化系統(tǒng)中,超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化物酶(GPX)活性均降低,分別是對(duì)照組94%和29%;而小分子保護(hù)物質(zhì)
3、抗壞血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量增加,分別是對(duì)照組的125%和134%。當(dāng)施加25-100μM濃度的外源SA時(shí),與單一Cd脅迫相比Chla、Chl b、Car和可溶性蛋白的含量均增加;MDA、O2·-產(chǎn)生速率和Pro積累量降低;抗氧化酶活性提高;小分子抗氧化物質(zhì)含量下降。其中50μM SA復(fù)合處理時(shí),浮萍的光合色素和可溶性蛋白含量最高,是對(duì)照組的92%和196%;MDA,O2·-產(chǎn)生速率和Pro積累量降低的最為明顯,分別是對(duì)照
4、組的96%、108%、和107%;抗氧化酶活性最高,SOD活性是對(duì)照組的99%,GPX活性是對(duì)照組的74%。結(jié)果表明,50μM SA是緩解浮萍Cd毒害作用的最佳濃度。
(2)分別用含0、10μMCd、10μM Cd+50μMSA以及50μM SA的1/10Hoagland營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)浮萍7天,分析了Cd和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素(Ca、Mg、Fe、B和Mo)和內(nèi)源水楊酸含量、苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性、光合色素含量及葉片損傷程度、活性氧(
5、ROS)產(chǎn)生速率、膜脂過(guò)氧化程度及細(xì)胞死亡率、抗氧化系統(tǒng)(抗氧化酶和小分子抗氧化物質(zhì))、熱激蛋白(Hsp70)表達(dá)等的變化。研究結(jié)果表明:Cd處理降低了浮萍光合色素含量;引起根系脫落及葉片損傷;誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生加速膜脂過(guò)氧化;阻礙礦質(zhì)離子吸收;破壞保護(hù)酶系統(tǒng)(SOD、GPX、CAT、APX和GR)和小分子保護(hù)物質(zhì)GSH(還原型谷胱甘肽)、GSSG(氧化型谷胱甘肽)、AsA(還原型抗壞血酸)、DHA(氧化性抗壞血酸)和NPT(非蛋白巰基);
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