簡介：機體是如何機體是如何維持血糖平衡的（持血糖平衡的（說明血糖的來源、去路及明血糖的來源、去路及調節(jié)過調節(jié)過程）程）血液中的葡萄糖稱為血糖，機體血糖平衡是糖、脂肪、氨基酸代謝協調的結果，也是肝、肌、脂肪組織等器官代謝協調的結果（由于血糖的來源與去路保持動態(tài)平衡，血糖是組織、中樞神經、腦能量來源的主要保證）。A血糖來源（3分）糖類消化吸收食物中的糖類經消化吸收入血，這是血糖最主要的來源；肝糖原分解短期饑餓后，肝中儲存的糖原分解成葡萄糖進入血液；糖異生作用在較長時間饑餓后，氨基酸、甘油等非糖物質在肝內異生合成葡萄糖；其他單糖轉化成葡萄糖。B血糖去路（4分）氧化供能葡萄糖在組織細胞中通過有氧氧化和無氧酵解產生ATP，為細胞供給能量，此為血糖的主要去路。合成糖原進食后，肝和肌肉等組織將葡萄糖合成糖原以儲存。轉化成非糖物質可轉化為甘油、脂肪酸以合成脂肪；可轉化為氨基酸、合成蛋白質。轉變成其他糖或糖衍生物（戊糖磷酸途徑），如核糖、脫氧核糖、氨基多糖等。血糖濃度高于腎閾時可隨尿排出一部分。C血糖的調節(jié)（2分）胰島素是體內唯一降低血糖的激素，但胰島素分泌受機體血糖的控制（機體血糖升高胰島素分泌減少）。胰島素分泌增加，糖原合酶活性提高、糖原磷酸化酶活性降低，糖原分解降低、糖原合成提高，血糖降低。否則相反（胰島素分泌減少，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高）。胰高血糖素、腎上腺素作用是升高機體血糖。胰高血糖素、腎上腺素分泌增加，糖原合酶活性降低、糖原磷酸化酶活性提高，糖原分解提高、糖原合成降低，血糖提高。否則相反。老師，丙，丙酮酸被酸被還原為乳酸后，乳酸的去路是什么乳酸后，乳酸的去路是什么這個問題很重要。肌組織產生的乳酸的去向包括大量乳酸透過肌細胞膜進入血液，在肝臟進行糖異生轉變?yōu)槠咸烟恰４罅咳樗徇M入血液，在心肌中經LDH1催化生成丙酮酸氧化供能；部分乳酸在肌肉內脫氫生成丙酮酸而進入到有氧氧化供能。大量乳酸透過肌細胞膜進入血液，在腎臟異生為糖或經尿排出體外。下面問題你能回答出來不1說明脂肪氧化供能的明脂肪氧化供能的過程（1）脂肪動員脂肪組織中的甘油三酯在HSL的作用下水解釋放脂酸和甘油。（2）脂酸氧化經脂肪酸活化、脂酰COA進入線粒體、Β氧化、乙酰COA進入三羧酸循環(huán)徹底氧化成H2O和CO2并釋放能量。（3）甘油氧化經磷酸化、脫氫、異構轉變成3磷酸甘油醛，3磷酸甘油醛循糖氧化分解途徑徹底分解生成H2O和CO2并釋放能量。1丙氨酸異生形成葡萄糖的丙氨酸異生形成葡萄糖的過程答（1）丙氨酸經GPT催化生成丙酮酸。（2）丙酮酸在線粒體內經丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者經蘋果酸脫氫酶催化生成蘋果酸出線粒體，在胞液中經蘋果酸脫氫酶催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。（3）磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途徑至1，6雙磷酸果糖。1，6雙磷酸果糖經果糖雙磷酸酶催化生成6磷酸果糖，再異構成6磷酸葡萄糖。6磷酸葡萄糖在葡萄糖6磷酸酶作用下生成葡萄糖。酮體脂酸在肝臟線粒體內分解時產生的特有的中間產物，乙酰乙酸、Β羥丁酸、丙酮三者合成為酮體。鳥氨酸循環(huán)也稱尿素循環(huán)，指氨與二氧化碳經鳥氨酸、瓜氨酸、精氨酸生成尿素的過程，肝是鳥氨酸循環(huán)的重要器官。一碳單位指某些氨基酸在肝肌肉組織中分解代謝產生的含有一個碳原子的基團，甲基、甲烯基、甲炔基、亞氨甲基等。體內氨的來源與去路是什么體內氨的來源與去路是什么氨的來源①氨基酸脫氨基作用和胺類分解均可產生氨②腸道細菌腐敗作用產生氨③腎小管上皮細胞分泌的氨主要來自谷氨酰胺氨的去路①在肝內合成尿素，這是最主要的方式②合成非必需氨基酸及其他含氮化合物，氨通過丙酮酸葡萄糖循環(huán)從骨骼肌運往肝③合成谷氨酰胺，氨通過谷氨酰胺從腦和骨骼肌等組織運往肝或腎④腎小管泌氨隨尿排出郭志平你好回答的比較全面，但每個知識點應該進一步解釋說明生物氧化和生物生物氧化和生物轉化的區(qū)化的區(qū)別生物氧化物質在生物體內進行氧化稱生物氧化，主要指糖，脂肪，蛋白質等在體內分解時逐步釋放能量，最終生成二氧化碳和水的過程。生物體將NADHNADPHFADH氧化生成ATP供機體各種生命活動的需要。生物轉化機體對內、外源性的非營養(yǎng)物質進行代謝轉變，使其水溶性提高，極性增強，易于通過膽汁或尿液排出體外的過程成為生物轉化。機體是如何機體是如何維持血糖平衡的（持血糖平衡的（說明血糖的來源、去路及明血糖的來源、去路及調節(jié)過調節(jié)過程）程）血液中的葡萄糖稱為血糖，機體血糖平衡是糖、脂肪、氨基酸代謝協調的結果，也是肝、肌、脂肪組織等器官代謝協調的結果（由于血糖的來源與去路保持動態(tài)平衡，血糖是組織、中樞神經、腦能量來源的主要保證）。A血糖來源糖類消化吸收食物中的糖類經消化吸收入血，這是血糖最主要的來源；肝糖原分解短期饑餓后，肝中儲存的糖原分解成葡萄糖進入血液；糖異生作用在較長時間饑餓后，氨基酸、甘油等非糖物質在肝內異生合成葡萄糖；其他單糖轉化成葡萄糖。B血糖去路氧化供能葡萄糖在組織細胞中通過有氧氧化和無氧酵解產生ATP，為細胞供給能量，此為血糖的主要去路。合成糖原進食后，肝和肌肉等組織將葡萄糖合成糖原以儲存。轉化成非糖物質可轉化為甘油、脂肪酸以合成脂肪；可轉化為氨基酸、合成蛋白質。轉變成其他

簡介：版權所有毛毛雨制作東隅已逝1桑榆非晚現代分子生物學一填空題1DNA的物理圖譜是DNA分子的限制性內切酶酶解片段的排列順序。2核酶按底物可劃分為自體催化、異體催化兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是IF1、IF2和IF3。4蛋白質的跨膜需要信號肽的引導，蛋白伴侶的作用是輔助肽鏈折疊成天然構象的蛋白質。5真核生物啟動子中的元件通常可以分為兩種核心啟動子元件和上游啟動子元件。6分子生物學的研究內容主要包含結構分子生物學、基因表達與調控、DNA重組技術三部分。7證明DNA是遺傳物質的兩個關鍵性實驗是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌體感染大腸桿菌這兩個實驗中主要的論點證據是生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點HNRNA在轉變?yōu)镸RNA的過程中經過剪接、MRNA的5′末端被加上一個M7PGPPP帽子，在MRNA3′末端多了一個多聚腺苷酸POLYA尾巴。9蛋白質多亞基形式的優(yōu)點是亞基對DNA的利用來說是一種經濟的方法、可以減少蛋白質合成過程中隨機的錯誤對蛋白質活性的影響、活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關閉。10質粒DNA具有三種不同的構型分別是SC構型、OC構型、L構型。在電泳中最前面的是SC構型。11哺乳類RNA聚合酶Ⅱ啟動子中常見的元件TATA、GC、CAAT所對應的反式作用蛋白因子分別是TFIID、SP1和CTFNF1。12與DNA結合的轉錄因子大多以二聚體形式起作用，轉錄因子與DNA結合的功能域常見有以下幾種螺旋轉角螺旋、鋅指模體、堿性亮氨酸拉鏈模體。13轉基因動物常用的方法有逆轉錄病毒感染法、DNA顯微注射法、胚胎干細胞法。14RNA聚合酶Ⅱ的基本轉錄因子有、TFⅡA、TFⅡB、TFIID、TFⅡE他們的結合順序是D、A、B、E。其中TFIID的功能是與TATA盒結合。15酵母DNA按摩爾計含有328的T則A為_328_G為_172_和C為_172__。16操縱子包括_調控基因、調控蛋白結合位點和結構基因。17DNA合成儀合成DNA片段時，用的原料是模板DNA‘TAQ、引物、緩沖液、DNTP。18在瓊脂糖電泳中，DNA會向正極移動。19染色體包括蛋白質、染色體兩大部分。20環(huán)狀DNA雙鏈的復制主要可分為Θ形、滾環(huán)形、D環(huán)形三種類型。21轉錄的基本過程包括轉錄的起始、延伸、終止。22半乳糖對細菌有雙重作用；一方面可以作為碳源供細胞生長；另一方面它又是細胞壁的成分。所以需要一個不依賴于CAMPCRP的啟動子S2進行本底水平的永久型合成；同時需要一個依賴于CAMPCRP的啟動子S1對高水平合成進行調節(jié)。有G時轉錄從S2開始，無G時轉錄從S1開始。23DNA重組技術也稱為基因克隆或分子克隆。最終目的是把一個生物體中的遺傳信息DNA轉入版權所有毛毛雨制作東隅已逝3桑榆非晚螺旋DNA松弛化，然后再將切斷的單鏈DNA連接起來，而不需要任何輔助因子。而大腸桿菌中的DNA旋轉酶DNAGYRASE則的典型的拓撲異構酶Ⅱ，能將負超螺旋引入DNA分子，該酶能暫時性地切斷和重新連接雙鏈DNA，同時需要ATP水解為ADP以供能?；虮磉_遺傳信息從DNA到RNA再到蛋白質的過程。前導肽分析色氨酸操縱子前導肽的序列發(fā)現，它包括起始密碼子AUG和終止密碼子UGA；如果翻譯起始于AUG，應該產生一個14個氨基酸的多肽，這個假設的多肽被稱為前導肽（實際上還沒有觀察到）。啟動子啟動子是DNA分子可以與RNA聚合酶特異結合的部位，也就是使轉錄開始的部位。在基因表達的調控中，轉錄的起始是個關鍵。常常某個基因是否應當表達決定于在特定的啟動子起始過程。DNA分子克隆技術（也稱基因克隆技術）在體外將DNA分子片段與載體DNA片段連接，轉入細胞獲得大量拷貝的過程中DNA分子克隆或基因克隆。其基本步驟包括制備目的基因→將目的基因與載體用限制性內切酶切割和連接，制成DNA重組→導入宿主細胞→篩選、鑒定→擴增和表達。載體（VECS）在細胞內自我復制，并帶動重組的分子片段共同增殖，從而產生大量的DNA分子片段。主要目的是獲得某一基因或NDA片段的大量拷貝，有了這些與親本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的結構與功能，隨著引入的DNA片段不同，有兩種DNA庫，一種是基因組文庫（GENOMICLIBRARY）另一種是CDNA庫。G蛋白受體與配體結合后即與膜上的偶聯蛋白結合，使其釋放活性因子，再與效應器發(fā)生反應。位于受體與效應器之間的則是偶聯蛋白。目前所知的偶聯蛋白種類較多，都屬于結構和功能極為類似的一個家族，由于它們都能結合并水解GTP，所以通常稱G蛋白，即鳥苷酸調節(jié)蛋白（GUANINENUCLEOTIDEREGULATYPROTEIN）。