簡(jiǎn)介：分類號(hào)R737．3密級(jí)單位代碼10114學(xué)號(hào)201010268MIF過(guò)表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞株SIHA生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)研究THEEFFECTSOFMIFOVEREXPRESSIONONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCERVICALCARCINOMACELLLINESIHA研究申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別科堂堂僮專業(yè)名稱婦主科堂研究方向婦抖鼬瘤二。一三年三月十五日山西醫(yī)科大學(xué)碩二I學(xué)位論文目錄中文摘要??????????????????????????????1英文摘要??????????????????????????????5英文名稱縮略表???????????????????????????9前言?????????????????????????????????????????．．。010日U舌?????????????????????????????????????????．．第一章MIF真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定1．材料與方法??????????????????????????122．結(jié)果?????????????????????????????183．討論?????????????????????????????????????．184．附圖?????????????????????????????19第二章基因轉(zhuǎn)染對(duì)宮頸癌SIHA細(xì)胞株中MIF表達(dá)的影響1．材料與方法??????????????????????????222結(jié)果????????????????????????????．．283．討論??????????????????????????????????????．314．附圖?????????????????????????????32第三章MIF過(guò)表達(dá)對(duì)SIHA細(xì)胞中相關(guān)因子表達(dá)及其生物學(xué)特性的影響1．材料與方法??????????????????????????342．結(jié)果?????????????????????????????383．J討論???????????????????????．．??????????????．．444．附圖?????????????????????????????45第四章PDTC對(duì)SIHA細(xì)胞中相關(guān)因子表達(dá)及其生物學(xué)特性的影響1．材料與方法??????????????????????????492．結(jié)果?????????????????????????????513．討{侖????????????．??????????????????????????554．附圖?????????????????????????????57結(jié)論?????????????????????????????????????????．．60參考文獻(xiàn)?????????????????????????????．61綜J丕?????????????????????????????????????????．．66攻讀學(xué)位期問(wèn)發(fā)表文章情況????????????????????1．．75致謝??????????????????????????????．．7．．76個(gè)人簡(jiǎn)歷?????????????????????????????．77

簡(jiǎn)介：背景最近幾年的研究證明超聲聯(lián)合內(nèi)含全氟顯氣體的普通脂質(zhì)微泡造影劑可以增效干細(xì)胞移植治療心肌梗死，微泡效應(yīng)帶來(lái)局部心肌組織內(nèi)基質(zhì)衍生因子1SDF1表達(dá)增加是可能機(jī)制之一。一氧化氮N0是人體重要的第二信使，在心血管系統(tǒng)中有著極為重要的作用。研制新型NO微泡，并應(yīng)用超聲聯(lián)合新型NO微泡介導(dǎo)干細(xì)胞移植，理論上將會(huì)有更好的效果。目的1探討超聲聯(lián)合NO微泡作用于大鼠心肌組織后局部產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)2探討超聲聯(lián)合NO微泡用于干細(xì)胞移植的可行性及優(yōu)勢(shì)。方法1將磷脂酰膽堿與二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺按照95∶5的比例溶解于氯仿中，后將混合液置于真空蒸發(fā)器中除去氯仿，留取結(jié)晶物，加入磷酸鹽緩沖液（PHOSPHATEBUFFERSOLUTION，PBS）調(diào)整溶液濃度為1MGML，將上述溶液置于60℃水浴中震蕩，形成脂質(zhì)懸液，在厭氧條件下，將上述脂質(zhì)懸液置于100W的聲強(qiáng)下進(jìn)行連續(xù)處理，時(shí)間為5分鐘，同時(shí)以4MLMIN的流速供給NO氣體。2將32只SPF級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只。第一、二、三組分別經(jīng)尾靜脈輸入1ML的NO微泡、普通脂質(zhì)微泡以及PBS，采用干預(yù)頻率為1MHZ、強(qiáng)度為1WCM2的超聲輻照大鼠心前區(qū)，輻照時(shí)間為10分鐘第四組為空白對(duì)照組。4小時(shí)后每組處死4只大鼠，留取心肌組織進(jìn)行HE染色，觀察局部的炎癥反應(yīng)情況及心肌組織結(jié)構(gòu)變化同時(shí)留取血清標(biāo)本用于檢測(cè)肌酸激酶CK，乳酸脫氫酶LDH和肌鈣蛋白ⅠTNⅠ的含量。1周后，處死剩余大鼠，取心肌組織進(jìn)行RTPCR和WESTERNBLOT分別檢測(cè)SDF1的基因及蛋白相對(duì)表達(dá)量。