簡介：碩士學(xué)位論文TLR4在破骨細(xì)胞中的生物學(xué)作用及其與經(jīng)典WNT信號相互作用機(jī)制的初步研究白慶霞培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型專業(yè)學(xué)位一級學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級學(xué)科專業(yè)研究方向牙髓生物學(xué)指導(dǎo)教師陸群教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院牙體牙髓病科二O一三年五月第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號R781UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要2英文摘要6前言10文獻(xiàn)回顧12一、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞參與骨改建的研究進(jìn)展121成骨細(xì)胞在骨改建中的主要作用122破骨細(xì)胞在骨改建中的主要作用123成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞在骨改建中的相互作用13二、脂多糖LPS參與骨疾病的研究進(jìn)展14三、TLR4參與炎癥性骨疾病的研究進(jìn)展151TOLL樣受體參與炎癥的研究進(jìn)展152TOLL樣受體4（TLR4）參與炎癥的研究進(jìn)展15四、經(jīng)典WNT信號通路參與炎癥性骨疾病的研究進(jìn)展171WNT信號通路在骨改建中的主要作用172WNT信號通路參與炎癥性骨疾病的研究進(jìn)展18研究內(nèi)容20實(shí)驗(yàn)一大鼠成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定201材料202方法203結(jié)果224討論27實(shí)驗(yàn)二LPS體外模擬大鼠成骨、破骨細(xì)胞的炎癥微環(huán)境28

簡介：溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文MUSASHI2與AML臨床預(yù)后關(guān)系及在HL60細(xì)胞生物學(xué)中的作用研究姓名葉愛芳申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師俞康201211溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)。關(guān)鍵詞急性髓系白血病；HL60細(xì)胞；MUSASHI2轉(zhuǎn)染；預(yù)后；增殖

簡介：廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動(dòng)規(guī)范試行。另外，該學(xué)位論文為寫艱課題組的研究成果，獲得＼琴諺課題組經(jīng)費(fèi)或?qū)嶒?yàn)室的資助，在幢堿川誨固嘞實(shí)驗(yàn)室完成。請?jiān)谝陨侠ㄌ杻?nèi)填寫課題或課題矗負(fù)鬟麟室名稱，未有此項(xiàng)聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。聲明人簽名李素F擒皂≯CF年廠月沙日S0X2OCT4ESSPYCSCDMS0PCR英文縮略詞表SRYREL曲EDHMGBOXCONTAININGOCT鋤ERBINDINGFACTOR4EMBRYONICSTEMCENSEXDETERININATIONREGIONOFYCHROMOSOMECANCERSTEMCEIISDIMETHYISULFOXIDEP0IYMERASECHAINREACTIONR_T_PCRREVERSETRANSCPTIONHRPCDNAHORSERADISHDEROXIDASECOMPIEMENTARYDNAGAPDHGLYCERAIDEHYDE一3一PHOSPHATEDEHYDROGENASEPBSFGFEGFVEGFMTS5FUL0HPSDSPMSFBSAAPIPSIPCPHOSPHATEBUFFBREDSANEFBROBLASTGRO、ⅣTHFACTOREPIDERMAIGROWTHFACTORVASCUIARENDOTHE|AIGROWTHFACTORSOX2基因OCT4基因胚胎干細(xì)胞Y染色體性別決定區(qū)腫瘤干細(xì)胞二甲亞楓聚合酶鏈反應(yīng)逆轉(zhuǎn)錄辣根過氧化物酶互補(bǔ)DNA甘油醛一3一磷酸脫氫酶磷酸鹽緩沖液成纖維細(xì)胞生長因子表皮生長因子血管內(nèi)皮生長因子3一4，5一DIMETHYL血IAZ012Y15一3一四甲基偶氮唑鹽CARBOXYMETHOXYPHENYL一2一4一SULFOPHENYL一2HTETRAZOLIUM，INNERSALTFIUOROURACIOINGIPIINSIDEINSODIUMDODECVLSUIFATEPHENYLMETHANESUIF6NYIFIUORIDEBOVINESEMMALBUMINAMMONIUMDERSULFATECEUSINDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLSINDUCEDPLURIPOTENTCANCERCEUS5氟尿嘧啶奧沙利鉑十二烷基硫酸鈉苯甲基磺酰氟牛血清白蛋白過硫酸銨誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞誘導(dǎo)性多能癌細(xì)胞