受體型酪氨酸激酶蛋白酪氨酸激酶PROTEINTYROSINEKINASE，PTK是一組催化酪氨酸殘基磷酸化的酶，他們通過從三磷酸腺苷上轉移一個磷原子到酪氨酸殘基上，而使底物蛋白活化目前，已發(fā)現PTK有100多個家族成員，他們通過活化底物蛋白，參與細胞的信號轉導，最終，這些信號轉導入細胞核內，引起某些基因表達水平的改變，使諸如細胞生長之類的復雜的細胞功能得以調節(jié)因此在調節(jié)細胞的分化、生長和激活中起到重要作用根據PTK的結構，可分為受體型和非受體型PTK兩大類，前者又稱跨膜PTK，后者又稱細胞內PTK生長因子受體PTK受體型酪氨酸激酶或RTK這一類蛋白酪氨酸激酶為跨膜蛋白，其胞外部分為配體結合區(qū)，中間有跨膜區(qū)，胞內部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化結構域根據他們的結構不同可分為，表皮生長因子受體EGFR家族、胰島素受體家族、血小板衍生生長因子PDGF受體家族和成纖維細胞生長因子受體FGFR家族CDNA與CCCDNACDNA是由MRNA通過反轉錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。CAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結合后所形成的復合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。MICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補，可抑制MRNA的翻譯。核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。信號肽在蛋白質合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段，引導蛋白質的跨膜。弱化子在操縱區(qū)與結構基因之間的一段可以終止轉錄作用的核苷酸序列。上游啟動子元件是指對啟動子的活性起到一種調節(jié)作用的DNA序列，10區(qū)的TATA、35區(qū)的TGACA及增強子，弱化子等。

簡介：一、名詞解釋1CDNA與CCCDNACDNA是由MRNA通過反轉錄酶合成的雙鏈DNACCCDNA是游離于染色體之外的質粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標準折疊單位蛋白質二級結構單元Α螺旋與Β折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結構塊此種確定的折疊類型通常稱為超二級結構。幾乎所有的三級結構都可以用這些折疊類型乃至他們的組合型來予以描述因此又將其稱為標準折疊單位。3CAP環(huán)腺苷酸CAMP受體蛋白CRPCAMPRECEPTPROTEINCAMP與CRP結合后所形成的復合物稱激活蛋白CAPCAMPACTIVATEDPROTEIN4回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列常是限制性酶切位點。5MICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA與MRNA序列互補可抑制MRNA的翻譯。6核酶具有催化活性的RNA在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體蛋白質分子空間結構中存在著某些立體形狀和拓撲結構頗為類似的局部區(qū)域8信號肽在蛋白質合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段引導蛋白質的跨膜。9弱化子在操縱區(qū)與結構基因之間的一段可以終止轉錄作用的核苷酸序列。10魔斑當細菌生長過程中遇到氨基酸全面缺乏時細菌將會產生一個應急反應停止全部基因的表達。產生這一應急反應的信號是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸PPPGPP。PPGPP與PPPGPP二、填空1DNA的物理圖譜是DNA分子的限制性內切酶酶解片段的排列順序。2RNA酶的剪切分為自體催化、異體催化兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是IF1、IF2和IF3。4蛋白質的跨膜需要信號肽的引導蛋白伴侶的作用是輔助肽鏈折疊成天然構象的蛋白質。5啟動子中的元件通?？梢苑譃閮煞N核心啟動子元件和上游啟動子元件。6分子生物學的研究內容主要包含結構分子生物學、基因表達與調控、DNA重組技術三部分。7證明DNA是遺傳物質的兩個關鍵性實驗是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌體感染大腸桿菌這兩個實驗中主要的論點證據是生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點HNRNA在轉變?yōu)镸RNA的過程中經過剪接、MRNA的5′末端被加上一個M7PGPPP帽子在MRNA3′末端多了一個多聚腺苷酸POLYA尾巴。9蛋白質多亞基形式的優(yōu)點是亞基對DNA的利用來說是一種經濟的方法、可以減少蛋白質合成過程中隨機的錯誤對蛋白質活性的影響、活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關閉。10蛋白質折疊機制首先成核理論的主要內容包括成核、結構充實、最后重排。11半乳糖對細菌有雙重作用一方面可以作為碳源供細胞生長另一方面它又是細胞壁的成分。所以需要一個不依賴于CAMPCRP的啟動子S2進行本底水平的永久型合成同時需要一個依賴于CAMPCRP的啟動子S1對高水平合成進行調節(jié)。有G時轉錄從S2開始無G時轉錄從S1開始。

簡介：第2章染色體與DNA名詞解釋原癌基因細胞內與細胞增殖相關的正?；?，是維持機體正常生命活動所必須的，在進化上高等保守。當原癌基因的結構或調控區(qū)發(fā)生變異，基因產物增多或活性增強時，使細胞過度增殖，從而形成腫瘤。復制以親代DNA或RNA為模板，根據堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉座子TRANSPOSON或TRANSPOSABLEELEMENT位于染色體DNA上可自主復制和位移的基本單位。包括插入序列和復合轉座子。半保留復制以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的，這種復制方式叫半保留復制。染色體染色體是遺傳信息的載體，由DNA、RNA和蛋白質構成，其形態(tài)和數目具有種系的特性。在細胞間期核中，以染色質形式存在。在細胞分裂時，染色質絲經過螺旋化、折疊、包裝成為染色體，為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體是構成真核生物染色體的基本單位，是DNA和蛋白質構成的緊密結構形式，包括200BP左右的DNA和9個組蛋白分子構成的致密結構。填空題1真核細胞核小體的組成是DNA和蛋白2天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接，這是因為天然染色體末端存在端粒結構。3在聚合酶鏈反應中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶、DNTP和鎂離子。4引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學因素。5DNA復制時與DNA解鏈有關的酶和蛋白質有拓撲異構酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結合蛋白。6參與DNA切除修復的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內切酶。7在真核生物中DNA復制的主要酶是DNA聚合酶Δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉錄酶。9DNA的修復方式有錯配修復、堿基切除修復、核苷酸切除修復、DNA的直接修復。選擇題1真核生物復制起點的特征包括（B）A富含GC區(qū)B富含AT區(qū)CZDNAD無明顯特征2插入序列（IS）編碼（A）A轉座酶B逆轉錄酶CDNA合成酶D核糖核酸酶3紫外線照射對DNA分子的損傷主要是DA堿基替換B磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D形成共價連接的嘧啶二聚體4自然界中以DNA為遺傳物質的大多數生物DNA的復制方式（C）A環(huán)式BD環(huán)式C半保留D全保留5原核生物基因組中沒有（A）A內含子B外顯子C轉錄因子D插入序列6關于組蛋白下列說法正確的是DA為中性蛋白B為酸性蛋白C進化上不具保守性D染色體結合蛋白二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時進行前導鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。6、PCR的基本原理PCR是在試管中進行的DNA復制反應，基本原理是依據細胞內DNA半保留復制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉變的性質，人為地控制體外合成系統的溫度，以促使雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以DNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉換是通過溫度的改變來控制的。需要重復進行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸３個步驟構成PCR反應的一個循環(huán)，此循環(huán)的反復進行，就可使目的DNA得以迅速擴增。DNA模板變性模板雙鏈DNA單鏈DNA，94℃。退火引物＋單鏈DNA雜交鏈，引物的TM值。引物的延伸溫度至70℃左右，TAQDNA聚合酶以４種DNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物３末端為起點的5→3DNA鏈延伸反應，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應的模板PCR，就是如此反復循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。第三章啟動子是一段位于結構基因5，端上游區(qū)的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準確地相結合并具有轉錄起始的特異性。