3大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMSCS的分離培養(yǎng)、鑒定及標(biāo)記密度梯度離心法分離培養(yǎng)大鼠BMSCS形態(tài)學(xué)觀察及流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD44、CD29、CD34及CD45進(jìn)行BMSCS鑒定CMDIL體外標(biāo)記BMSCS，熒光顯微鏡觀察標(biāo)記效率。4大鼠心肌梗死模型的制備與評(píng)價(jià)采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支建立大鼠心肌梗死模型，以心電圖表現(xiàn)及病理學(xué)方法評(píng)價(jià)模型制備成功與否。5超聲聯(lián)合NO微泡介導(dǎo)干細(xì)胞移植將42只成功建立心肌梗死模型的大鼠隨機(jī)分為4組第一組（USNOMBBMSCS組，N12）經(jīng)尾靜脈輸入NO微泡造影劑1ML（微泡濃度為1108個(gè)ML），并使用頻率為1MHZ，強(qiáng)度為1WCM2的超聲輻照大鼠心前區(qū)，輻照時(shí)間為10分鐘，隨后將CMDIL標(biāo)記好的BMSCS約1X107細(xì)胞量用2ML的PBS稀釋后經(jīng)尾靜脈緩慢注射。第二組USMBBMSCS組，N10將NO更換為普通脂質(zhì)微泡，余下處理同第一組。第三組BMSCS組，N10將CMDIL標(biāo)記好的BMSCS約1107細(xì)胞量用2ML的PBS稀釋后經(jīng)尾靜脈緩慢注射，余不做處理。第四組CK組，N10直接經(jīng)尾靜脈注射2ML的PBS。干預(yù)后48H處死所有大鼠，取心肌梗死區(qū)心肌組織作冰凍切片，在激光共聚焦顯微鏡下計(jì)數(shù)比較各組缺血心肌內(nèi)熒光標(biāo)記陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，以熒光強(qiáng)度代表相對(duì)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。結(jié)果1NO微泡平均直徑為385ΜM，其中NO的有效濃度約為133109MMOL微泡，NO微泡濃度為68108ML。2輻照4小時(shí)后留取心肌組織行HE染色顯示各組均可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)明顯組織損傷，各組間沒有明顯差異血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)顯示四組CK分別為1791±1250、1942±864、1342±909、11935±921，LDH分別為843±693、936±1427、637±852、564±856，TNⅠ分別為596676±53046、864983±79006、339581±60097、274579±40738第一組與第二組血清CK和LDH高于第三組和第四組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005第一組血清TNⅠ低于第二組，但高于第三組和第四組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005輻照1周后留取的心肌組織行RTPCR070±0018、065±0026、023±0024、002±0010和WESTERNBLOT089±0024、078±0017、049±0024、022±0022分析結(jié)果均顯示第一組SDF1相對(duì)表達(dá)量最多，各組間進(jìn)行兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。3通過(guò)密度梯度離心法分離培養(yǎng)的BMSCS貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)以梭形為主，較為均一。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞表面CD449934％及CD299935％呈高表達(dá)，幾乎不表達(dá)CD34147％及CD45156％。熒光顯微鏡觀察顯示經(jīng)CMDIL標(biāo)記的BMSCS細(xì)胞膜呈均勻明亮的紅色，陽(yáng)性率在98％以上。4通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支的方法建立心肌梗死模型后，梗死遠(yuǎn)端局部心肌組織蒼白，運(yùn)動(dòng)幅度減弱，心電圖表現(xiàn)為ST段改變、病理性Q波等動(dòng)態(tài)變化。5激光共聚焦顯微鏡觀察計(jì)數(shù)各組心肌缺血區(qū)CMDIL陽(yáng)性BMSCS，結(jié)果顯示USNOMBBMSCS組31402±3171、USMBBMSCS組24089±2763、BMSCS組10841±2417及空白對(duì)照組6175±2093，第一組與其他三組分別做兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005。結(jié)論1NO微泡制備成功，具有較好的穩(wěn)定性，大小均一，分散好，符合一般微泡造影劑的要求。2一定的超聲干預(yù)參數(shù)條件下，超聲聯(lián)合NO微泡輻照對(duì)大鼠心肌組織無(wú)明顯破壞作用，且能增加局部SDF1的表達(dá)。3密度梯度離心法可成功分離培養(yǎng)出大鼠BMSCS，CMDIL標(biāo)記BMSCS方法簡(jiǎn)單有效，并可有效示蹤BMSCS的體內(nèi)分布。4冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎法可建立穩(wěn)定的大鼠心肌梗死模型。5超聲聯(lián)合NO微泡能更有效的促進(jìn)靜脈移植的BMSCS向心肌缺血區(qū)歸巢，可能與超聲聯(lián)合NO微泡促進(jìn)局部SDF1的表達(dá)增加有關(guān)。