簡介：碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文MICRNA181A調(diào)控調(diào)控KRAS的表達(dá)對宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究的表達(dá)對宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究THEEFFECTSOFMICRNA181AONTHEBIOLOGICALBEHAVIOFCERVICALCANCERCELLSBYTARGETINGKRAS碩士研究生黎玉涵研究方向婦科腫瘤導(dǎo)師羅喜平教授導(dǎo)師單位廣東省婦幼保健院廣州醫(yī)科大學(xué)碩士研究生黎玉涵研究方向婦科腫瘤導(dǎo)師羅喜平教授導(dǎo)師單位廣東省婦幼保健院廣州醫(yī)科大學(xué)廣州二零一五年五月廣州二零一五年五月英漢簡略詞索引1英漢簡略詞索引英漢簡略詞索引英文縮寫英文全稱中文名稱CDNACOMPLEMENTARYDNA互補(bǔ)DNADDH2ODOUBLEDISTILLEDWATER雙蒸水DEPCDIETHYLPYROCARBONATE二乙基焦磷酰胺DMEMDULBECCOMODIFIEDEAGLEMEDIUMDULBECCO改進(jìn)的EAGLE培養(yǎng)基DMSODIMETHYLSULFOXIDE二甲基亞砜EBETHIDIUMBROE溴化乙錠FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清FITCFLUESCEINISOTHIOCYANATE異硫氰酸熒光素KRASKIRSTENRATSARCOMAVIRALONCOGENE鼠類肉瘤病毒癌基因MIR181AMICRNA181A微小核糖核酸181ANCNEGATIVECONTROL陰性對照ODOPTICALDENSITY光密度值PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖鹽水PIPROPIDIUMIODIDE碘化丙啶QRTPCRQUANTITATIVEREVERSETRANIONPOLYMERASECHAINREACTION實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)RNARIBONUCLEICACID核糖核酸RPMREVOLUTIONSPERMINUTE每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)，轉(zhuǎn)分RTREVERSETRANION逆轉(zhuǎn)錄SPSSSTATISTICALPACKAGEFTHESOCIALSCIENCE統(tǒng)計(jì)軟件包

簡介：分類號密級UDC學(xué)號416523611595南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文SIRNASIRNA干擾干擾HBVHBV陽性肝癌細(xì)胞陽性肝癌細(xì)胞BUBR1BUBR1對癌細(xì)胞生物學(xué)對癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響行為的影響EFFECTSOFSIRNATARGETINGBUBR1ONTHEBIOLOGICALBEHAVISABOUTHBVHEPATOCELLULARCARCINOMACELLS趙強(qiáng)德培養(yǎng)單位（院、系）南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱丁劍午、教授申請學(xué)位的學(xué)科門類臨床醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱腫瘤學(xué)論文答辯日期答辯委員會主席徐方云評閱人2014年5月摘要摘要目的目的SIRNA干擾HBV陽性肝癌細(xì)胞BUBR1對癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法方法1、根據(jù)基因庫中BUBR1序列，由INVITROGEN公司設(shè)計(jì)并提供3對不同的干擾SIRNA序列。2、采用RTPCR技術(shù)檢測五株肝癌細(xì)胞（HBV陰性及HBV陽性）中BUBR1MRNA表達(dá)量最高的細(xì)胞，并且作為后續(xù)試驗(yàn)研究對象。3、實(shí)驗(yàn)分為五組，采用WESTRNBLOT技術(shù)檢測干預(yù)BUBR1表達(dá)后其蛋白在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)。4、采用MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆法、細(xì)胞流式實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染3對SIRNA序列沉默BUBR1基因后對細(xì)胞增殖能力、克隆形成能力、細(xì)胞凋亡以及周期的影響。結(jié)果結(jié)果1、RTPCR技術(shù)檢測結(jié)果顯示BUBR1MRNA在乙型肝病毒陰性性肝癌細(xì)胞系中低于乙型肝炎病毒陽性肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)，并且在HEPG2215中表達(dá)量最高。2、采用WESTERNBLOT技術(shù)檢測BUBR1蛋白在正常組、陰性組、干預(yù)組的表達(dá)量，其結(jié)果顯示BUBR1蛋白在正常組和陰性組表達(dá)明顯高于干擾組（C、D、E）（P005），差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且干擾組E表達(dá)量最低。