指RNA聚合酶識別、結合和開始轉錄的一段特定的DNA序列。增強子能強化轉錄起始的序列稱為增強子。轉錄以DNA為模板，按照堿基配對原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形成一條與DNA鏈互補的RNA的過程。RNA的編輯是某些RNA，特別是MRNA的一種加工方式，它導致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子EXON真核細胞基因DNA中的編碼序列，這些序列被轉錄成RNA并進而翻譯為蛋白質。內含子INTRON真核細胞基因DNA中的間插序列，這些序列被轉錄成RNA，但隨即被剪除而不翻譯。復制子生物體的復制單位稱為復制子（REPLICON，是在同一個復制起點控制下的一段DNA序列。轉錄單元是一段啟動子開始至終止子結束的DNA序列。轉錄起點是與新生RNA鏈的第一個核苷酸相對應的DNA鏈上的堿基，通常為一個嘌呤。轉錄開始時模板上的第一個堿基，在原核中常為A或G，而且位置固定。填空1轉錄的基本過程包括模板識別，轉錄起始，轉錄的延伸，轉錄的終止。2基因表達包括轉錄和翻譯兩個階段。3RNA的編輯方式堿基突變，尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中，35區(qū)與10區(qū)之間的距離大約是1619BP5帽子結構的功能〔1〕在翻譯中起識別作用〔2〕使MRNA免遭核苷酸的破壞6原核生物只有一種RNA聚合酶而真核生物有三種，每一種都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成RRNA聚合酶Ⅱ合成MRNA，聚合酶Ⅲ合成TRNA和5SRRNA。三種聚合酶都是具有多亞基的大的蛋白復合體。7轉錄因子通常具有兩個獨立的結構域一個結合DNA，一個激活轉錄。8在真核細胞MRNA的修飾中，“帽子“結構由甲基組成，“尾“由多聚腺嘌呤組成。

簡介：1分子生物學試題及答案一、名詞解釋1CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過反轉錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標準折疊單位標準折疊單位蛋白質二級結構單元?。菪cΒ－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結構塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級結構。幾乎所有的三級結構都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標準折疊單位。3CAPCAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結合后所形成的復合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。5MICRNAMICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補，可抑制MRNA的翻譯。6核酶核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體模體蛋白質分子空間結構中存在著某些立體形狀和拓撲結構頗為類似的局部區(qū)域8信號肽信號肽在蛋白質合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段，引導蛋白質的跨膜。9弱化子弱化子在操縱區(qū)與結構基因之間的一段可以終止轉錄作用的核苷酸序列。10魔斑魔斑當細菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時，細菌將會產生一個應急反應，停止全部基因的表達。產生這一應急反應的信號是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸（PPPGPP）。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個或幾個操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級調控子或稱為魔斑。11上游啟動子元件上游啟動子元件是指對啟動子的活性起到一種調節(jié)作用的DNA序列，10區(qū)的TATA、35區(qū)的TGACA及增強子，弱化子等。12DNADNA探針探針是帶有標記的一段已知序列DNA，用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應用。13SDSD序列序列是核糖體與MRNA結合序列，對翻譯起到調控作用。14單克隆抗體單克隆抗體只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。15考斯質?？妓官|粒是經過人工構建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩端的COS區(qū)，與質粒連接構成。16藍白斑篩選白斑篩選含LACZ基因（編碼Β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產生藍色，從而使菌株變藍。當外源DNA插入后，LACZ基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細菌。稱之為藍白斑篩選。17順式作用元件順式作用元件在DNA中一段特殊的堿基序列，對基因的表達起到調控作用的基因元件。18KLENOWKLENOW酶DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性19錨定錨定PCRPCR用于擴增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚DG的尾巴，然后分別用多聚DC和已知的序列作為引物進行PCR擴增。20融合蛋白融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接，同時表達翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結合在一起所組成的蛋白質。二、填空1DNA的物理圖譜是DNA分子的（限制性內切酶酶解限制性內切酶酶解）片段的排列順序。2RNA酶的剪切分為（自體催化自體催化）、（異體催化異體催化）兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是（IF1IF1）、（IF2IF2）和（IF3IF3）。4蛋白質的跨膜需要（信號肽信號肽）的引導，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構象的蛋白質）。5啟動子中的元件通?？梢苑譃閮煞N（核心啟動子元件核心啟動子元件）和（上游啟動子元件上游啟動子元件）。6分子生物學的研究內容主要包含（結構分子生物學結構分子生物學）、（基因表達與調控基因表達與調控）、（DNADNA重組技術重組技術）三部分。7證明DNA是遺傳物質的兩個關鍵性實驗是（肺炎球菌感染小鼠肺炎球菌感染小鼠）、（T2T2噬菌體感染大腸桿菌噬菌體感染大腸桿菌）這兩個實驗中主要的論點證據是（生物體吸收的外源生物體吸收的外源DNADNA改變了其遺傳潛能改變了其遺傳潛能）。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點（HNRNAHNRNA在轉變?yōu)樵谵D變?yōu)镸RNAMRNA的過程中經過剪接的過程中經過剪接，）、（MRNAMRNA的5′5′末端被加上一個末端被加上一個M7PGPPPM7PGPPP帽子，在帽子，在MRNA3′MRNA3′末端多了一個多聚腺苷酸末端多了一個多聚腺苷酸POLYAPOLYA尾巴尾巴）。9蛋白質多亞基形式的優(yōu)點是（亞基對亞基對DNADNA的利用來說是一種經濟的方法的利用來說是一種經濟的方法）、（可以減少蛋白質合成過程可以減少蛋白質合成過程中隨機的錯誤對蛋白質活性的影響中隨機的錯誤對蛋白質活性的影響）、（活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關閉活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關閉）。10蛋白質折疊機制首先成核理論的主要內容包括（成核成核）、（結構充實結構充實）、（最后重排最后重排）。11半乳糖對細菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細胞生長可以作為碳源供細胞生長）；另一方面（它又是細胞壁的成它又是細胞壁的成分）。所以需要一個不依賴于CAMPCRP的啟動子S2進行本底水平的永久型合成；同時需要一個依賴于3真核生物增強子GCCAATTATAA5MGPP起始位點11070253對天然質粒的人工構建主要表現在哪些方面對天然質粒的人工構建主要表現在哪些方面天然質粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對之進行改造構建A、加入合適的選擇標記基因，如兩個以上，易于用作選擇通常是抗生素基因。B、增加或減少合適的酶切位點，便于重組。C、縮短長度，切去不必要的片段，提高導入效率，增加裝載量。D、改變復制子，變嚴緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。E、根據基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件4舉例說明差示篩選組織特異舉例說明差示篩選組織特異CDNACDNA的方法的方法制備兩種細胞群體，目的基因在其中一種細胞中表達或高表達，在另一種細胞中不表達或低表達，然后通過雜交對比找到目的基因。例如在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細胞會呈現與正常細胞表達水平不同的MRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關的基因。也可利用誘導的方法，篩選出誘導表達的基因。5雜交瘤細胞系的產生與篩選雜交瘤細胞系的產生與篩選脾B細胞骨髓瘤細胞，加聚乙二醇（PEG）促進細胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B骨髓瘤融合細胞繼續(xù)擴大培養(yǎng)。