簡介：實例分析分子生物學技術的應用,以INTERLEUKIN24為例,二、基因功能研究1MRNA水平和蛋白質水平表達譜2體外生物學活性細胞模型，調節(jié)表達水平細胞活力、細胞增殖、細胞周期、抑瘤活性、等等3體內生物學活性抑瘤活性、成血管活性、等等,內容,一、基因的基本信息發(fā)現(xiàn)、序列、染色體定位、表達調控、同源性分子、修飾、降解、細胞內定位、空間結構等等,三、作用機制信號轉導途徑和相互作用分子四、應用,235DOCUMENTS,IF597757227650306938435521341525648,ONCOGENE1995,1124772486CANCERBIOLTHER20032S23–S37,MDA5，MDA6P21，MDA7/IL24，MDA9/SYNTENIN,,SUBTRACTIONHYBRIDIZATION,一、MDA7/IL24,PAULBFISHERCOLUMBIAUNI,1發(fā)現(xiàn),雜交產(chǎn)物的克隆、篩選和測序,除去雜交體、過量探針、鹽和小片段,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,2提交序列,NCBI/GENBANK,,,3染色體定位,DATABASEANALYSIS,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,IL10FAMILY,MOLMED200174271282,4與IL24同源的分子,一致的保守的相似的,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51IMMUNOLOGY2005114216670,NCBIBLAST,KEGG,5基因的表達調控,JCELLPHYSIOL200018513646,基因組文庫,IL24CDNA探針,PCR,測序,啟動子GCG啟動子搜索轉錄起始位點引物延伸和作圖,轉錄水平,啟動子序列,JCELLPHYSIOL200018513646,AP1PKCACTIVATEDTFC/EBPGROWTHARRESTANDTERMINALDIFFERENTIATIONASSOCIATEDTF,,轉錄起始前復合物真核生物RNA聚合酶不與DNA分子直接結合，而需依靠眾多的轉錄因子。,轉錄前起始復合物,拼板理論一個真核生物基因的轉錄需要3至5個轉錄因子。轉錄因子之間互相結合，生成有活性和專一性的復合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結合、轉錄相應的基因。,RNA聚合酶保護法,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,JCELLPHYSIOL200018513646,NDEINHEI是啟動子轉錄活性的重要區(qū)域，C/EBPB和CJUN/AP1提高轉錄活性。,重要區(qū)域,NUCLEARLYSATES,ARROW1C/EBPBARROW2AP1,JCELLPHYSIOL200018513646,EMSA,C/EBPB和CJUN/AP1結合在MDA7/IL24啟動子上。,CELLLYSATES,,,IFNΒ和MEZ單獨或聯(lián)合處理不能顯著改變啟動子活性,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,3’UTR的ARE調節(jié)該基因在終末分化過程中的MRNA水平,AREAURICHELEMENTS,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,7分泌蛋白,MOLTHER20049335567,OVEREXPRESSION,WB,,ADIL24CELLLYSATE,ADIL24SUPERNATANT,分泌作用的抑制劑,MOLTHER20049335567,WB,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51,PNGASEFENDOGLYCANASEFENDOO內O糖苷酶,6翻譯后修飾,OVEREXPRESSION,WB,JBIOLCHEM2002277973417,MDA7/IL24蛋白可被糖基化修飾,MOLTHER20049335567,GLYCOPEPTIDASEF,LSN,7細胞內定位,MOLTHER20049335567,IFC,MOLTHER20049335567,,QUANTITATIVERECEPTORBINDINGANALYSIS,JBIOLCHEM2002277973417,,,,IL20R2,IL20R1/IL20R2,IL22R1/IL20R2結合AP的活性高。,8受體,JBIOLCHEM2002277973417,CELLSURFACESTAININGASSAY,RTPCR,EXPDERMAT200615991–1004,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,RTPCR,PCNC,CYTOKINE20084116–23,FACS,IFC,IL22R1/IL20R2IL20R1/IL20R2,IMMUNOLOGY2005114216670,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,3前列腺4睪丸5卵巢6小腸7結腸,1MRNA表達譜分布在人的免疫系統(tǒng),NB,二、基因功能的研究,ONCOGENE2001207051–7063,CYTOGROFACREV20031435–51,?UNTREATEDIFNΒMEZ,24H,NB,ONCOGENE2001207051–7063,REALTIMERTPCR,在黑色素瘤惡性發(fā)展過程中，MDA7/IL24的MRNA表達水平逐漸降低，直至完全喪失。,PHARMACOLTHER20061113596628,KAPLANMEIERSURVIVALANALYSIS,CANCERCELLINTER20101029,2蛋白水平,IHC,CYTOKINE20084116–23,類風濕關節(jié)滑膜,NC,SUBLININGMONONUCLEARCELLS,ENDOTHELIALCELLSOFBLOODVESSELS,CYTOKINE20084116–23,ELISA,免疫系統(tǒng)脾、胸腺、外周血白細胞特定細胞黑色素細胞、痣、早期黑色素瘤細胞、平滑肌細胞、皮膚成纖維細胞、皮膚傷口邊緣和基底類成纖維細胞樣細胞腫瘤細胞50多種，無內源性MDA7/IL24蛋白表達。