3、通過MTT及克隆平板實(shí)驗(yàn)檢測干擾BUBR1后細(xì)胞的生長情況、增殖及侵襲能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，干擾BUBR1表達(dá)后，干擾組相比正常組及陰性組生長增殖能力受到抑制，且干擾組E抑制最明顯（P005）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外凋亡與周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，干擾組與對照組（正常組及陰性組）對比，凋亡率增加，且干擾組E凋亡率最明顯（P005）差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與正常組及陰性組相比，干擾組S、G2期細(xì)胞增加，且干擾組E增加更明顯P005，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

簡介：分類號學(xué)號學(xué)號M20107M201075632632學(xué)校代碼學(xué)校代碼1048710487密級密級碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文慢性慢性髓細(xì)胞白血病患者細(xì)胞白血病患者的細(xì)胞遺傳學(xué)與分子的細(xì)胞遺傳學(xué)與分子生物學(xué)生物學(xué)檢測檢測學(xué)位申請人學(xué)位申請人何麗學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)血液內(nèi)科血液內(nèi)科指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師孟力教授教授答辯日期答辯日期2013年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：辛伐他汀與黏附肽P15對大鼠成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響THEEFFECTSOFSIMVASTATINSANDADHESIONPEPTIDEP15ONTHEBIOLOGICALBEHAVIOUROFSDRATOSTEOBLASTS學(xué)科門類學(xué)科、專業(yè)研究方向年級研究生姓名導(dǎo)師姓名起止日期醫(yī)學(xué)外科學(xué)口腔頜面外科學(xué)生物活性骨代用品的研究二OO三級陳筑蘇周磊教授20039～20055廣東醫(yī)學(xué)院二OO六年五月中文摘要目的研究探討辛伐他汀與多肽P一15序貫作用對在小牛骨表面生長的大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響方法1大鼠原代成骨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定L‘1采用酶二次消化法分離新生大鼠頭蓋骨成骨細(xì)胞，用反復(fù)貼壁法純化大鼠成骨細(xì)胞常規(guī)條件下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)12成骨細(xì)胞鑒定121形態(tài)觀察1倒置相差顯微鏡觀察活體細(xì)胞形態(tài)2光鏡下觀察HE染色后成骨細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)122功能鑒定1堿性磷酸酶ALP染色鈣鉆法2礦化結(jié)節(jié)染色茜素紅法、YONKOSSA改良法、四環(huán)素標(biāo)記法2觀察辛伐他汀對大鼠成骨細(xì)胞增殖分化能力的影響21檢測不同濃度的辛伐他汀00625“MOL／1，O125“MOL／1，0259MOL／L，O5I_TMOL／L，10MOL／1對大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響3骨粉表面固定P一15對大鼠成骨細(xì)胞黏附增殖分化的影響31檢測細(xì)胞對兩種骨粉的貼壁率32掃描電鏡觀察細(xì)胞黏附骨粉的形態(tài)33檢測P15對大鼠成骨細(xì)胞黏附增殖分化的影響4辛伐他汀與P一15序貫作用對骨粉表面大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響41倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞在骨粉周圍增殖的情況，HE染色光鏡下觀察42檢測辛伐他汀與P一15序貫作用對大鼠成骨細(xì)胞增殖分化的影響。5成骨細(xì)胞功能檢測方法51MTT法測定成骨細(xì)胞增殖能力

簡介：神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)對機(jī)體免疫功能具有重要的調(diào)控作用。經(jīng)典神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)肽是直接作用于免疫活性細(xì)胞和其他參與免疫反應(yīng)細(xì)胞的重要調(diào)節(jié)物質(zhì)。P物質(zhì)SUBSTANCEPSP是發(fā)現(xiàn)最早的神經(jīng)肽之一屬于哺乳動(dòng)物速激肽家族。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是SP的主要來源免疫細(xì)胞是SP的另一來源。外周神經(jīng)末梢釋放SP參與免疫調(diào)節(jié)和炎癥過程免疫細(xì)胞產(chǎn)生SP以自分泌或和旁分泌的方式調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的功能。