簡(jiǎn)介：隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，超聲波逐漸應(yīng)用于臨床疾病的診斷及產(chǎn)前診斷，物理學(xué)中，超聲波有熱效應(yīng)和空化效應(yīng)，這些生物學(xué)效應(yīng)是否會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害的影響這一直是人們研究的熱點(diǎn)。經(jīng)過(guò)大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究和臨床觀察，人們逐漸認(rèn)識(shí)到診斷超聲的輻照劑量存在著時(shí)間和強(qiáng)度的關(guān)系，即大劑量和高強(qiáng)度超聲可以瞬間對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害，長(zhǎng)時(shí)間和低強(qiáng)度超聲輻照也會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不良的后果。尤其是產(chǎn)科超聲檢查，因?yàn)樵谌焉镌缙?，只要幾個(gè)胚胎細(xì)胞受損，就會(huì)產(chǎn)生不嚴(yán)重的不良后果，如發(fā)育畸形等。因此，有許多學(xué)者對(duì)超聲的生物學(xué)損害進(jìn)行了大量的研究。隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷更新，超聲儀器及其檢查手段也在不斷的更新，最早使用的是二維超聲（即黑白超聲），隨后又陸續(xù)發(fā)明了頻譜多普勒超聲和彩色多普勒超聲。許多學(xué)者對(duì)這幾種超聲檢查技術(shù)已經(jīng)有了大量的研究成果，并得出了相應(yīng)的結(jié)論。最近，三維超聲和四維超聲（即實(shí)時(shí)三維超聲）已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于臨床，其總的超聲輻照時(shí)間及輻照量都相應(yīng)的增加，為產(chǎn)科檢查的安全性帶來(lái)了潛在的危險(xiǎn)，目前，對(duì)這兩種超聲檢查技術(shù)的安全性研究相對(duì)較少，對(duì)其所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)及危害的研究是一項(xiàng)迫在眉睫的任務(wù)。本研究分包括兩個(gè)部分，第一部分是利用光學(xué)顯微鏡觀察受孕小鼠接受四維超聲不同時(shí)段輻照后對(duì)胎鼠大腦皮層細(xì)胞的生物學(xué)影響，主要觀察皮層細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。第二部分是利用免疫組織化學(xué)技術(shù)測(cè)定神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白即AQP4、S100、GFAP蛋白的表達(dá)情況，來(lái)確定四維超聲輻照后小鼠大腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的生物學(xué)影響。第一部分四維超聲輻照對(duì)晚孕胎鼠大腦皮層細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響目的探討四維超聲不同輻照時(shí)段對(duì)晚孕胎鼠大腦皮層細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。方法將30只懷孕小鼠等量隨機(jī)分配到對(duì)照組、假輻照組、輻照5MIN組、輻照10MIN組、輻照20MIN組及輻照30MIN組。輻照組在小鼠懷孕第16D時(shí)進(jìn)行四維超聲輻照。假輻照組不發(fā)射超聲波，只實(shí)施輻照操作。每組乳鼠在出生后第10D采取灌流固定，取大腦標(biāo)本，行HE染色后，進(jìn)行光鏡觀察。結(jié)果光鏡結(jié)果對(duì)照組、假輻照組、輻照5MIN組光鏡觀察未見明顯異常，輻照10MIN組、輻照20MIN組及30MIN組，皮層細(xì)胞排列紊亂，腫脹，出現(xiàn)空泡，部分細(xì)胞壞死。結(jié)論四維超聲輻照超過(guò)10MIN可引起大腦皮層細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。第二部分四維超聲輻照后應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)情況目的探討四維超聲輻照后小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白的表達(dá)情況及其意義。方法30只孕鼠等量隨機(jī)分配到對(duì)照組、假輻照30MIN組、輻照5MIN、輻照10MIN、輻照20MIN及輻照30MIN組。輻照組在小鼠懷孕第16D時(shí)行四維超聲輻照，假輻照組不發(fā)射超聲波，只實(shí)施輻照操作。每組小鼠出生后第10D進(jìn)行灌流固定，取大腦標(biāo)本，免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白AQP4、S100、GFAP的表達(dá)情況。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色后應(yīng)用數(shù)碼圖像分析系統(tǒng)計(jì)算平均面密度值A(chǔ)QP4陽(yáng)性細(xì)胞平均面密度值隨著輻照時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減少，GFAP、S100陽(yáng)性平均面密度值隨著輻照時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析三種蛋白對(duì)照組與假輻照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其對(duì)照組與各輻照組比較、假輻照組與各輻照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，S100、GFAP蛋白20MIN組與30MIN輻照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余各不同時(shí)間段輻照組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論四維超聲輻照可引起小鼠大腦皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白異常表達(dá)，AQP4蛋白表達(dá)減少，GFAP、S100蛋白表達(dá)增加，提示神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞受到損害。

簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文CO氣腹對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性及侵襲轉(zhuǎn)移能力影響的臨床與基礎(chǔ)研究姓名郝迎學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師余佩武20090501第三軍醫(yī)大學(xué)博十學(xué)位論文CYCLINDL和CD磁結(jié)合能力的影響。結(jié)果1腹腔鏡胃癌根治術(shù)組和開腹胃癌根治術(shù)組腹腔游離胃癌細(xì)胞的檢出率和CEAMRNA陽(yáng)性率無(wú)顯著差異JPO05；腹腔游離癌細(xì)胞檢出率與腫瘤浸潤(rùn)深度、漿膜受侵面積、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期密切相關(guān)。腹腔鏡胃癌根治術(shù)組腹膜間皮細(xì)胞腫脹、細(xì)胞問(wèn)隙增寬，而開腹胃癌根治術(shù)組腹膜間皮細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯改變、細(xì)胞間連接緊密。兩組胃漿膜超微結(jié)構(gòu)無(wú)顯著差異。2C02氣腹組胃癌MKN一45細(xì)胞培養(yǎng)液PH值下降非常顯著，且壓力越大PH值降低越明顯?；旌蠚怏w組胃癌MKN45細(xì)胞培養(yǎng)液PH值與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異P005。3O、LO、12、15MMHG混合氣體氣腹組和O、10、12MMHGC02氣腹組與對(duì)照組比較增殖活性無(wú)顯著性差異PO05，15MMHGC02氣腹組增殖活性在前3天無(wú)顯著性差異，在47天下降非常顯著P005。415MMHGC02氣腹組胃癌MKN45細(xì)胞穿過(guò)濾膜數(shù)量與對(duì)照組比較顯著下降尸O05。515MMHGC02氣腹組胃癌MKN一45細(xì)胞CYCLIND1、CD瞄在MRNA和蛋白水平均顯著下降PO05，但磷酸化RB蛋白則顯著低于對(duì)照組PO05。結(jié)論1腹腔鏡胃癌根治術(shù)與開腹胃癌根治術(shù)比較并不增加腹腔游離胃癌細(xì)胞的檢出率，腹腔游離胃癌細(xì)胞檢出率與腫瘤浸潤(rùn)深度、漿膜受侵面積、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期密切相關(guān)。2腹腔鏡胃癌根治術(shù)C02氣腹對(duì)壁層腹膜影響較大，主要表現(xiàn)在間皮細(xì)胞腫脹、細(xì)胞間連接斷裂、細(xì)胞間隙增寬、基底層組織暴露，而對(duì)胃壁漿膜影響較小。30、LO、12MMHGC02氣腹和O、10、12、15MILLHG混合氣體氣腹對(duì)胃癌MKN一45細(xì)胞增殖活性、增殖指數(shù)凋亡比例的影響與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。7

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文抑制糖酵解途徑對(duì)胰腺癌細(xì)胞PANC1生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制的研究姓名張樹華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師王春友20090501華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文2第二部分第二部分乳酸脫氫酶特異性抑制劑體外對(duì)人胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)凋亡的影響乳酸脫氫酶特異性抑制劑體外對(duì)人胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)凋亡的影響目的目的分析乳酸脫氫酶抑制劑草氨酸鹽OXAMATE對(duì)人胰腺癌細(xì)胞株增殖的影響及誘導(dǎo)凋亡的作用。方法方法MTT法觀察終濃度為0MOLL，002MOLL，004MOLL，008MOLL，01MOLL草氨酸鹽分別作用于不含血清培養(yǎng)基及含10血清培養(yǎng)基胰腺癌PANC1細(xì)胞株24H、48H后，檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用，同時(shí)行HOCHEST33342及PI染色、流式細(xì)胞儀檢測(cè)草氨酸鹽對(duì)其凋亡的影響。結(jié)果結(jié)果草氨酸鹽對(duì)人胰腺癌PANC1細(xì)胞株的增殖有顯著的抑制作用，并且隨草氨酸鹽濃度增加，增殖抑制明顯增加，呈劑量依賴性，不含血清培養(yǎng)時(shí)抑制作用高于含血清組P001，；HOCHEST及PI染色、流式細(xì)胞儀檢測(cè)均表現(xiàn)細(xì)胞凋亡比例逐漸增高，且呈劑量依賴性P001。結(jié)論結(jié)論草氨酸鹽能夠顯著抑制人胰腺癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，有可能成為治療胰腺癌的新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞胰腺癌；凋亡；草氨酸鹽；乳酸脫氫酶