細胞融合物中包含脾脾融合細胞不能生長，脾細胞不能體外培養(yǎng)。骨骨融合細胞不能利用次黃嘌呤，但可通過第二途徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長。骨脾融合細胞在HAT中能生長，脾細胞可以利用次黃嘌呤，骨細胞提供細胞分裂功能。6、利用雙脫氧末端終止法（、利用雙脫氧末端終止法（SANGERSANGER法）測定法）測定DNADNA一級結構的原理與方法一級結構的原理與方法原理是采用核苷酸鏈終止劑2，，3，雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它缺少形成35磷酸二脂鍵所需要的3OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進一步延長。根據堿基配對原則，每當DNA聚合酶需要DNMP參入到正常延長的DNA鏈中時，就有兩種可能性，一是參入DDNTP結果導致脫氧核苷酸鏈延長的終止；二是參入DNTP使DNA鏈仍可繼續(xù)延長，直至參入下一個DDNTP。根據這一方法，就可得到一組以DDNTP結尾的長短不一的DNA片段。方法是分成四組分別為DDAMP、DDGMP、DDCMP、DDTMP反應后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。7、激活蛋白（、激活蛋白（CAPCAP）對轉錄的正調控作用）對轉錄的正調控作用環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結合后所形成的復合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）。當大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（LAC）等啟動子的功能。一些依賴于CRP的啟動子缺乏一般啟動子所具有的典型的35區(qū)序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶難以與其結合。CAP的存在（功能）能顯著提高酶與啟動子結合常數。主要表現以下二方面①CAP通過改變啟動子的構象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向以便與10區(qū)結合，起到取代35區(qū)功能的作用。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點的結合，從而提高與其特定啟動子結合的概率。8、典型的、典型的DNADNA重組實驗通常包括哪些步驟重組實驗通常包括哪些步驟A、提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個新的重組DNA分子。B、將這個重組DNA分子轉入受體細胞并在受體細胞中復制保存，這個過程稱為轉化。C、對那些吸收了重組DNA的受體細胞進行篩選和鑒定。D、對含有重組DNA的細胞進行大量培養(yǎng)，檢測外援基因是否表達。9、基因文庫的構建對重組子的篩選舉出、基因文庫的構建對重組子的篩選舉出3種方法并簡述過程。種方法并簡述過程。抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭白斑篩選或PCR篩選、差式篩選、DNA探針多數克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。當質粒轉入大腸桿菌中后，該菌便獲得抗性，沒有轉入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。在含有兩個抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個基因并導致該基因失活，就可用兩個分

簡介：茶樹特異資源的調查摘要摘要為更好地保護和利用茶樹特異資源，采用查閱文獻記載后結合實地調查方法，對茶樹特異資源的分布、生境及茶樹種質生長勢、形態(tài)特征、抗逆性和利用現狀等進行調查。關鍵詞茶樹特異資源，品種，我國是茶樹（CAMELLIASINENSIS）的原產地，茶樹種質資源十分豐富。茶樹的形態(tài)學多樣性決定了其在園林綠化有巨大的應用潛力。茶樹種類豐富、形態(tài)多樣、花期長、易造型、繁殖能力強，適合作為觀花觀葉植物和構建盆景、綠籬，同時還具有古樹名木的特殊價值。在未開發(fā)的植物界中挖掘原材料和新能源供人類應用和從已知用途的野生或栽培植物中尋找新用途，是當今世界各國植物學家們研究的重要內容之一。隨著茶產業(yè)的發(fā)展，僅有的喝茶、品茶已不足以滿足人們的需求，開發(fā)茶樹特異資源的應用則成為適應這種需求的合理對策。本文對中國的茶樹特異資源開展調查，初步了解茶樹特異資源概況及植物學特性，為茶樹從單一利用向多功能綜合利用發(fā)展，從單純經濟效益向生態(tài)效益、景觀效益等方位利用發(fā)展提供理論基礎。現有茶樹特異資源的研究現有茶樹特異資源的研究中國是茶樹的起源地，也是茶樹資源最豐富的國家，對茶樹資源的研究占盡天時地利，本文著重于中國茶樹特異資源的研究，包括以下幾方面內容（1）對我國主要產茶區(qū)的茶樹資源的調查。（2）對主要產茶區(qū)的茶樹特異資源的調查。對于現代人來說，是研究茶樹特異資源的起源、形態(tài)特征、植物學特性、堿，適宜偏堿性土壤。植物學特征植物學特征根主根培根發(fā)育形成中軸根，有很強的向地性。側根主根上發(fā)生的根，螺旋線狀排列，呈層狀結構。吸收根側根前端呈乳白色的根，其表面密生根毛。根毛吸收水分和養(yǎng)料的部位1一年生根系2二年生根系3壯年期根系4衰老期根系主干由胚軸生育而成，指根頸至第一級側枝的部位。側枝從主干枝上分生出的枝條，以分枝級數而命名，如一級側枝、二級側枝。生產枝枝冠面上生長營養(yǎng)芽的枝條，對形成新梢的數量和質量有明顯的影響。直立狀半披張狀披張狀

簡介：04基因突變的分子細胞生物學效應,,基因突變的分子細胞生物學效應,前言基因突變導致蛋白功能改變基因突變引起性狀改變的機制,,基因突變→蛋白功能改變→細胞效應→性狀改變,前言,人體疾病是細胞病變的綜合反映，而細胞病變則是細胞在致病因素的作用下，組成細胞的若干分子相互作用的結果。生物因素、理化因素和遺傳因素都可能通過各種途徑影響到細胞內的成分，從而導致細胞病變。,基因突變引起蛋白功能改變,突變影響活性蛋白的生物合成突變改變了蛋白質的功能效應突變蛋白的細胞定位與病變位置的關系蛋白質的分子異常與臨床表現的關系,,,一、突變蛋白,原發(fā)性損害PRIMARYABNORMALITIES突變改變了蛋白質的一級結構繼發(fā)性損害SECONDARYABNORMALITIES突變干擾多肽鏈的合成過程,突變蛋白,突變與疾病的關系,影響MRNA和蛋白質合成的突變,影響MRNA和蛋白質合成的原發(fā)缺陷例如Β珠蛋白生成障礙性貧血點突變導致轉錄受阻Β珠蛋白生成減少,,,影響MRNA和蛋白質合成速率的繼發(fā)缺陷例如急性間隙性卟啉癥,血紅素的合成與急性卟啉癥的發(fā)生,,例如急性間隙性卟啉癥缺乏PBG脫氨酶使細胞內ALA、膽色素原不能轉化為血紅素，血紅素含量下降；而血紅素的下降則調節(jié)著ALA合成酶表達的增加ALA和膽色素原更嚴重的積聚，導致疾病。,,急性間隙性卟啉癥（青春期以后出現神經系統癥狀）,急性間隙性卟啉癥患者,患有急性間隙性卟啉癥的英王喬治,影響蛋白質結構的突變,改變蛋白質結構的原發(fā)性突變,例如HUNTINGTON舞蹈病,,例如HUNTINGTON舞蹈病,,影響蛋白質結構的繼發(fā)性因素翻譯后修飾缺陷例如EHLERSDANLOS綜合征Ⅱ型賴氨酸羥化酶缺陷所致，膠原分子上的賴氨酸不能被羥化，使膠原分子間的連結發(fā)生障礙，而不能適應于組織細胞內膠原網絡結構的形成，最終而導致結締組織的結構改變和功能紊亂。,EHLERSDANLOS綜合征,,影響蛋白質的亞細胞定位的因素,影響蛋白質細胞轉運的原發(fā)缺陷例如甲基丙二氨酸尿癥甲基丙二酰輔酶A羧基變位酶基因突變，使其不能進入線粒體。線粒體內的甲基丙酰COA因此不能轉變?yōu)殓牾OA，在線粒體內堆積而發(fā)病。,,影響蛋白質細胞內轉運的繼發(fā)因素例如I細胞病溶酶體內的酸性水解酶的轉運受阻，甘露糖轉變?yōu)镸6P的酶缺陷，致酸性水解酶不能進入溶酶體而堆積于細胞質中并釋放到體液中。,,I細胞病患者具有多種臨床效應，包括骨骼異常、嚴重的生長遲緩和智力低下等。,影響蛋白質與其它因子結合的突變,影響亞單位組裝成多聚體相互集積的原發(fā)突變例如成骨不全癥蛋白亞單位親和力減低，如Ⅰ型膠原組裝異常致使骨發(fā)育不良。,,由于不能形成多聚體蛋白而引起繼發(fā)性功能缺陷例如ZELLWEGER綜合征（腦肝腎綜合癥）,孿生兄弟中一為ZELLWEGER綜合征患者（右），一正常。,影響輔基或輔助因子與蛋白質結合、去除的突變,影響輔助因子與蛋白質結合的原發(fā)突變例如同型胱氨酸尿癥本病的分子缺陷是由于基因缺陷而致胱硫醚合成酶與輔助因子磷酸吡哆醛的結合障礙而失去活性。大劑量的吡哆醛維生素B6具有一定的治療作用,,,結構基因的突變降低了突變蛋白的穩(wěn)定性,許多結構基因的突變者導致由其所編碼的蛋白穩(wěn)定性降低，而導致遺傳病的發(fā)生。,二、突變對蛋白質功能產生了多種不同的效應,功能丟失的突變功能加強的突變新特性的突變,VONWILLEBRAND病，VWF與血小板結合的功能加強，不易從血小板上分離，患者損傷時，帶有VWF的血小板的凝血作用減弱。,,,,突變對蛋白功能的效應,三、突變蛋白的細胞定位與病理生理發(fā)生部位,組織特異性蛋白（TISSUESPECIFICPROTEIN）突變一般情況下，組織特異性蛋白的突變所引起的病理生理改變常局限于原發(fā)的特定的組織內部。,,持家蛋白的突變持家蛋白突變所引起的臨床效應通常局限在一個或幾個持家蛋白起特殊作用的組織中。,四、突變蛋白質分子病理學與相應疾病的臨床表型之間的關系,同一基因的不同突變產生不同的臨床表型同一單基因（基因座）的不同突變產生極其不同的臨床表型意味著遺傳異質性（等位基因異質性）與臨床異質性之間存在著因果聯系。,,突變所引起的結果有時尚無法預測目前在很多情況下，尚不能估計或推測某一突變應該或不應該引起這樣或那樣的生化或臨床表型。,基因突變引起性狀改變的機制,先天性代謝?。ㄟz傳性酶?。┓肿硬?一、基因突變可引起酶分子的缺陷,結構基因突變引起的酶結構改變①酶完全失去活性；②酶具一定程度的活性，但穩(wěn)定性降低，容易被迅速裂解而失去活性；③酶與底物的親和力降低。④復合酶的酶蛋白分子與輔助因子的親和力下降。