SP可從多方面影響各種免疫細(xì)胞且SP在不同條件下所起的作用具有復(fù)雜性和多樣性。SP可以影響淋巴細(xì)胞的增殖、分化誘導(dǎo)免疫球蛋白和細(xì)胞因子的合成并能夠調(diào)節(jié)TH細(xì)胞的活性和其他一些免疫細(xì)胞的活性通過以上作用參與調(diào)節(jié)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫。SP是通過與速激肽受體TKR的亞型NK1NEUKININ1NK2NK3受體的結(jié)合來發(fā)揮其生物學(xué)活性的其中SP與NK1R的親和力最高對NK2R和NK3R有較低的親和力既SP發(fā)揮生理作用的主要途徑是NK1受體。SP受體分布于神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞。在免疫系統(tǒng)SP受體幾乎分布于各種免疫細(xì)胞包括T、B淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等。自然殺傷細(xì)胞NATURALKILLERCELLS參與免疫系統(tǒng)的發(fā)生、發(fā)展及效應(yīng)等重要環(huán)節(jié)的調(diào)節(jié)過程是機(jī)體天然免疫的主要承擔(dān)者也是獲得性免疫的核心調(diào)節(jié)細(xì)胞NK細(xì)胞無需特異性抗原識別便可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染的細(xì)胞。NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞主要是通過與靶細(xì)胞直接接觸分泌殺傷介質(zhì)穿孔素、顆粒酶、TNF和NK細(xì)胞毒因子LT等導(dǎo)致靶細(xì)胞死亡。另一方面NK細(xì)胞還可分泌IFNΓ、TNFΑ、GMCSF、LT、IL8和IL5等有免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子來間接殺傷靶細(xì)胞。NK細(xì)胞功能的發(fā)揮主要依賴于NK細(xì)胞能表達(dá)多種與主要組織相容性抗原MHC和非MHC類配體結(jié)合的受體傳遞抑制和激活信號NK細(xì)胞的殺傷活性取決于激活信號與抑制信號的平衡。目前發(fā)現(xiàn)的NK細(xì)胞表面的活化性受體包括自然細(xì)胞毒受體NATURALCYTOTOXICITYRECEPTSNCRS、NKG2D、活化殺傷免疫球蛋白樣受體KILLERIMMUNOGLOBLINLIKERECEPTSKIRS及其他輔助刺激活化性受體2B4、DNAM1、NTBA、CD59等。目前有關(guān)SP對NK細(xì)胞生物學(xué)功能的調(diào)控及作用機(jī)制的研究國內(nèi)外尚少見報(bào)道。已有一些研究證據(jù)表明SP對NK細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用但其作用機(jī)制尚不十分清楚。本研究以非IL2依賴的NK92MI細(xì)胞株為研究體系首先研究了SP對NK92MI細(xì)胞增殖活性和殺傷活性等功能的影響并分析了殺傷介質(zhì)穿孔素和顆粒酶B的表達(dá)和釋放與SP增強(qiáng)NK92MI細(xì)胞殺傷活性的關(guān)系。其次研究了SP對NK92MI細(xì)胞活化性受體NCRS表達(dá)的影響進(jìn)一步闡明SP對NK92MI細(xì)胞功能的調(diào)控作用及內(nèi)在作用機(jī)制。最后我研究了SP受體NK1R、2R、3R在NK92MI細(xì)胞上的組成性表達(dá)以及SP對NK92MI細(xì)胞NK1R、2R、3R表達(dá)的影響并檢測了SP作用于NK92MI細(xì)胞后其胞漿CA2濃度的變化探討SP調(diào)控NK92MI細(xì)胞功能的受體途徑和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。以揭示SP對NK細(xì)胞生物學(xué)活性調(diào)控作用的機(jī)制。材料和方法1細(xì)胞培養(yǎng)NK92MI細(xì)胞株為非IL2依賴性NK92細(xì)胞株NK92細(xì)胞來自一個(gè)進(jìn)行性非霍奇金淋巴瘤患者1998年建系購自中科院上海細(xì)胞庫；用含125％胎牛血清和125％馬血清的ΑMEM培養(yǎng)基不含RNA和DNA傳代培養(yǎng)。2MTT法測定SP對NK92MI細(xì)胞增殖活性的影響。3MTT法測定SP對NK92MI細(xì)胞殺傷活性的影響。4RTPCR測定NK92MI細(xì)胞NK1R、2R、3R的組成性表達(dá)。5REALTIMEPCR法測定SP對NK92MI細(xì)胞殺傷介質(zhì)穿孔素和顆粒酶B、NCRSNKP46、NKP44和NKP30以及SP受體NK1R、2R和3R的MRNA表達(dá)的影響。6WESTERNBLOT法測定SP對NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達(dá)的影響。7Β己糖胺酶釋放實(shí)驗(yàn)測定SP對NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B釋放的影響。8流式細(xì)胞術(shù)檢測SP對NK92MI細(xì)胞NKP44、NKP46、NKP30分子和NK1R的膜表達(dá)的影響。9FURA2AM熒光探針法測定NK92MI細(xì)胞胞漿CA2濃度。