,分布局限性,基因在靶細胞中的過表達,ADENOVIRUS,JCELLPHYSIOL2007210254959,CAR檢測COXSACKIEADENOVIRUSRECEPTORS,FACS,WB,,,人正常卵巢上皮細胞,卵巢癌細胞,靶細胞中重組蛋白的檢測,WB,卵巢癌細胞,MOLCANCER20076111,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,,7D,3細胞活力,CRYSTALVIOLETSTAINING,CANCERGENETHER20061311101122,TRAIL腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體,MOLMED200174271282,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,,ADMDA7能夠降低腫瘤細胞的活力。,特異性抑制多種腫瘤細胞生長,4體外抑瘤活性細胞增殖,CANCERGENETHER20061311101122,MTT,3HTHYMIDINEASSAY,MOLMED200174271282,,,CANCERRES2006661681828191,COLONYFORMATION,缺失信號肽的突變體SPMDA7具有抗瘤活性,CANCERRES2004642988–2993,WB,MTT,MATRIGELINVASIONASSAY,COLONYFORMATION,C8161,C8161,CANCERRES2004642988–2993,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,5體內抑瘤活性,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,IHC,NOAB1,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,抗瘤活性源自MDA7/IL24蛋白的表達,MOLCANCER20076111,MDAH2774TUMORBEARINGANIMAL,PHARMACOLTHER20061113596628,特異性抑制多種腫瘤細胞生長,MDAMB453,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,HUVEC,ONCOGENE20022129455866,5細胞周期分析,FACS,使腫瘤細胞G2/M期阻滯,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,WB,6細胞凋亡,CANCERGENETHER20061311101122,FACSANALYSIS,PISTAINING,,ANNEXINVSTAINING,MOLMED200174271–282,,FO1CELLSSB203580P38MARK的抑制劑,DNALADDER,PNAS20029910054–10059,TUNEL,PBS,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,H1299TUMORBEARINGANIMAL,ONCOGENE2002214558–4566,IHC,TUNEL,PCR,RTPCR,IHC,TUNEL,TUNEL,MCF7,MOLMED200174271282,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,CASPASE3ANALYSIS,MDAMB453,人正常卵巢上皮細胞,卵巢癌細胞,CASPASE3、CASPASE8和PARP被切割,MOLCANCER20076111,腺病毒感染結直腸癌細胞48H后,CANCERGENETHER20061311101122,,,,肺癌細胞,JCELLPHYSIOL2007210254959,具有劑量依賴效應,ZVADFMKCASPASE的廣譜抑制劑,CANCERGENETHER20061311101122,,,保護細胞免受凋亡,與BCL2家族基因相關,CANCERGENETHER20061311101122,刺激特定細胞凋亡,參與CASPASE9活化和自切割,腺病毒感染結直腸癌細胞48H,HUVECADMDA7,HUVECADMDA7MATRIGEL,ONCOGENE20022129455866,TUBEFORMATION,7抗血管形成作用,抑制內皮細胞形成管狀結構,ONCOGENE20022129455866,血管內皮細胞標志物表達降低,H1299TUMORBEARINGANIMALS,1P38MAPK途徑,三、作用機制,MOLCANCER20076111,WB,PKRDOUBLESTRANDEDRNAACTIVATEDPROTEINKINASE,,PNAS20029915100549,SBP38MARK抑制劑P38DNP38負顯性突變體,黑色素瘤細胞FO1,,,,,PNAS20029915100549,NB，WB,GADD生長阻滯和DNA損傷誘導的基因,,,,,NB，WB,3D,PNAS20029915100549,ANTISENSE,MTT,PNAS20029915100549,ADVECWHITEBARSADMDA7BLACKBARS,P38MAPK途徑和GADD家族成員的關系,PNAS20029915100549,2PI3K信號途徑,MOLTHER20038220719,H1299/ADMDA72400CDNA,MICROARRAY,MOLTHER20038220719,WB,H1299,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,MOLTHER20038220719,,,BIOTECHNIQUES2002SUPPL30–39,3選擇性誘導腫瘤細胞凋亡具有多種機制,CANCERRES2004642988–2993,CANCERRES200363238138–8144,MDA7蛋白誘導前列腺癌細胞凋亡的可能機制,CANCERRES200565221012810138,四、臨床應用研究,CANCERRES200565221012810138,CYCLE1DAY30,Ⅰ期臨床試驗證明MDA7/IL24使用安全、有臨床療效。