調節(jié)基因突變引起酶合成速度下降,二、酶缺陷通過引起代謝缺陷而使機體致病,酶的生成和體內酶促反應,,膜轉運酶的缺陷例如色氨酸加氧酶缺乏癥患者腸粘膜細胞上缺乏色氨酸的轉運酶（色氨酸加氧酶），因而色氨酸不能被吸收。色氨酸是細胞內合成煙酰胺、5羥色胺等的原材料，色氨酸的缺乏導致煙酰胺和5羥色胺不能生成，從而使整個機體的代謝過程發(fā)生紊亂。臨床上主要表現為反復發(fā)作的小腦運動失調、皮膚粗糙和色素沉著或表皮破潰等。,,,色氨酸代謝示意圖,,酶缺陷導致中間產物或底物的堆積例如半乳糖血癥,,,體內半乳糖代謝途徑,,次要代謝途徑的開放，有可能引起某些副產物的推積例如苯丙酮尿癥酶缺陷使代謝終產物減少或缺乏例如白化病,,,苯丙氨酸與酪氨酸代謝1苯丙酮尿癥2尿黑酸尿癥3白化病,,酶缺陷導致反饋抑制減弱,腎上腺皮質激素的合成,,21羥化酶的缺陷，使孕酮和17羥孕酮不能轉化為醛固酮和可的松等鹽皮質激素與糖皮質激素，卻形成大量的雄烯二酮和睪酮。由于血中皮質激素的缺乏，可負反饋性地促使垂體分泌過量的促腎上腺皮質激素ACTH，使腎上腺皮質增生。結果并不能增加皮質激素的合成，而繼續(xù)使睪酮等性激素大量合成。,,例如先天性腎上腺皮質增生癥男嬰患者剛出生時，外生殖器正常或稍大，但不久之后，即體重迅速增長，出現陰毛、腋毛（但睪丸不發(fā)育）等一系列假性早熟現象。女嬰患者剛出生時就表現出外生殖器異常，陰蒂肥大，大陰唇發(fā)育，隨著年齡的增長逐漸男性化，3歲以后就可出現陰毛等假性畸形現象。,,例如先天性腎上腺皮質增生癥,三、基因突變引起非酶蛋白分子的缺陷而導致分子病的發(fā)生,基因突變除了引起酶蛋白的缺陷以外，還可以通過影響非酶蛋白分子的結構和數量，而導致性狀的改變，甚至疾病的發(fā)生。非酶蛋白分子結構和數量的異常所引起的疾病，統稱為分子?。∕OLECULARDISEASE）。,,分子病運輸蛋白、免疫蛋白、膜載體蛋白、受體蛋白,,THEEND,

簡介：前四章1TRNA分子結構特征為（C）A有密碼環(huán)B3’端有多聚AC有反密碼環(huán)D3’端有CCUE以上都不正確2關于2原核生物啟動子結構中，描述正確的是（C）A–25BP處有HOGNESS盒B–10BP處有GC盒C–10BP處有PRIBNOW盒D–35BP處有CAAT盒E以上都不正確3關于蛋白質生物合成時肽鏈延伸，敘述不正確是（D）A核蛋白體沿著MRNA每移動一個密碼子距離，合成一個肽鍵’B受大亞基上轉肽酶的催化C活化的氨基酸進入大亞基A位D肽鏈延伸方向為C端→N端E以上都不正確4擺動配對是指（A）A反密碼的第1位堿基B反密碼的第2位堿C反密碼的第3位堿基D密碼的第1位堿基E以上都不正確5人類基因組大?。˙P）為（B）A35108B30109C20109D25109E以上都不正確6以下有關轉錄敘述，錯誤的是（C）ADNA雙鏈中指導RNA合成的鏈是模板鏈BDNA雙鏈中不指導RNA合成的鏈是編碼鏈C能轉錄RNA的DNA序列稱為結構基因D染色體DNA雙鏈僅一條鏈可轉錄E以上都不正確7與CAP位點結合的物質是（C）12乳糖操縱子上Z、Y、A基因產物是（B）A脫氫酶、黃素酶、COQBΒ半乳糖苷酶、通透酶、乙酰轉移酶C乳糖還原酶、乳糖合成酶、別構酶D葡萄糖6磷酸酶、變位酶、醛縮酶E以上都不正確13關于鋅指的正確敘述是（C）A凡含ZN2的蛋白質均可形成B凡含ZN2的酶皆可形成C必須有ZN2和半胱氨酸或組氨酸形成配價鍵DDNA與ZN2結合就可形成E以上都不正確14以15N標記DNA雙鏈為模板，當以NH4CL作氮源復制DNA時，開始產生不含15N的子代DNA分子時在（B）A第1代B第2代C第3代D第4代E第5代15關于雙向復制，錯誤的是（C）A真核生物是多復制子復制B原核生物只有一個復制起點C原核生物是雙復制子復制DDNA從起始點向兩個方向解鏈E以上都不正確16關于DNA損傷修復的敘述，正確的是（B）ASOS修復就是重組修復B切除修復是最重要的修復方式C重組修復能切去損傷鏈D300NM波長活化光修復酶E以上都不正確

簡介：分子生物學實驗講義分子生物學實驗講義EXPERIMENTALEXPERIMENTALDIRECTIONDIRECTIONOFOFMOLECULARMOLECULARBIOLOGYBIOLOGY昆明醫(yī)學院基礎學院昆明醫(yī)學院基礎學院生物化學教研室生物化學教研室DEPARTMENTDEPARTMENTOFOFBIOCHEMISTRYBIOCHEMISTRYFACULTYFACULTYOFOFBASICBASICMEDICALMEDICALSCIENCESSCIENCESKUNMINGKUNMINGMEDICALMEDICALCOLLEGECOLLEGE20072007年3月1主要設備EQUIPMENTS（1）塑料離心管15ML30（2）塑料離心管架1（3）微量加樣器10ΜL、100ΜL、1000ΜL各一支（4）常用玻璃儀器及滴管等（5）臺式高速離心機（16000RMIN）（6）電泳儀（7）電泳槽（8）樣品槽模板2材料MATERIALS質粒轉化大腸桿菌3試劑AGENTS（1）溶液ⅠPH80GET緩沖液（50MMOLL葡萄糖，10MMOLLEDTA，25MMOLLTRISHCL）；用前加溶菌酶4MGML。（2）溶液Ⅱ1MOLLNAOH40ΜL5SDS40ΜL蒸餾水120ΜL，臨用時配制。（3）溶液ⅢPH48乙酸鉀溶液（60ML5MOLLKAC，115ML冰乙酸，285MLH2O）（4）苯酚氯仿（1∶1，VV）苯酚需在160℃重蒸，加入抗氧化劑8羥基喹啉，使其濃度為01，并用TRISHCL緩沖液平衡兩次。氯仿中加入異戊醇，氯仿異戊醇（24∶1，VV）。（5）PH80TE緩沖液10MMOLLTRIS，1MMOLLEDTA，其中含有RNA酶（RNASE）20ΜGML。（6）TAE電泳緩沖液（7）DNA染色試劑SYBRGREEN或EB染色液（8）10X上樣緩沖液（9）DNA分子量標準物（DNAMARKER）

簡介：1醫(yī)學細胞與分子生物學習題庫標準答案醫(yī)學細胞與分子生物學習題庫標準答案一、名詞解釋一、名詞解釋1高度重復基因在真核生物細胞基因組中重復出現可達106次以上的DNA序列，稱為高度重復序列基因或高度重復序列DNA。2斷裂基因真核生物大部分基因含有內含子，基因是不連續(xù)的，故稱斷裂基因。3基因組細胞或生物體的整套單倍體遺傳物質，稱為基因組?；蚪M的大小用全部DNA的堿基對總數表示。4基因是核酸分子中遺傳信息的基本單位，是指RNA序列信息及表達這些信息所必需的全部核苷酸序列?，F代分子生物學的基因概念是合成有功能的蛋白質或RNA所必需的全部DNA序列（除部分病毒RNA），即一個基因不僅包括編碼蛋白質或RNA的核酸序列，還應包括為保證轉錄所必需的調控序列。5微衛(wèi)星DNA6基因文庫是指含有某種生物體（或組織、細胞）全部基因的隨機片段的重組DNA克隆群體。7內含子真核生物DNA分子中插入外顯子之間的非編碼序列。8外顯子真核生物DNA分子中編碼蛋白質的序列。9基因表達的調控機體的各種細胞中含有相同的遺傳信息相同的結構基因，但并非在所有細胞中同時表達，而必須根據機體的不同發(fā)育階段、不同的組織細胞及不同的功能狀態(tài)，選擇性、程序性地表達特定數量的特定基因，這就叫基因表達的調控。10衛(wèi)星DNA是出現在非編碼區(qū)的串聯重復序列。11基因表達是指原核生物和真核生物基因組中特定的結構基因所攜帶的遺傳信息，經過轉錄、翻譯等一系列過程，合成具有特定的生物學功能的各種蛋白質。表現出特定的生物學效應的全過程。12增強子指位于啟動子上游或下游并通過啟動子增強鄰近基因轉錄效率的DNA順序，增強子本身不具備啟動子活性。13順式作用元件指某些能影響基因表達但不編碼蛋白質和RNA的DNA序列，按照功能分為啟動子、增強子、終止子、沉默子和衰減子等。3重組體的過程，其產物常常稱為重組子。重組體是由兩種不同來源的DNA組合而成，所以又稱為異源嵌合DNA。28轉化29感受態(tài)細胞30銜接物31溶原生長32探針是指帶有放射性同位素、生物素或其他活性物質標記的某種特定的DNA或RNA片段，用于核酸雜交技術以檢測待測樣品中的靶序列。33核酸雜交來源不同的兩條單鏈核酸分子通過堿基互補可形成異源雙螺旋，稱為核酸分子雜交。34陽性克隆是指目的DNA轉化入宿主細胞的克隆。35陰性克隆36PCRPCR是一種體外擴增特異DNA片段的技術其原理類似于DNA的體內擴增。它包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個基本步驟。37固相雜交結合于某種固相上的待測樣品，與溶解在雜交液中的探針進行雜交，稱為固相雜交。38液相雜交39預雜交為減少探針與廣泛存在的非互補核酸的非特異性結合，在雜交前可用封閉物將這些非特異性位點封閉。這一在雜交前的處理過程，稱為預雜交。40印跡雜交41雜交嚴格度42解鏈溫度43增色效應DNA變性后，DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應，可以作為DNA變性的指標。44C值每種真核生物的單倍體基因組中的全部DNA量稱為C值。45假陽性克隆46C值悖理C值與生物進化復雜性不相對應的現象，稱為C值悖理。47基因簇48轉基因49基因家族真核細胞的基因組中有許多來源相同、結構相似、功能相關的基

