核酸與維生素金屬絡(luò)合物相互作用及其分析應(yīng)用的研究.pdf

1、核酸和蛋白質(zhì)是生命現(xiàn)象的物質(zhì)基礎(chǔ)，對于它們的研究已經(jīng)成為生命科學(xué)的重要內(nèi)容。核酸是生物的基本遺傳物質(zhì)，是一種非常重要的生物大分子，與生物的生長，發(fā)育以及癌變，突變等異?；顒酉嚓P(guān)。核酸的定量測定是生物化學(xué)和其它生物學(xué)科中經(jīng)常涉及的分析任務(wù)，也是許多生化藥物分離提純中質(zhì)量檢驗及食品檢驗中常見的分析項目，而測定的結(jié)果為臨床檢驗中疾病診斷及治療提供了科學(xué)依據(jù)。 探針技術(shù)是研究核酸和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能、定性、定量的重要手段，對核酸探針的研究

2、已成為生命科學(xué)領(lǐng)域的前沿課題。本論文主要研究了新的核酸探針及維生素的靈敏的分析方法，并探討了維生素與核酸之間相互作用的機(jī)理和發(fā)光機(jī)理。 在論文的第一部分中，介紹了研究核酸與藥物分子之間相互作用的主要手段，綜述了熒光和共振光散射技術(shù)在核酸測定中的分析應(yīng)用和維生素類藥物的熒光分析進(jìn)展。 在論文的第二部分中，研究了核酸對Rutin-La<'3+>體系的熒光增強(qiáng)效應(yīng)，并將其應(yīng)用于核酸的定量測定。研究發(fā)現(xiàn)，在Tris-HCl緩沖溶

3、液中，核酸能明顯增強(qiáng)Rutin-La<'3+>的熒光強(qiáng)度，其增強(qiáng)程度與核酸的濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。在最佳條件下，fsDNA和yRNA的線性范圍分別為8×10<'-8>-1×10<'-5>g/nL和1×10<'-7>-9x10<'-6>g/mL，檢出限為8×10<'-8>和5.4x10<'-8>g/mL。該方法已用于合成樣品的測定，其結(jié)果令人滿意。機(jī)理研究表明，Rutin-La<'3+>通過靜電引力和核酸發(fā)生反應(yīng)，從而形成一個

4、大的Rutin--La<'3+>--核酸絡(luò)合物。同時，核酸為Rutin--La<'3+>體系提供良好的疏水環(huán)境，降低了Rutin-La<'3+>和水分子之間的碰撞，減少了因碰撞而導(dǎo)致的能量損失，提高了熒光量子效率，使體系的熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng)。 論文的第三部分，研究了煙酸-Eu<'3+>--核酸體系的散射光增強(qiáng)效應(yīng)，并建立了測定核酸的新方法。研究發(fā)現(xiàn)，在Tds-HCI緩沖溶液中，核酸能明顯增強(qiáng)煙酸-Eu<'3+>體系的散射光強(qiáng)度。在

5、最佳實驗條件下，散射光增強(qiáng)的程度在一定范圍內(nèi)與核酸的濃度成線性關(guān)系。fsDNA的線性范圍為7×10<'-8>-1×10<'-5>g/mL，檢出限為2×10<'-8>g/mL。該方法已用于合成樣品的測定，結(jié)果令人滿意。機(jī)理研究表明，核酸與煙酸-Eu<'3+>之間是通過靜電作用結(jié)合的。論文的第四部分主要研究了葉酸-Eu<'3+>體系的熒光特性，并用于葉酸的定量測定。機(jī)理研究表明，葉酸經(jīng)氧化后，生成了喋呤-6-羧酸，它能與Eu<'3+>生成絡(luò)

6、合物。當(dāng)用光照射時，葉酸的氧化產(chǎn)物將吸收的能量通過分子內(nèi)能量轉(zhuǎn)移傳遞給Eu<'3+>，從而發(fā)射Eu<'3+>的特征熒光，由此建立了葉酸的靈敏測定方法。增強(qiáng)的熒光強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與葉酸的濃度成線性關(guān)系。在最佳實驗條件下，葉酸的線性范圍分別為4×10<'-8>-4x10<'-5>mol/L，檢出限分別為1.2x10<'-8>mol/L。該法已用于實際樣品中葉酸含量的測定，結(jié)果令人滿意。 本論文的主要特點： 1．研究表明，核酸

7、對稀土金屬離子配合物Rutin-La<'3+>的熒光具有明顯的增強(qiáng)效應(yīng)，由此建立了測定核酸的熒光光度法，并已用于合成樣品的測定。機(jī)理研究認(rèn)為核酸通過靜電引力與Rutin-La<'3+>形成了三元絡(luò)合物，而核酸為Rutin-La<'3+>體系提供了一個疏水環(huán)境，減少了與水分子碰撞而造成的能量損失，從而提高了體系的熒光強(qiáng)度。 2．研究指出，核酸通過靜電引力作用與煙酸一Eu<'3+>體系結(jié)合成絡(luò)合物，從而增強(qiáng)了煙酸-Eu<'3+>體系