10統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±SD表示各組間均數(shù)比較采用一維方差分析ONEWAYANOVAP＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果一、SP對NK92MI細(xì)胞的促增殖作用經(jīng)一定濃度1014～106M的SP作用24H后NK92MI細(xì)胞的增殖無明顯變化作用48H后1012～LO6M的SP對NK92MI細(xì)胞的增殖均有明顯促進(jìn)作用。二、SP對NK92MI細(xì)胞殺傷活性的增強(qiáng)作用一定濃度1014～106M的SP作用24H除較高濃度106M外1014～108M的SP對NK92MI細(xì)胞的殺傷活性均顯示有明顯增強(qiáng)作用。三、SP對NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B表達(dá)的影響1SP增加NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達(dá)選擇對殺傷活性增強(qiáng)作用較大的濃度1014～1010M的SP作用NK92MI細(xì)胞24H各濃度的SP均可顯著提高NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達(dá)水平。2SP增加NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達(dá)選擇對殺傷活性增強(qiáng)作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細(xì)胞24H各濃度SP均可增加NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B的蛋白表達(dá)僅1014M的SP對穿孔素的表達(dá)無明顯作用。四、SP對NK92MI細(xì)胞穿孔素和顆粒酶B釋放的影響選擇對殺傷活性增強(qiáng)作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細(xì)胞24H后NK92MI細(xì)胞的Β己糖胺酶釋放無明顯變化表明SP對穿孔素和顆粒酶的釋放無明顯影響。五、SP對NK92MI細(xì)胞活化性受體NCRSNKP44、NKP46、NKP30表達(dá)的影響1SP增加NK92MI細(xì)胞活化性受體NCRSNKP44、NKP46、NKP30的MRNA表達(dá)選擇對殺傷活性增強(qiáng)作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP作用NK92MI細(xì)胞24H各濃度的SP均可顯著增加NK92MI細(xì)胞NCRS的MRNA表達(dá)。2SP對NK92MI細(xì)胞NCRS膜表達(dá)的作用選擇對殺傷活性增強(qiáng)作用較大的濃度1014M、1012M、1010M的SP處理NK92MI細(xì)胞24H各濃度的SP均可增加NKP46的膜表達(dá)僅較低濃度1014M的SP對NKP44的膜表達(dá)有增加作用各濃度的SP對NKP30的膜表達(dá)均無明顯作用。六、NK1R在NK92MI細(xì)胞上的功能性表達(dá)1SP誘導(dǎo)NK92MI細(xì)胞NK1R的MRNA表達(dá)及膜表達(dá)增加一定濃度1014～106M的SP作用NK92MI細(xì)胞1、4和24H后各濃度SP作用較短時(shí)間4H即可增加NK92MI細(xì)胞NK1R的MRNA表達(dá)。SP作用NK92MI細(xì)胞24H后1014～108M的SP均能明顯增加NK92MI細(xì)胞NK1R的膜表達(dá)。2NK1R特異性拮抗劑對SP調(diào)控NK92MI細(xì)胞功能的阻斷作用使用NK1R特異性拮抗劑可完全阻斷SP對NK92MI細(xì)胞增殖活性的促進(jìn)作用大部分阻斷SP對NK92MI細(xì)胞殺傷活性的增強(qiáng)作用大部分阻斷SP對NK92MI細(xì)胞殺傷介質(zhì)穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達(dá)的增加作用。七、SP誘導(dǎo)NK92MI細(xì)胞NK2R、3R的MRNA表達(dá)增加NK92MI細(xì)胞組成性表達(dá)NK2R、3R。SP作用1、4、24H后可誘導(dǎo)NK92MI細(xì)胞NK2R、3R的MRNA表達(dá)增加NK2R的MRNA表達(dá)在4H時(shí)開始增加24H時(shí)達(dá)到最高NK3R的MRNA表達(dá)趨勢與NK1R相似在4H時(shí)表達(dá)最高。八、SP提高NK92MI細(xì)胞胞漿游離CA2的濃度一定濃度1014～106M的SP作用NK92MI細(xì)胞1H后NK92MI細(xì)胞胞漿CA2的濃度明顯增高。結(jié)論11014～106M濃度范圍的神經(jīng)肽SP對NK92MI細(xì)胞的增殖活性和殺傷活性有促進(jìn)作用。2所觀察濃度范圍的SP可增加NK92MI細(xì)胞殺傷介質(zhì)穿孔素和顆粒酶B的MRNA表達(dá)及蛋白表達(dá)SP對NK92MI細(xì)胞殺傷活性的增強(qiáng)作用是通過直接增加其殺傷介質(zhì)穿孔素和顆粒酶B的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。3所觀察濃度范圍的SP可誘導(dǎo)NK92MI細(xì)胞中NCRS主要是NKP46分子的表達(dá)增加說明SP可以作為一種活化因子來調(diào)節(jié)NK92MI細(xì)胞的功能且SP可以通過增加活化性受體的表達(dá)來間接調(diào)節(jié)NK92MI細(xì)胞的殺傷活性。4NK92MI細(xì)胞組成性表達(dá)NKIR、2R、3RSP通過與其受體NK1R的正反饋機(jī)制來調(diào)節(jié)NK92MI細(xì)胞功能SP對NK92MI細(xì)胞功能的調(diào)控可能有NK1R、2R、3R幾種受體的協(xié)同或交叉作用。5SP激活NK92MI細(xì)胞上NK1R后部分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)是以CA2為第二信使肌醇三磷酸IP3途徑和環(huán)磷酸腺苷CAMP依賴的PAK途徑都可能參與了SP通過NK1R調(diào)節(jié)NK92MI細(xì)胞功能的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。