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多β-1，4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅰ和Ⅴ在兩型星形膠質(zhì)和施萬(wàn)細(xì)胞中的生物學(xué)作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)LR73051密級(jí)，單位代碼10422學(xué)號(hào)L20042303035◎厶茹辦孑碩士學(xué)位論文SHANDONGUNIVERSITYMASTERSTHESIS論文題目CDL33腫瘤干細(xì)胞在消化系腫瘤中的分離、鑒定及其生物學(xué)特性的研究ISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFCD133TUMORSTEMCELLSFROMTHEDIGESTIVESYSTEMTUMORSANDTHEINVESTIGATIONOFTHEIRBIOLOGICALPROPERTIES作專導(dǎo)合作導(dǎo)師2011年5月1日原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名剜蚓馴EL期塑關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作者簽名型型妹師簽名貯日期型型

簡(jiǎn)介：幽門螺桿菌重組蛋白SIYD對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制HELICOBACTERPYLORIRECOMBINANTPROTEINSSIYDIMPACTONTHEBIOLOGICALBEHAVIOROFGASTRICCANCERCELLSANDITSMECHANISM研究生鏖鹽導(dǎo)師塞堡一級(jí)學(xué)科鱉廛匡堂論文課題起止時(shí)間2QQ皇生窆月二2Q壘生壘旦中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧2014年5月目錄一、摘要中文論著摘要1英文論著摘要5二、英文縮略語(yǔ)9三、論文論文一幽門螺桿菌SIYD蛋白的原核表達(dá)、純化及鑒定前言11日U茜11材料與方法1L結(jié)果附論文圖片22討論29結(jié)論30論文二幽門螺桿菌SLY0對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響前言31日U舌3L材料與方法31結(jié)果附論文圖片37討論40結(jié)論；42論文三幽門螺桿菌SIYD影響胃癌細(xì)胞增殖的機(jī)制前言43日U舌43材料與方法43結(jié)果附論文圖片46討論50結(jié)J滄52四、本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)53五、參考文獻(xiàn)一54

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)國(guó)際十進(jìn)分類號(hào)（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文摻鍶羥基磷灰石對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響（題名和副題名）王薇王薇（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名張玉梅張玉梅教授（主任醫(yī)師）教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院修復(fù)科第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院修復(fù)科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士碩士專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學(xué)（修復(fù)）口腔臨床醫(yī)學(xué)（修復(fù)）論文提交日期201004答辯日期201005論文起止時(shí)間2009年05月至月至2010年05月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)第四軍醫(yī)大學(xué)摻鍶羥基磷灰石對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響摻鍶羥基磷灰石對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)行為的影響研究生王薇學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（修復(fù)學(xué)）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院導(dǎo)師張玉梅教授（主任醫(yī)師）資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金（50571079）關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞純鈦，摻鍶羥基磷灰石，微弧氧化，成骨細(xì)胞，細(xì)胞相容性中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2010年5月

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文程序性細(xì)胞死亡因子PDCD4在前列腺癌中的表達(dá)分布、生物學(xué)功能及其調(diào)控機(jī)制張克克培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科專業(yè)類臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（泌外）研究方向泌尿系腫瘤的診治指導(dǎo)教師袁建林教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位西京醫(yī)院泌尿外科二O一三年五月第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號(hào)UDC密級(jí)第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語(yǔ)表1中文摘要2ABSTRACT5前言9文獻(xiàn)回顧11正文21實(shí)驗(yàn)一PDCD4與前列腺癌組織病理分型分期的相關(guān)性研究211材料212方法223結(jié)果234討論24實(shí)驗(yàn)二過(guò)表達(dá)PDCD4對(duì)前列腺癌細(xì)胞增殖的生物學(xué)影響261材料262方法283結(jié)果304討論32實(shí)驗(yàn)三探討PDCD4的上游調(diào)控因子MIR155及在前列腺癌中的功能341材料342方法363結(jié)果394討論41小結(jié)43