簡介：1一、名詞解釋一、名詞解釋1、醫(yī)學分子生物學、醫(yī)學分子生物學是分子生物學的重要分支，是一門新興的交叉學科。是從分子水平上研究人體和疾病相關生物在正常和疾病狀態(tài)下的生命活動及其規(guī)律，從分子水平上開展疾病的預防、診斷和治療研究的學科。2、基因、基因GENES基因是負責編碼RNA或一條多肽鏈DNA片段，包括編碼序列、編碼序列外的側翼序列及插入序列。是決定遺傳性狀的功能單位。3、結構基因、結構基因STRUCTUREGENES基因中編碼RNA或蛋白質的DNA序列稱為結構基因。4、基因組、基因組GENOME一個細胞或病毒的全部遺傳信息。（細胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質的總和。）真核生物基因組是指一套完整單倍體DNA（染色體DNA）和線粒體DNA的全部序列，包括編碼序列和非編碼序列。5、GTAG法則法則真核生物基因的外顯子與內含子接頭處都有一段高度保守的一致性序列，即內含子5’端大多數是以GT開始，3’端大多是以AG結束。6、端粒、端粒以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結構叫端粒。該結構是一段DNA序列和蛋白質形成的一種復合體，僅在真核細胞染色體末端存在。端粒DNA由重復序列組成，人類端粒一端是TTAGGG另一端是AATCCC7、操縱子、操縱子是指數個功能上相關的結構基因串聯在一起，構成信息區(qū)，連同其上游的調控區(qū)（包括啟動子和操縱基因）以及下游的轉錄終止信號所構成的基因表達單位。一個操縱子只含一個啟動序列和數個可轉錄的結構基因。在同一個啟動序列控制下，操縱子可轉錄出多順反子MRNA。8、操縱元件、操縱元件是一段能夠被不同基因表達調控蛋白質識別和結合的DNA序列，是決定基因表達效率的關鍵元件。9、順式作用元件、順式作用元件是指那些與結構基因表達調控相關、能夠被基因調控蛋白特異性識別和結合的特異DNA序列。包括啟動子、上游啟動子元件、增強子、反應元件和POLYA加尾信號。10、反式作用因子、反式作用因子是指真核細胞內含有的大量可以通過直接或間接結合順式作用元件而調節(jié)基因轉錄活性的蛋白質因子。11、啟動子、啟動子是能夠被RNA聚合酶特異性識別并與其結合并開始轉錄的核苷酸序列。（TATABOX、CAATBOX、GCBOX）12、增強子、增強子ENHANCER是一段短的DNA序列，其中含有多個作用元件，可以特異性地與轉錄因子結合，增強基因的轉錄活性。它可位于被增強的轉錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠。13、POLYA加尾信號加尾信號含有Ⅱ類啟動子的基因在末端還有一段特定保守序列AATAAA。此位點于下游有一段GT或T豐富區(qū)，與AATAAA序列共同構成POLYA加尾信號。14、多順反子、多順反子MRNA即每一個MRNA分子帶有幾鐘蛋白質的遺傳信息（來自幾個結構基因），利用共同的啟動子及終止信號，組成“操縱子”的基因表達調控單元。15、單順反子、單順反子MRNA一個編碼基因轉錄生成一個MRNA分子，經翻譯生成一條多肽鏈，基本上沒有操縱子的結構。16、逆轉錄病毒、逆轉錄病毒是一類特殊的單股正鏈RNA病毒，在這些病毒顆粒中帶有依賴RNA的DNA聚合酶，即逆轉錄酶，能使RNA反向轉錄生成DNA。逆轉錄病毒基因組一般包括三個基本的結構基因，即GAG，POL，ENV，分別編碼核心蛋白、逆轉錄酶和膜蛋白。17、轉座現象、轉座現象轉座因子的插入，阻止了插入位點的基因表達的現象。18、轉座子（、轉座子（TRANSPOSONTN）這是一類長度在2000～20000BP之間較大的轉座因子，如TN1681TN420它們除了帶有與轉座有關的基因以外，還帶有其他基因，如TN903TN5帶有卡那霉素抗藥基因等。19、質粒、質粒PLAS是存在于細菌染色體外的、具有自主復制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。20、C值單倍體基因組中的全部DNA量。21、重復序列、重復序列真核生物基因組中非編碼序列占95％以上，這些非編碼序列中一部分是基因的內含子、調控序列等，另一部分便是重復序列；重復序列中除了編碼RRNA、TRNA、組蛋白及免疫球蛋白的結構基因外，大部分是非編碼序列。其功能主要與基因組的穩(wěn)定性、組織形式以及基因的表達調控有關。22、微衛(wèi)星、微衛(wèi)星DNA又稱為短串聯重復（STR），是一類更簡單的寡核苷酸串聯重復序列，其重復單位為26BP，重復次數10～60次左右，其總長度通常小于150BP，分布在所有的染色體。微衛(wèi)星DNA由于重復單位的重復次數不同而具有高度的遺傳多態(tài)性，并且遵照孟德爾遺傳規(guī)律，可以作為很好的遺傳標記。23、衛(wèi)星、衛(wèi)星DNA是出現在非編碼區(qū)的串聯重復序列。其特點是具有固定的重復單位，該重復單位首尾相連形成重復序列片段，通常存在于間隔DNA和內含子中。串聯重復序列是形成衛(wèi)星DNA的基礎。分類大衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA。24、回文結構、回文結構在DNA鏈上，兩個拷貝反向串聯在一起，中間沒有間隔序列。25、RFLP即限制性片段長度多態(tài)性即限制性片段長度多態(tài)性，個體之間DNA的核苷酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性。由于堿基組成的變化而改變了限制性內切酶的酶切位點，從而導致相應的限制性片段的長度和數量發(fā)生變化，稱為RFLP。352、信息分子、信息分子攜帶生物信息，在細胞之間進行傳遞的小分子化學物質53、第一信使、第一信使在細胞間進行信息傳遞的信息分子54、第二信使、第二信使將第一信使的信息在細胞內進一步傳遞的信息分子55、受體、受體靶細胞中能夠被體內一些生物活性物質如激素、細胞因子所識別，并與之結合將信號傳至細胞內產生生物效應的物質，也即細胞接受細胞外信號的接收裝置，直接參與細胞的信息傳遞。受體的化學性質主要為蛋白質。56、酶偶聯受體、酶偶聯受體指那些受體自身具有酶的活性，或者自身沒有酶的活性，但與酶分子結合存在的一類受體，主要是生成因子和細胞因子受體。57、細胞因子、細胞因子是由免疫細胞或非免疫細胞分泌的，能參與調控真核細胞的增殖、分化、代謝和運動功能等多項生命過程的生物活性的多肽分子。同一細胞因子作用于不同的靶細胞，可以產生不同的效應。58、蛋白激酶（、蛋白激酶（PROTEINKINASE））能夠將Γ磷酸基團從磷酸供體分子上轉移至底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。59、蛋白磷酸酶、蛋白磷酸酶（PROTEINPHOSPHATASE）是具有催化已經磷酸化的蛋白質分子發(fā)生去磷酸化反應的一類酶分子，與蛋白激酶相對應存在，共同構成磷酸化與去磷酸化這一重要的蛋白質活性的開關系統。對蛋白激酶所引起的變化產生衰減信號60、接頭蛋白、接頭蛋白也稱調控結合元件也稱調控結合元件MODULARBINDINGDOMAIN即信號分子中存在著的一些特殊的結構域，大約50100個氨基酸構成，信號分子通過這些特殊結構域相互識別和作用而有序銜接，形成不同的信號傳遞鏈61、G蛋白蛋白GTP結合蛋白，結合GTP時為活化形式，GTP水解成GDP時回到非活性狀態(tài)，活化的G蛋白通過變構調節(jié)作用激活下游信號分子。由Α亞基和ΒΓ亞基結合成三聚體62、周期蛋白、周期蛋白是一類呈細胞周期特異性或時相性表達、累積與分解的蛋白質，它與周期素依賴性激酶共同影響細胞周期的運行。63、細胞凋亡（、細胞凋亡（APOPTOSIS是機體細胞在正常生理或病理狀態(tài)下發(fā)生的一種自發(fā)的程序性死亡過程，它的發(fā)生受機體的嚴密調控。細胞凋亡的形態(tài)特點染色體固縮、膜起泡、核膜消失、DNA斷裂凋亡小體形成。64、原癌基因（、原癌基因（PROTOONCOGENE是一類廣泛存在生物體中，高度保守的基因，其產物具有調控細胞增生的重要功能，當其受某些因素的影響，能發(fā)生突變（活化）成為癌基因，導致細胞惡性轉化。65、抑癌基因（、抑癌基因（TUMSUPPRESSGENE）指存在于正常細胞內的一大類可抑制細胞生長并具有潛在抑癌作用的基因，當這類基因發(fā)生突變、缺失或失活時，可引起細胞惡性轉化而導致腫瘤的發(fā)生。6666、癌基因、癌基因是細胞內控制細胞生長的基因，具有潛在的誘導細胞惡性轉化的特性。當癌基因結構或表達發(fā)生異常時，其產物可使細胞無限制增殖，導致腫瘤的發(fā)生。包括病毒癌基因和細胞癌基因。67、細胞癌基因、細胞癌基因存在于正常的細胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。68、病毒癌基因、病毒癌基因存在于病毒（大多是逆轉錄病毒）基因組中能使靶細胞發(fā)生惡性轉化的基因。它不編碼病毒結構成分，對病毒無復制作用，但是當受到外界的條件激活時可產生誘導腫瘤發(fā)生的作用。69、基因診斷、基因診斷利用現代分子生物學和分子遺傳學的技術和方法，直接監(jiān)測基因結構及其表達水平是否正常，從而對疾病作出診斷的方法。70、DNA變性變性在物理或化學因素的作用下，導致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價鍵則不受影響。71、DNA復性復性當促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過堿基互補配對結合形成DNA雙螺旋結構。72、退火、退火指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補區(qū)域結合形成雜交鏈。73、PCR概念概念PCR是近年來發(fā)展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術，它根據體內細胞分裂時DNA半保留復制機理，能快速、特異地在體外將目的DNA片段擴增數百萬倍。74、RTPCR技術技術以RNA為模板體外擴增CDNA的技術，可用于定性和相對定量（半定量）。75、RNA酶保護試驗（酶保護試驗（RPA）是一種液相雜交技術，通過RNASEA和RNASET1專一性降解單鏈RNA，分析受到保護的雜交雙鏈RNA，以確定RNA的剪接情況、剪接位點以及基因內含子的可能位置等。7676、筑巢、筑巢PCRPCR先用一對外側引物擴增含目的基因的大片段，再用內側引物以大片段為摸板擴增獲取目的基因。可以提高PCR的效率和特異性。7777、原位、原位PCRPCR以組織固定處理細胞內的DNA或RNA作為靶序列，進行PCR反應的過程。7878、定量、定量PCRPCR基因表達涉及的轉錄水平的研究常需要對MRNA進行定量測定，對此采用的PCR技術就叫定量PCR。7979、基因打靶、基因打靶是指通過DNA定點同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內研究此基因的功能。80、WESTERNBLOT技術技術是一種免疫印跡技術，以偶連標記物的抗體分子作為探針，檢測轉移到固相支持物上的蛋白質分子。81、熒光原位雜交、熒光原位雜交是一種非放射性的原位雜交方