簡介：目的在體外將人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞HMSCS進(jìn)行純化、擴(kuò)增及向心肌樣細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化，對誘導(dǎo)后的細(xì)胞進(jìn)行心肌樣細(xì)胞相關(guān)特性分析并探討體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞HMSCS向心肌樣細(xì)胞分化過程中分化與凋亡的情況，檢測分化過程中心肌細(xì)胞特征表達(dá)及膜電位變化的情況，為HMSCS臨床移植治療提供實(shí)驗(yàn)參考依據(jù)。方法1采用體外純化、擴(kuò)增后的第4代HMSCS在體外經(jīng)5ΜMOLL5雜氮胞苷誘導(dǎo)24小時(shí)后繼續(xù)培養(yǎng)8周，相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化，免疫組化方法鑒定心肌特異性蛋白心房鈉尿肽ANP和連接蛋白CX43的表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測誘導(dǎo)前后細(xì)胞表面抗原CD31、CD34、CD45、CD90的表達(dá)情況，全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)檢測不同時(shí)期細(xì)胞膜電位的變化。2將純化、擴(kuò)增后的第4代HMSCS，分3組在體外分別經(jīng)0ΜMOLL、25ΜMOLL、50ΜMOLL5AZACYTIDINE5AZA誘導(dǎo)24H后繼續(xù)培養(yǎng)8周，相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形念變化，流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞周期及凋亡指數(shù)，應(yīng)用RTPCR技術(shù)分析肌球蛋白重鏈ΒMHC、肌鈣蛋白TCTNT、凋亡相關(guān)基因BCL2、BAX的MRNA在分化過程中的動(dòng)態(tài)表達(dá)。結(jié)果HMSCS誘導(dǎo)前為紡錘形，誘導(dǎo)后第2天部分細(xì)胞即開始發(fā)生形變，呈球形或短棒狀，1周后胞漿中顆粒增多，約20～30％細(xì)胞邊緣呈毛刷樣變化；HMSCS表面抗原CD31、CD34、CD45在誘導(dǎo)前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CD90未誘導(dǎo)時(shí)表達(dá)呈弱陽性，誘導(dǎo)后明顯增高PG期細(xì)胞比例誘導(dǎo)后較對照組顯著減少P5AZA低濃度誘導(dǎo)可減少細(xì)胞凋亡發(fā)生；3HMSCS移植后有致心律失常的潛在危險(xiǎn)。

簡介：識別白血病干細(xì)胞的新單抗3A4的生物學(xué)特性及基因改造研究⑧論文作者簽名盔里墜指導(dǎo)教師簽名廠勿小√論文評閱人1評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱答辯委員會主席金洼教授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬簋二醫(yī)院孌員1盆墓臻教授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬簋三醫(yī)院委員2杜童生數(shù)授浙江太堂醫(yī)堂院隘屬2L童醫(yī)院孌員3高瑞蘭教授浙江省生醫(yī)院委員4錢差坐主任醫(yī)垣浙江省厶民醫(yī)院2委員5答辯日期2011年5月27日⑧AUTHOR’SSIGNATURE＆主￡叢N●●●SUPERVLS0R7SSLGNATURETHESISREVIEWER1THESISREVIEWER2THESISREVIEWER3THESISREVIEWER4THESISREVIEWER5ANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEWANONYMOUSREVIEW，、1JIEMPMFESSOR，NLEFIRSTA幣LIATEDHOSPITALOFZHEJI鋤GUILIVERS時(shí)SCHOOLOFCNALRMEDICINECOMMITT∞OFO咫LDEFENCECONHNITTEEMAN1COMMITTEEMAN2RONGZHENXUPROFESSOR，TILESECOND蕊L(fēng)IATEDHOSPITAJOFZHEJIANGUNIVERS時(shí)SCH001OFMEDCINE，1‰一’RUILANGAOPROFESSOR，ZHEJIALLGPROVIILCIALOFTRADITIONALCHINESECOMMLTTEEMANJMEDICINEHOSDITALCOMMITTEEMAN4堅(jiān)重旦堅(jiān)Q墊FG墮墮壘竺塑圣墮塑曼呈翌∑竺型￡竺趔生蔓旦型型CONLRNITTEEMAN5DATEOFORALDEFENCEMAY27，2011燃三