簡(jiǎn)介：第一部分大鼠椎體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的體外生物學(xué)活性研究目的分離培養(yǎng)大鼠椎體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，探討其在體外培養(yǎng)增殖時(shí)的生物學(xué)活性。方法用骨髓沖洗法收集大鼠椎體和髂骨內(nèi)的骨髓，密度梯度離心法和貼壁法分離并純化骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，進(jìn)行體外擴(kuò)增，并檢測(cè)各組細(xì)胞增殖活性，繪制生長(zhǎng)曲線。用流式細(xì)胞鑒定檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)記CD90、CD34、CD29和CD44等表達(dá)情況。分別對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo)分化，并用茜素紅染色鑒定誘導(dǎo)分化結(jié)果。結(jié)果兩組骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外擴(kuò)增迅速，均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增殖，椎體組增殖活性大于髂骨組P結(jié)論椎體骨髓分離培養(yǎng)出的干細(xì)胞能很好的表達(dá)BMSCS的生物學(xué)特性，增殖活性和誘導(dǎo)分化潛能均強(qiáng)于髂骨骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，可以成為組織工程種子細(xì)胞的可靠來(lái)源。第二部分椎體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞注射對(duì)鼠退變椎間盤作用的初步研究目的建立并驗(yàn)證大鼠尾椎間盤退變模型，探討椎體骨髓基質(zhì)干細(xì)胞注射對(duì)鼠尾椎間盤退變的作用。方法選取健康3月齡SD大鼠40只，對(duì)大鼠尾椎間盤用細(xì)針穿刺纖維環(huán)法誘導(dǎo)退變，造模2周后拍攝X光片觀察造模效果，選取產(chǎn)生退變的大鼠27只，隨機(jī)分為B組退變組、C組培養(yǎng)基注射組和D組干細(xì)胞注射組，另選取未造模大鼠6只作為對(duì)照組A組。每組又分為一周組、二周組和四周組三個(gè)亞組。干細(xì)胞組造模椎間盤內(nèi)注射骨髓基質(zhì)干細(xì)胞，培養(yǎng)基注射組造模椎間盤內(nèi)注射等體積培養(yǎng)基，對(duì)照組、退變組不予特殊處理。分別于造模后1周、2周、4周抽取3只B、C、D三組大鼠和2只A組大鼠麻醉后拍攝尾椎正位片，測(cè)量椎間盤高度，并計(jì)算椎間盤高度指數(shù)。放射學(xué)檢查后對(duì)抽取的大鼠實(shí)施過(guò)量麻醉處死，取出椎間盤和相鄰的上下部分椎體，固定、切片，行HE染色和番紅固綠染色觀察椎間盤組織學(xué)改變，用1，9二甲胺基甲基藍(lán)結(jié)合法檢測(cè)椎問(wèn)盤內(nèi)GAG含量。結(jié)果放射學(xué)、生物化學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，和對(duì)照組相比，退變組和培養(yǎng)基注射組的椎間盤高度、椎問(wèn)盤內(nèi)GAG含量表達(dá)水平均有不同程度降低P結(jié)論細(xì)針穿刺法誘導(dǎo)大鼠尾椎問(wèn)盤退變模型成模時(shí)間短，效果可靠，經(jīng)濟(jì)便利。向大鼠鼠尾椎問(wèn)盤退變模型內(nèi)注射骨髓基質(zhì)干細(xì)胞能延緩椎問(wèn)盤的退變進(jìn)程。

簡(jiǎn)介：蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)體和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名翟望』量日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書館、中國(guó)社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所含萬(wàn)方數(shù)據(jù)電子出版社、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在年月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名瘟塑墜日期導(dǎo)師簽名趁望劉日期