簡介：分子生物學分子生物學閉卷閉卷一、名詞解釋一、名詞解釋8個個41、有機溶劑沉淀法有機溶劑沉淀法2、基因組基因組（GENOME）是一個細胞或一種生物體的整套遺傳物質，包括基因和非編碼DNA。即該生物體的一套染色體中的完整的DNA序列。3、LCMSLCMS4、GENEGENETHERAPYTHERAPY［基因治療］［基因治療］（狹義）將具有正常功能的基因置換或增補患者體內有缺陷的基因，從而達到治療疾病的目的。（廣義）將某種遺傳物質轉移到患者細胞內，使其在體內發(fā)揮作用，最終達到治療疾病的目的。5、REALTIMEREALTIME（熒光定量）（熒光定量）PCRPCR在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。6、基因診斷、基因診斷即分子診斷，指通過分子生物學和分子遺傳學技術，直接檢測遺傳物質結構和表達是否異常，從而對人體的健康狀態(tài)和疾病做出診斷的方法。7、分子標記物、分子標記物8、逆轉錄、逆轉錄PCRPCRP207P207二、問答題二、問答題8個個8，8，8，8，1010，8，10101、酵母雙雜交技術的原理和應用［、酵母雙雜交技術的原理和應用［1313、1414考題］考題］P41P412、蛋白質分離純化的基本原則常用有哪些方法、蛋白質分離純化的基本原則常用有哪些方法3、基因診斷的方法哪些杜氏肌營養(yǎng)不良（、基因診斷的方法哪些杜氏肌營養(yǎng)不良（DMDDMD的基因診斷可采用什么方法原理與步驟如何的基因診斷可采用什么方法原理與步驟如何P78P78基因診斷的方法有PCR；核酸雜交；基因芯片；BDNA；NASBA；測序。杜氏肌營養(yǎng)不良（DMD的診斷方法多重PCR4、PUCPUC載體常用的篩選方法是什么載體常用的篩選方法是什么原理與步驟［］原理與步驟［］5、寡核苷酸探針的設計原則、寡核苷酸探針的設計原則1探針長度一般要求在10～50BP。2G／C含量為40％～60％。3探針分子中應避免互補序列。4避免同一堿基連續(xù)出現，一般不能多于4個，如GGGG或CCCC。5借助計算機相應軟件與已知的各種基因序列進行同源性比較。6、CTCT值的含義與作用。值的含義與作用。意義確定初始模板的濃度。初始DNA量越多熒光達到某一值（域值）時所需要的循環(huán)數越少LOG濃度與循環(huán)數呈線性關系，根據樣品擴增達到域值的循環(huán)數就可計算出樣品中所含的模板量7、閱讀文獻、閱讀文獻4原題。原題。8、骨髓干細胞的特點。、骨髓干細胞的特點?！?】名詞解釋加灰為作業(yè)涉及的13年考題，加框為新增作業(yè)題1、生物大分子、生物大分子具有較大的分子量，由簡單的小分子（核苷酸或氨基酸）排列組成，蘊含豐富信息并且具有復雜的空間結構。2、蛋白質組（蛋白質組（PROTEOMEPROTEOME）指由一個基因組，或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。3、PROBEPROBE核酸探針核酸探針是指帶有某些標記物（如放射性同位素、熒光物質等）的特異性核酸序列片段，可與互補片段結合成雙鏈結構，從而檢測互補鏈的位置。4、基因芯片（基因芯片（GENEGENECHIPCHIP）又稱DNADNA微陣列（微陣列（MICROARRAYMICROARRAY），是由大量DNA或寡核苷酸探針密集排列所形成的探針陣列，其工作的基本原理是通過雜交檢測信息。5、DNACHIPDNACHIPDNADNA芯片芯片。指通過微陣列技術將高密度DNA片斷陣列通過高速機器人或原位合成方式以一定的順序或排列方式使其附著在如玻璃片等固相表面作為探針，熒光標記的樣品DNARNA借助堿基互補作用與探針進行雜交，從而進行大量的基因表達及檢測等方面的研究。6、SNPSNP［單核苷酸多態(tài)性］單核苷酸多態(tài)性］指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，是決定個體差異5、酚使蛋白質變性沉淀，抑制DNA酶活性6、PH80TRIS溶解保證提后DNA進入水相，避免滯留于蛋白質層。1凝膠過濾層析凝膠過濾層析凝膠是一種具有多孔、網狀結構的分析篩，利用這種凝膠分子篩對大小、形狀不同的分子進行層析分離，稱為凝膠層析。其原理是當樣品溶液通過凝膠柱時，相對分子量較大的物質由于直徑大于凝膠網孔而只能沿著凝膠顆粒間的孔隙，隨著溶液流動，因此流程較短，向前移動速度快而首先流出層析柱；相對分子量較小的物質直徑小于凝膠網孔，可自由的進出凝膠顆粒的網孔，在向下移動過程中，它們從凝膠內擴散到膠?？紫逗笤龠M入另一凝膠顆粒，如此不斷的進入與溢出，使流量增長，移動速率慢而最后流出層析柱；而中等大小的分子將在大、小分子物質之間被洗脫，這樣經過層析柱后，使混合物中的各物質按其分子大小不同而被分離。2巢式巢式PCRPCR（聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應POLYMERASEPOLYMERASECHAINCHAINREACTIONREACTION）是指利用２對引物，第一對引物的序列在模板外側，它做PCR的擴增產物作為第二對引物退火的模板，第二對引物相對第一對引物在模板的內側，再做PCR，由此提高靈敏度和特異性的PCR技術。33REALTIMEREALTIME（熒光定量）（熒光定量）PCRPCR在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。4變性變性DENATURATIONDENATURATION在某些理化因素的作用下，維系DNA分子二級結構的氫鍵和堿基堆積力受到破壞，DNA由雙螺旋變成單鏈，作為與引物結合及TAPDNA聚合酶延伸的模板，此反應過程稱為變性。5復性（復性（RENATURATIONRENATURATION指變性DNA在適當條件下，二條互補鏈全部或部分恢復到天然雙螺旋結構的現象，它是變性的一種逆轉過程。6解鏈溫度（融解溫度，TMTMMELTINGTEMPERATUREDNA的變性從開始解鏈到完全解鏈是在一個相當窄的溫度內完成的使50的DNA發(fā)生變性時的環(huán)境溫度即稱之TM。7增色效應DNA變性后對260NM紫外光吸收增加的現象。8減色效應變性DNA復性后對260NM紫外光吸收減少的現象。99退火退火（ANNEALINGANNEALING）當溫度由高溫緩慢下降時，熱變性的DNA單鏈在堿基互補的基礎上重新形成氫鍵開始復性的過程，稱之為“退火”。由于反應體系中引物濃度遠遠大于模板DNA濃度，且引物結構簡單，這極大地限制了變性后模板DNA單鏈之間的互補結合。編碼序列稱外顯子編碼序列稱外顯子EXONEXON，非編碼序列稱內含子，非編碼序列稱內含子INTRONINTRON。有些真核病毒的部分序列，對某一個基因來說是內。有些真核病毒的部分序列，對某一個基因來說是內含子，而對另一個基因而言卻是外顯子。含子，而對另一個基因而言卻是外顯子。20132013年作業(yè)涉及年作業(yè)涉及1基因診斷基因診斷即分子診斷，指通過分子生物學和分子遺傳學技術，直接檢測遺傳物質結構和表達是否異常，從而對疾病作出判斷的方法。2無義突變無義突變是編碼某一氨基酸的三聯體密碼經堿基替換后，變成不編碼任何氨基酸的終止密碼UAA、UAG或UGA。雖然無義突變并不引起氨基酸編碼的錯誤，但由于終止密碼出現在一條MRNA的中間部位，就使翻譯時多肽鏈的終止就此終止，形成一條不完整的多肽鏈。3動態(tài)突變動態(tài)突變動態(tài)突變也可稱為基因組不穩(wěn)定性GENOMICINSTABILITY。在研究與人類神經系統遺傳性疾病相關的基因時，發(fā)現患者基因中某種三核苷酸的重復拷貝數急劇增加，這種突變導致了疾病的發(fā)生。這種三核苷酸重復拷貝數增加，不僅可發(fā)生在上代的生殖細胞中而遺傳給下一代，而且在當代的體細胞中也可發(fā)生，并同樣具有表型效應。除此之外，一個個體的不同類型細胞或同一類型的不同細胞中，三核苷酸重復拷貝數也可以是不同的。重復拷貝數改變后的基因的可突變性，將不同于拷貝數改變前的基因。這不同于以往發(fā)現的基因突變，所以稱之為動態(tài)突變DYNAMICMUTATION。4表觀遺傳表觀遺傳表觀遺傳是指在基因的核苷酸序列不發(fā)生改變的情況下，基因表達可遺傳的變化的現象，例如DNA甲基化，基因組印記，母體效應，基因沉默，核仁顯性，休眠轉座子激活和RNA編輯等。5MIRNA是由2125個核苷酸組成的非編碼RNA；它通過與靶基因的3UTR的配對，促進MRNA的降解或抑制MRNA的翻譯從而抑制其靶基因的表達；它在生物體生長發(fā)育、細胞增殖、分化、凋亡以及人類各種疾病的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要的調控作用。6C值悖論值悖論（CVALUEPARADOX）生物體的進化程度與基因組大小之間不完全成比例的現象稱為C值矛盾7開放閱讀框架開放閱讀框架OPENOPENREADINGREADINGFRAMEFRAME，FF在DNA鏈上，由蛋白質合成的起始密碼開始，到終止密碼為止的一個連續(xù)編碼序列。

簡介：延安大學繼續(xù)教育學院商洛函授站第二學期課程作業(yè)課程名稱生物化學與分子生物學生物化學與分子生物學授課年級2014專業(yè)臨床班級專升本姓名李金鋒6、基因診斷是用放射性同位素、熒光分子等標記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理，鑒定被檢測標本上的遺傳信息，達到檢測疾病的目的。7、基因治療是指將外源正?；驅氚屑毎?，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，達到治療目的。8、轉基因動物由于不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，因此對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，如果把外源基因整合或導入動物染色體基因中，那么這個外源基因就被稱為轉基因，這種動物就是轉基因動物。9、探針探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段（大約是20到500BP），用于檢測與其互補的核酸序列。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈，隨后用放射性同位素（通常用磷32）、螢光染料或者酶（如辣根過氧化物酶）標記成為探針。10、載體指在基因工程重組DNA技術中將DNA片段（目的基因）轉移至受體細胞的一種能自我復制的DNA分子。三種最常用的載體是細菌質粒、噬菌體和動植物病毒。11核酶（RIBOZYME）是具有催化功能的RNA分子，是生物催化劑，可降解特異的MRNA序列。核酶又稱核酸類酶、酶RNA、核酶類酶RNA。大多數核酶通過催化轉磷酸酯和磷酸二酯鍵水解反應參與RNA自身剪切、加工過程。它的發(fā)現打破了酶是蛋白質的傳統觀念。三、單項選擇題三、單項選擇題1、在核酸中一般不含有的元素是（D）A、碳B、氫C、氧D、硫2、通常既不見于DNA又不見于RNA的堿基是（B）A、腺嘌呤B、黃嘌呤C、鳥嘌呤D、胸腺嘧啶3、下列哪種堿基只存在于MRNA而不存在于DNA中（B）A、腺嘌呤B、尿嘧啶C、鳥嘌呤D、胞嘧啶4、DNA與RNA完全水解后，其產物的特點是（A）A、戊糖不同、堿基部分不同B、戊糖不同、堿基完全相同C、戊糖相同、堿基完全相同D、戊糖相同、堿基部分不同5、在核酸分子中核苷酸之間的連接方式是（C）A、3′，3′，磷酸二酯鍵B、糖苷鍵C、3′，5′，磷酸二酯鍵D、肽鍵6、對于一個正協同效應別構酶當有激活劑（正調節(jié)物）存在下，其協同性（B）A，減小；B，增加；C，不變7、親核催化中酶蛋白上最常見的提供親核基團的殘基是（A）A，HIS，SER，CYS；B，HIS，LYS，ARG；C，ASP，GLU，PHE；D，ASN，GLN，TRP8、“自殺性底物”指的是（C）A，一種可逆抑制劑；B，一種親核標記試劑；C，一種不可逆抑制劑。9、表面生長因子（EGF）受體和轉化生長因子Β（TGFΒ）受體（D）A，皆為蛋白酪氨酸激酶；B，皆為蛋白絲氨酸蘇氨酸激酶；