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目RNA干擾靶向沉默PAUF基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究研究生姓名劉鵬飛指導(dǎo)教師姓名朱新國專業(yè)名稱普外科研究方向胃腸外科論文提交日期2013年3月RNA干擾靶向沉默PAUF基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要IRNA干擾靶向沉默PAUF基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的目的檢測胰腺腺癌上調(diào)因子（PANCREATICADENOCARCINOMAUPREGULATEDFACT，PAUF）和Β連環(huán)蛋白（ΒCATENIN）在結(jié)腸癌患者中的表達(dá)情況，并通過RNA干擾靶向沉默PAUF表達(dá)，觀察其對人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116增殖凋亡及侵襲能力的影響，探討PAUF基因在結(jié)腸癌中的作用，為進(jìn)一步研究結(jié)腸癌的基因治療奠定基礎(chǔ)。方法方法1收集48例結(jié)腸癌標(biāo)本，每份標(biāo)本同時(shí)收取腫瘤組織和癌旁正常組織。分別采用RTPCR，免疫組化檢測各組織中PAUF和ΒCATENIN的表達(dá)水平。培養(yǎng)5株結(jié)直腸癌細(xì)胞株，RTPCR檢測各細(xì)胞株中PAUF表達(dá)水平，進(jìn)而篩選出高表達(dá)細(xì)胞株HCT116以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)用。2以脂質(zhì)體（LIPOFECTAMIM2000）為載體將帶熒光標(biāo)記的SIRNA轉(zhuǎn)染HCT116細(xì)胞并用流式細(xì)胞儀檢測從而篩選出最佳轉(zhuǎn)染條件。設(shè)計(jì)制備針對PAUF基因的3組不同小干擾RNA序列，以最佳轉(zhuǎn)染條件轉(zhuǎn)染細(xì)胞后分別采用RTPCR以及WESTERN法驗(yàn)證干擾效果并進(jìn)而篩選出最佳干擾片段以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)用。3將先前篩選出的最佳干擾片段PAUFSIRNA2按最佳轉(zhuǎn)染條件對PAUF高表達(dá)細(xì)胞株HCT116進(jìn)行RNA干擾，再分別采用四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）法，流式細(xì)胞術(shù)（FCM），侵襲實(shí)驗(yàn)，粘附實(shí)驗(yàn)，遷移實(shí)驗(yàn)檢測RNA沉默PAUF后對結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞增殖，凋亡、周期及侵襲、粘附、遷移性的影響。結(jié)果結(jié)果1癌旁組織中PAUF和ΒCATENIN的表達(dá)量明顯低于腫瘤組織P005。并且，在腫瘤組織和癌旁組織中PAUF的表達(dá)與ΒCATENIN的表達(dá)均呈現(xiàn)相關(guān)性P005。PAUF在5株結(jié)直腸癌細(xì)胞中均有不同程度的表達(dá)，但在HCT116中表達(dá)量最高。2細(xì)胞數(shù)約為每孔15105個(gè)、SIRNA濃度約為80PMOL，LIPOFECTAMINE2000與SIRNA比例為4UL4UL6孔板時(shí)，有較佳的轉(zhuǎn)染效率，繼續(xù)提高SIRNA濃度并不能明顯提高轉(zhuǎn)染效率。將三組SIRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞后PAUF表達(dá)量均有不同程度下降，其中以PAUFSIRNA2干擾效果最明顯，轉(zhuǎn)染細(xì)胞后PAUF和ΒCATENIN的MRNA和蛋白表達(dá)明顯下降。3轉(zhuǎn)染了PAUFSIRNA2的結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116吸光度值降低，增殖

簡介：後多大學(xué)碩士學(xué)位論文專業(yè)學(xué)位學(xué)校代碼10246學(xué)號L1211220041SIRNA沉默TUBB2C基因?qū)KM1細(xì)胞系生物學(xué)特性的影響B(tài)IOCHARACTERISTICEFFECTSOFTUBB2CGENESILENCINGBYSMALLINTERFERINGRNAONSKM1CELLLINE院系復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院專業(yè)內(nèi)科學(xué)ST液病學(xué)姓名朱晨指導(dǎo)教師許小平教授導(dǎo)師組成員陳波斌教授陳字副教授馬燕博士完成日期2014年4月復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文英文符號及縮略語英文符號及縮略語按首寫字母排序