簡(jiǎn)介：導(dǎo)師簡(jiǎn)介研究生導(dǎo)師和課題指導(dǎo)小組成員介紹李勝，男，生于1969年2月，山東濟(jì)南人，研究員、碩士研究生導(dǎo)師、醫(yī)學(xué)博士；主要從事肝膽胰外科臨床和科研工作，具有扎實(shí)系統(tǒng)的基礎(chǔ)理論知識(shí)和豐富的肝膽外科診療工作經(jīng)驗(yàn)；目前共完成本專業(yè)較復(fù)雜的手術(shù)數(shù)百例，如左、右半肝切除術(shù)，肝左三葉、右三葉切除術(shù)、肝尾狀葉切除術(shù)、胰十二指腸切除術(shù)和高位膽管癌切除術(shù)等肝膽胰腫瘤；熟練掌握了肝膽外科復(fù)雜、疑難病例的診治，處理較復(fù)雜的并發(fā)癥?？蒲泄ぷ髦?，目前為首承擔(dān)國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目2項(xiàng)，進(jìn)行胰腺癌淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制方面的研究；并承擔(dān)山東省科技廳科研課題2項(xiàng)。獲山東省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)3項(xiàng)。在國(guó)內(nèi)外公開醫(yī)學(xué)刊物上發(fā)表專業(yè)論文60余篇；其中SCI論文5篇IF累計(jì)達(dá)105分。課題指導(dǎo)小組成員姓名石學(xué)濤張波仲偉霞性別男男女出生年月196307196712196207職稱研究員副主任醫(yī)師研究員專業(yè)肝膽胰腫瘤外科肝膽胰腫瘤外科腫瘤病理診斷■■■■IR■I目錄中文摘要1英文摘要3主要符號(hào)表5￡一J一日J(rèn)舌“一”“‘“一“一?！耙弧薄?材料與方法9結(jié)果14討論17結(jié)論25參考文獻(xiàn)26綜述33攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果41致謝43

簡(jiǎn)介：南方醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)碩士學(xué)位論文P物質(zhì)SP對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)及其與WNT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)系THEBIOLOGICALEFFECTSOFSUBSTANCEPSPONBONEMARROWSTROMALSTEMCELLSBMSCSANDMC3T3E1CELLSANDTHERELATIONSHIPWITHWNTSIGNALINGPATHWAY課題來(lái)源國(guó)家自然科學(xué)基金81171723學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)委員梅剛金丹主任醫(yī)師、副教授創(chuàng)傷骨科學(xué)術(shù)型碩士研究生第一臨床分會(huì)委員會(huì)白波教授歐陽(yáng)鈞教授黃楓教授余斌教授王鋼教授倪國(guó)新教授金丹副教授陳濱副教授2014年5月26日廣州摘要GENERELATEDPEPTIDE，CGRP、神經(jīng)肽YNEUROPEPTIDEY含量明顯增加，提示我們?cè)诠钦塾稀⒐侵亟ㄖ猩窠?jīng)肽類物質(zhì)可能起到重要作用。近些年來(lái)，在骨折愈合、骨組織再生中神經(jīng)肽類物質(zhì)的重要作用逐漸被人們重視，并成為國(guó)內(nèi)、外學(xué)者研究熱點(diǎn)之一。神經(jīng)肽是一種肽類物質(zhì)，由神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生具有神經(jīng)調(diào)節(jié)活性，其中，SP、CGRP、NPY是最具代表性的物質(zhì)。SP和CGRP是感覺神經(jīng)纖維分泌的兩種主要神經(jīng)肽；NPY是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中分布最廣、含量最高神經(jīng)肽之一，介導(dǎo)外周神經(jīng)系統(tǒng)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控的重要因子。SP作為一種可由骨骼感覺神經(jīng)元分泌的重要神經(jīng)遞質(zhì)，在骨生理調(diào)節(jié)中起到重要作用，神經(jīng)肽SP屬于速激肽，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)5種速激肽亞型，SP、速激肽A、速激肽B、速激肽C、速激肽K3種SP受體NKL、2和3受體，神經(jīng)肽SP在許多生理過(guò)程中的調(diào)節(jié)作用是通過(guò)NKL受體發(fā)揮作用的。目前的研究多集中在神經(jīng)肽對(duì)成骨細(xì)胞的影響，對(duì)成骨細(xì)胞的前體細(xì)胞一骨髓基質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWSTEMCELLS，BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的研究較少。BMSCS具有很強(qiáng)的增殖能力和多向分化的潛能，在骨生理中扮演著重要角色，在適宜的體外或者體內(nèi)環(huán)境中可被誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和造血細(xì)胞等多種細(xì)胞，是骨組織工程研究中的理想種子細(xì)胞；MC3T3E1細(xì)胞是成骨前細(xì)胞，具有一定的成骨特性，在適宜的體內(nèi)外環(huán)境中可以向成骨細(xì)胞分化，因而也經(jīng)常用作種子，應(yīng)用于骨組織工程。因此，闡明神經(jīng)肽對(duì)BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的具體作用有助于我們更全面地了解神經(jīng)肽在骨生理過(guò)程中發(fā)揮的作用，進(jìn)一步揭示神經(jīng)生物學(xué)骨再生過(guò)程中的作用機(jī)制。從分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的角度而言，探究SP究竟是通過(guò)何種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮其對(duì)BMSCS及MC3T3E1細(xì)胞的生物學(xué)調(diào)控效應(yīng)同樣重要。目前關(guān)于BMSCS及MC3T3E1成骨分化過(guò)程中SP的生物學(xué)作用及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究較少。WNT／P．CATENIN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是目前骨骼系統(tǒng)相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制和骨代謝研究的熱點(diǎn)。WNTS蛋白與低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白LDLRECEPTORRELATEDPROTEIN，LRPFRIZZLEDS受體FZD受體復(fù)合體結(jié)合后，通過(guò)一系列胞質(zhì)蛋白DSH、GSK313、APC、AXIN等的相互作用，使得D．連環(huán)蛋白13CATENIN在胞質(zhì)穩(wěn)定并累積，II