簡介：○○○○學院專業(yè)班級學號姓名評卷密封線密封線內不要答題，密封線外不準填寫考生信息，違者考試成績按0分處理評卷密封線中南大學考試試卷20052006學年下學期醫(yī)學分子生物學課程時間110分鐘一、填空題（每空1分，共20分）1分子生物學是從分子水平研究生命現象、生命的本質。生命活動及其規(guī)律的科學。2人類基因組包括兩個部分DNA即染色體DNA（或單倍體DNA）（核內DNA05分）和染色體外DNA（線粒體DNA）（核外DNA05分）。3主要的DNA修復方式重組修復、切除修復和SOS修復。4真核生物轉錄水平的調控主要是通過順式作用元件、反式作用因子和RNA聚合酶的相互作用來完成。5可用于分析基因轉錄水平變化的技術有NTHERNBLOTDNA芯片（核酸分子雜交05分）和RTPCR。6反義RNA是指能與MRNA互補配對的RNA分子。7基因突變主要是DNA一級結構的改變，其分子機制可以是替換、插入或缺失等。8基因治療的策略基因添加（增補）、基因干預、基因置換、導入自殺基因、基因修飾。9在特定環(huán)境信號刺激下，有些基因的表達表現為開放或增強，這種表達方式稱為誘導表達，相反，有些基因的表達表現為關閉或下降，這種表達方式稱為阻遏表達。10寫出三種真核細胞轉染的方法磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、DEAE葡聚糖法、顯微注射法、脂質體介導法。題號一二三四合計得分評卷人復查人得分評卷人4什么是錯義突變由于DNA分子中堿基的取代（1）經轉錄產生MRNA后相應的密碼子發(fā)生了變化1分使決定某一氨基酸的密碼子變?yōu)榱硪环N氨基酸的密碼子（1）能使它所編碼的蛋白質的氨基酸組成和排列順序都發(fā)生了改變1分。這種基因突變叫錯義突變。（1）5WHATISRNAINTERFERENCERNAIRNAI即RNARNA干擾（涉）干擾（涉）。（1）是將一段短雙鏈的RNA1分序列導入機體或細胞中（1）誘導機體或細胞中與之有同源的序列MRNA發(fā)生降解，（1）導致基因的表達受到抑制甚至表達受到完全抑制的現象。（1）6簡述PCR的應用進行DNA1分體外擴增1分基因克隆1分分析基因拷貝數1分基因診斷1分。其他答案不計分。7WHATISGENETHERAPY基因治療（1分）是將目的基因1分導入靶細胞內（1分），成為宿主細胞遺傳物質的一部分（1分），目的基因表達產物對疾病起治療作用（1分）。8簡述人類基因組計劃的研究目標及研究內容研究目標闡明構成人類的全部DNA的結構（1分）；闡明基因的編碼方式和分布特點（1分）；理解基因及其調控序列之間的相互關系（1分）；理解DNA全部序列所蘊藏的意義（1分）。研究內容完成遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜、轉錄圖譜分析（1分）。四、論述題（每題15分，共30分）1已知一個基因的CDNA序列，現在要把該基因插入質粒載體中，論述其基因克隆的過程。獲得目的基因（1分）根據該基因的CDNA序列從CDNA文庫中獲得（1分）人工合成（1分）提取MRNARTPCR擴增獲得目的基因（1分）選擇合適的載體1分DNA分子的體外連接1分粘性末端法；平端連接（1分）人工接頭法同聚體尾法（1分）將重組DNA導入宿主細胞1分用轉化法（1分）轉染法（1分）目的基因的篩選和鑒定1分遺傳學方法或答抗生素法或藍白篩選（1分）免疫學方法核酸雜交法PCR技術（1分）酶切鑒定回答問題清晰（1分）2論述核酸分子雜交SOUTHERNBLOT和NTHERNBLOT的基本原理及其在基因診斷中的應用。核酸分子雜交是分子生物學研究的基礎技術之一，從整體上可分為SOUTHERNBLOT和NTHERNBLOT兩大類（1分）。SOUTHERNBLOT用于基因DNA分子的檢測（1分）。如果基因拷貝數發(fā)生變化（增多或減少），但基因序列沒有改變，就可以根據基因序列合成探針（1分）；利用同源互補序列可以退火形成異源雙鏈（1分）的原理，探測染色體上能與探針結合的DNA序列（1分）。如果將兩部分綜合起來作答，需緊扣“探針”、“同源互補序列”、“異源雙鏈”等關鍵點，如用“同源互補序列”給1分；如答“不同來源的互補核酸序列”給1分）。SOUTHERNBLOT在基因診斷中多用于檢測特異性DNA的存在（1分），包括DNA片段的定位和測定分子量（1分）；進行限制性酶譜分析（1分）及基因突變分析（1分）。NTHERNBLOT則用于RNA分子的檢測，其原理和操作基本過程與SOUTHERNBLOT相似（1分）。在基因診斷中用于RNA的定性及相對定量（1分；如答“分析RNA相對水平、在轉錄水平上分析RNA等，給1分）分析。

簡介：分子生物學復習題第一章1、蛋白質的三維結構稱為構象CONFMATION，指的是蛋白質分子中所有原子在三維空間中的排布，并不涉及共價鍵的斷裂和生成所發(fā)生的變化。2、維持和穩(wěn)定蛋白質高級結構的因素有共價鍵二硫鍵和次級鍵，次級鍵有4種類型，即離子鍵、氫鍵、疏水性相互作用和范德瓦力。3、蛋白質的二級結構是指肽鏈中局部肽段的構象，它們是完整肽鏈構象三級結構的結構單元，是蛋白質復雜的立體結構的基礎，因此二級結構也可以稱為構象單元。Α螺旋、Β折疊是常見的二級結構。4、一些肽段有形成Α螺旋和Β折疊兩種構象的可能性或形成勢，這類肽段被稱為兩可肽。5、兩個或幾個二級結構單元被連接肽段連接起來，進一步組合成有特殊幾何排列的局域立體結構，稱為超二級結構（介于二、三級結構間）。超二級結構的基本組織形式有ΑΑ，ΒΑΒ和ΒΒ等3類6、蛋白質家族FAMILY一類蛋白質的一級結構有30％以上同源性，或一級結構同源性很低，但它們的結構和功能相似，它們也屬于同一家族。例如球蛋白的氨基酸序列相差很大，但屬于同一家族。超家族SUPERFAMILY有些蛋白質家族之間，一級結構序列的同源性較低，但在許多情況下，它們的結構和功能存在一定的相似性。這表明它們可能存在共同的進化起源。這些蛋白質家族屬于同一超家族。7、結構域是一個連貫的三維結構，是可互換并且半獨立的功能單位，在真核細胞中由一個外顯子編碼，由至少40個以上多至200個殘基構成最小、最緊密也最穩(wěn)定的結構，作為結構和功能單位，會重復出現在同一蛋白質或不同蛋白質中。8、蛋白質一級結構所提供的信息有哪些Α螺旋、Β折疊各自的特點第二章1、DNA是由脫氧核糖核苷酸組成的長鏈多聚物，是遺傳物質。具有下列基本特性①具有穩(wěn)定的結構，能進行復制，特定的結構能傳遞給子代；②攜帶生命的遺傳信息，以決定生命的產生、生長和發(fā)育；③能產生遺傳的變異，使進化永不枯竭。2、DNA鏈的方向總是理解為從5’P端到3’OH端。DNA的一級結構實際上就是DNA分子內堿基的排列順序。3、DNA是雙螺旋結構主鏈由脫氧核糖和磷酸基團以3’，5’磷酸二酯鍵交互連接構成的，在雙螺旋的外側，堿基在內側，堿基必須配對。一條鏈繞著另一條鏈旋轉、盤繞，一條鏈上的嘌呤與另一條鏈上的嘧啶相互配對，嘌呤與嘧啶以氫鍵保持在一起。4、雙螺旋DNA熔解成單鏈的現象稱為DNA變性。已經變性的DNA在一定條件下重新恢復雙鏈的過程稱為復性。5、染色質是以雙鏈DNA為骨架，與組蛋白HISTON、非組蛋白NONHISTON以及少量的各種RNA等共同組成絲狀結構。在染色質中，DNA和組蛋白的組成非常穩(wěn)定，非組蛋白和的間隔區(qū)可以有很大的長度差異和序列差異。重要的基因家族RRNA基因家族、5SRRNA基因、組蛋白基因家族、珠蛋白基因家族、生長激素基因家族、超基因。7、超基因SUPERGENE是指一組由多基因和單基因組成的更大的基因家族。在高等真核細胞中，一個基因簇內含有數百個功能相關的基因，它們可能是由基因擴增后結構上輕微變化而產生的，這些基因的結構有程度不等的同源性，功能上仍保持原始基因的基本功能，或者進化成具有相關而不同的新功能，這樣的一簇基因稱為超基因家族。有免疫球蛋白超基因家族、核受體超基因家族、細胞因子超基因家族等。8、在初始轉錄產物HNRNA加工產生成熟的MRNA時，被切除的非編碼序列稱為內含子INTRON。在成熟的MRNA或蛋白質中存在的序列稱為外顯子EXON。基因的不連續(xù)性是真核生物基因所特有的，但不是所有真核生物基因都一定具有這種不連續(xù)性。9、內含子的功能1含有可閱讀框架F，內含子的F可能編碼酶或蛋白質，其中包括逆轉錄酶、成熟酶。2含有各種剪接信號碼，內含子編碼的成熟酶直接參與內含子本身的剪接功能。3對基因表達有影響，內含子對基因表達在多個水平上施加影響。內含子中的增強子序列增加了基因轉錄的起始反應。10、人類基因組計劃HUMANGENOMICPROJECT，HGP的總體目標是要完成人類全部24條染色體3109BP序列的分析。具體包括①人類基因組作圖遺傳學圖譜、物理圖譜。②對基因組DNA進行切割和克隆。③測定基因組的全部DNA序列。④基因的鑒定。⑤信息系統的建立、信息的儲存和處理以及相應軟件的開發(fā)。11、結構基因組學STRUCTUALGENOMICS以全基因組測序為目標的基因結構研究，闡述基因組中基因的位置和結構，為基因功能的研究奠定基礎。12、功能基因組學FUNCTIONALGENOMICS是利用結構基因組學提供的信息，以大規(guī)模實驗方法及統計與計算機分析，全面系統地分析全部基因的功能。13、蛋白質組PROTEOME是一個基因組在特定細胞內所表達的蛋白質。對于一種生物來說，它的基組DNA基本上是恒定的，但蛋白質組是動態(tài)的。也就是不同組織的細胞中蛋白質組是不同的，在同一細胞的不同生長狀態(tài)、病理狀態(tài)下也是不一樣的。蛋白質組只指某一特定時間內的蛋白質集合體。14、生物信息學是用數理和信息科學的觀點、理論和方法去研究生命現象，組織和分析呈指數增長的生物學數據的一門學科。生物信息學位于生物、計算機、數學等多個領域的交叉點上，其研究目標是揭示“基因組信息結構的復雜性及遺傳語言的根本規(guī)律”。生物信息學包含了基因組信息學、蛋白質結構模擬和藥物設計等3個組成部分。目前的研究包括下面幾個方面①相關信息的收集、儲存、管理與提供。②新基因的發(fā)現和鑒定。③非編碼區(qū)的信息結構分析。④大規(guī)?；蚬δ鼙磉_譜的分析。⑤蛋白質分子空間結構預測、模擬和分子設計。⑥藥物開發(fā)。