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)密級碩士學(xué)位論文論文題目作者姓名EPHRINB2對結(jié)腸癌SW480細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制研究陳旺盛指導(dǎo)教師姓名職稱、單位名稱傅仲學(xué)教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸外科申請學(xué)位級別碩士學(xué)科、專業(yè)名稱外科學(xué)論文答辯年月2013年05月2013年05月目錄英漢縮略語名詞對照1中文摘要3英文摘要。6論文正文沉默EPHRINB2基因?qū)Y(jié)腸癌SW480細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制研究9前言91材料和儀器、設(shè)備122方法2L3結(jié)果354討論425結(jié)論47參考文獻(xiàn)48全文總結(jié)56文獻(xiàn)綜述57致謝67攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表文章情況68

簡介：點(diǎn)擊查看更多鎂離子對成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的促進(jìn)作用及其機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中南大學(xué)博士學(xué)位論文上皮性腫瘤細(xì)胞表達(dá)IGALPHA重鏈及其生物學(xué)功能的研究姓名鄭慧申請學(xué)位級別博士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師曹亞20060501鄭慧博士學(xué)位論文中文摘要與B細(xì)胞中IGIDCA胚系轉(zhuǎn)錄本和VDJCA成熟轉(zhuǎn)錄本的大小基本一致。進(jìn)一步，我們設(shè)計(jì)了兩對引物，通過RTPCR來確證這兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)。結(jié)果在五種上皮性腫瘤細(xì)胞中擴(kuò)增出IGIACA，VDJCA兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本的基因片段。因此適塞工土廛絲臟疸紲照壹達(dá)G垡￡垡YQ』￡垡西仝掛丞奎由于不同的細(xì)胞中IGVOJ基因片段可能存在不同的重組方式，從而產(chǎn)生不同的CDR3COMPLEMENTARITYDETERMININGREGION3序列。因此，我們通過RTPCR分析并測序，發(fā)現(xiàn)不同上皮組織來源的腫瘤細(xì)胞中存在不同的IGCDR3序列，并且這些癌細(xì)胞表達(dá)的IGCDR3序列是B細(xì)胞中暫未發(fā)現(xiàn)的新序列。因此，我們認(rèn)為丕回土廛塞退的勝疸紲照查在羞丕園笪G直隆這一發(fā)現(xiàn)也提示上皮性腫瘤細(xì)胞表達(dá)的IG分子與B細(xì)胞來源的IG分子存在差異。在分析了IGALPHA重鏈MRNA的表達(dá)之后，我們進(jìn)一步分析IGALPHA重鏈蛋白質(zhì)在上皮性腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)。我們利用抗IGALPHA單克隆抗體經(jīng)WESTERNBLOTTING檢測HELA，MCF一7，SW480，MGC，CNEL五種上皮性腫瘤細(xì)胞系中IGALPHA重鏈蛋白。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，五種上皮性腫瘤細(xì)胞均表達(dá)56KD的IGALPHA重鏈蛋白。同時(shí)，我們采用FACSFLUORESCENTACTIVATEDCELLSONEO來分析IGALPHA重鏈蛋白在上皮性腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)。為了排除上皮性腫瘤細(xì)胞系中存在B細(xì)胞系的污染，我們以CDL9分子作為B細(xì)胞系特異性標(biāo)志，通過雙參數(shù)FACS，同時(shí)檢測五種上皮性腫瘤細(xì)胞中IGALPHA蛋白和CDL9蛋白。結(jié)果五種上皮性腫瘤細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)IGALPHA重鏈蛋白的表達(dá)，而不存在CDL9蛋白的陽性信號。因此我們確證I土廑絲勝疸紲照麥鯊IG壘B墮重壁蛋自廈同時(shí)也證實(shí)了所有五種上皮性腫瘤細(xì)胞系中均不存在B淋巴細(xì)胞系的污染。進(jìn)一步，我們采用質(zhì)譜分析從氨基酸水平證實(shí)IGALPHA蛋白在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)。將CNEL全蛋白通過SDSPAGE膠分離，切下5060KD蛋白質(zhì)分子量范圍的膠條，利用質(zhì)譜分析蛋白的氨基酸序列。質(zhì)譜結(jié)果匹配到20種不同的蛋自，其中包含ANTICOLORECTALCARCINOMAIGHEAVYCHAINPROTEIN，其匹配的氨基酸序列位于IG重鏈V區(qū)。雖然我們沒有獲得IG重鏈CA區(qū)的直接信息，但I(xiàn)G重鏈V區(qū)的信息仍然叢氫基壁丕王適塞工土廛性旦生疸紲照篚笪麥達(dá)K重焦蛋白。在上皮性腫瘤細(xì)胞系分析的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步以宮頸癌組織為材料分析IGALPHA重鏈的表達(dá)。考慮到上皮組織細(xì)胞中的IGALPHA蛋白無法區(qū)分是來源于粘膜層中漿細(xì)胞，還是自身合成的，所以我們選擇原位雜交ISH檢測上皮性腫瘤組織中IGALPHA重鏈MRNA的表達(dá)。我們以IGALPHA重鏈的C區(qū)為探針，利用9例宮頸炎癥組織和10例宮頸癌組織進(jìn)行了ISH分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，9例富II