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文抑制成纖維細(xì)胞PTEN基因的表達(dá)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)影響姓名黃念念申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師冷彥201104華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2方法方法將HELFPTEN與乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231共培養(yǎng)。（1）通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)MDAMB231細(xì)胞進(jìn)行KI67檢測(cè)，檢測(cè)共培養(yǎng)體系對(duì)MDAMB231細(xì)胞增殖能力的影響；（2）5FU誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，通過(guò)ANNEXINV/PI流式細(xì)胞儀檢測(cè)共培養(yǎng)體系對(duì)MDAMB231細(xì)胞抗凋亡能力的影響；（3）通過(guò)明膠酶譜實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證共培養(yǎng)體系的培養(yǎng)基中MMP蛋白的表達(dá)變化以及MMP活性率的改變；（4）通過(guò)TRANSWELL小室法，明確共培養(yǎng)體系對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDAMB231遷移能力的影響；（5）用MATRIGEL模擬并重建基底膜，通過(guò)TRANSWELL小室法，建立成纖維細(xì)胞HELFPTEN與乳腺癌細(xì)胞MDAMB231的交互作用模型，觀察HELFPTEN對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果結(jié)果（1）與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231其KI67表達(dá)較空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組顯著增高P005。（2）流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231具有拮抗5FU誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的作用，凋亡率明顯低于空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組P005。（3）明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)HELFPTEN以及乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231共培養(yǎng)的培養(yǎng)基中MMP蛋白的表達(dá)和MMP活性率均明顯高于空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組P005。（4）TRANSWELL遷移實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，遷移的細(xì)胞數(shù)呈現(xiàn)以下趨勢(shì)與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231＞“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組＞MDAMB231細(xì)胞普通培養(yǎng)組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。（5）侵襲轉(zhuǎn)移能力比較發(fā)現(xiàn)與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231＞“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組＞MDAMB231細(xì)胞普通培養(yǎng)組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。結(jié)論結(jié)論成纖維細(xì)胞HELF可提升乳腺癌細(xì)胞MDAMB231的增殖、抗凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移能力，而PTEN表達(dá)受抑的HELF細(xì)胞，對(duì)MDAMB231的增殖、抗凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移能力的增加影響更大，并可明顯提升MMP蛋白的表達(dá)和活性率。因此，成纖維細(xì)胞中的抑癌基因PTEN有望成為腫瘤治療干預(yù)的新靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞成纖維細(xì)胞；乳腺癌；PTEN；細(xì)胞增殖；侵襲轉(zhuǎn)移