,INGN241重組腺病毒INTROGEN公司,Ⅰ期28例Ⅱ期進行中,INGN241ADMDA7TREATMENTOFAMELANOMAMETASTASISINARIGHTSUPRACLAVICULARLYMPHNODE,MOLTHER2005；11,149–159,2ADMDA7/IL24與化療藥物聯(lián)合使用,抗體4D5,TRASTUZUMAB,HERCEPTIN,HER2HUMANEPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR2,HER2轉移乳腺癌,30HER2有效,CANCERGENETHER2006131095868,CANCERGENETHER2006131095868,FACS,CANCERGENETHER2006131095868,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,LADLUC,CANCERGENETHER2006131095868,ADMDA7/IL24HERCEPTIN,,CANCERGENETHER2006131095868,HERCEPTIN1AND2MG/ML,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,MCF7,MDAMB453,MDAMB453,CANCERGENETHER2006131095868,與HERCEPTIN聯(lián)合使用，抗瘤效果更好，并擴大抗瘤譜。,CANCERGENETHER2006131095868,MCF7HER18HER2OVEREXPRESSING,EGFREPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR,EGFRWILDTYPE,ADMDA7＋GEF,JCELLPHYSIOL2007210254959,,,MTT,GE?TINIBANORALLYACTIVESELECTIVEREVERSIBLEINHIBITOROFTHEEGFRTYROSINEKINASE,JCELLPHYSIOL2007210254959,與GEFITINIB聯(lián)合使用，抗瘤效果提高。,JCELLPHYSIOL2007210254959,SMDA7/IL24,1抑制血管內皮細胞成管能力,CANCERRES20036316510513,3基因工程重組MDA7/IL24蛋白藥物,CANCERRES20036316510513,CANCERRES20036316510513,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,裸鼠,CANCERRES20036316510513MOLTHER200511572433,MDAMB4543,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,具有體內抑瘤活性,CANCERRES20036316510513,SMDA7/IL24的抗瘤活性與其受體相關,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,SMDA7/IL24能夠抑制多種腫瘤細胞增殖，并誘導凋亡,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,小結,思考題,在日常生活中，你遇到哪些感興趣而又不知道答案的生命科學相關問題請用假說演繹法對其中的一個問題進行分析和探討。你如何理解研究思路和實驗技術之間的關系你認為在公共實驗室做實驗應該注意哪些問題請從正、反兩方面說明。在進行PCR實驗之前，你應該做哪些準備工作請設計將MDA7基因CDS插入到真核表達載體PSECTAG2A中的上下游引物。,FIG1,7FIG2是PCR結果，每個泳道的模板不同，你如何改進PCR條件使得AE樣品能得到特異性好的目的條帶,6你如何評價PCR電泳結果FIG1為什么如有問題如何解決,FIG1,8你用熱激法將連接產(chǎn)物轉化到細菌中，LBAMP平板沒有克隆，請分析可能的原因。9WESTERNBLOT實驗中的影響因素有哪些如果你得到的是沒有任何條帶的白板，你準備怎么辦10一位同學未能將PCR產(chǎn)物連入表達載體，請分析可能是哪些環(huán)節(jié)出問題,11實驗室現(xiàn)有的試劑如下1MTRISHCL，1MKCL，TRITONX100，305MGCL2MW203；已知1反應BUFFER中各試劑的濃度分別是10MMTRISHCL,50MMKCL,1TRITONX100,15MMMGCL2?，F(xiàn)在要配5ML的10反應BUFFER，如何用現(xiàn)有試劑配制請列出計算過程。,12對于一個分子生物學的關鍵詞/術語，你有哪些想法13就這次課的內容，你認為還可以從哪些角度進行MDA7/IL24的研究請說明你的理由。14如果你做某個實驗，三次都未得到你想要的結果，你準備下一步怎么辦15我們實驗課用過哪些儀器設備使用時最需要注意的分別是什么16請從講課內容、時間安排和授課方式上，談談你對“生物化學與分子生物學實驗技術”這門課程的建議。,謝謝,

簡介：精選公文范文，管理類，工作總結類，工作計劃類文檔，歡迎閱讀下載精選公文范文，管理類，工作總結類，工作計劃類文檔，感謝閱讀下載1微生物學思考題答案緒論1、你如何使你的朋友相信微生物不僅僅是一種病原盡管目前微生物仍在嚴重威脅人類的生存，但另一方面，我們必須強調，大多數(shù)微生物對人類是無害的。事實上，大多數(shù)微生物對人類社會還有巨大的價值。整個農(nóng)業(yè)系統(tǒng)在許多方面都依賴微生物的活動。許多主要的農(nóng)作物屬于豆科植物，它們的生長同專一性細菌緊密相連，這些細菌可在植物的根部形成根瘤結構。根瘤結構中，大氣中的氮轉變成可用于生長的氮化物。根瘤細菌的固氮活動，減少了昂貴肥料的需要。微生物在農(nóng)業(yè)上的另一個重要性在于，某些動物是反芻動物，這些主要的農(nóng)業(yè)動物具有瘤胃，微生物在瘤胃中進行消化。沒有這些微生物牛羊的飼養(yǎng)是不可能的。植物營養(yǎng)方面，微生物在碳、氮、硫這些重要營養(yǎng)成分的循環(huán)起精選公文范文，管理類，工作總結類，工作計劃類文檔，歡迎閱讀下載精選公文范文，管理類，工作總結類，工作計劃類文檔，感謝閱讀下載3它們轉入到合適的受體中于生產(chǎn)重要的、有商業(yè)價值的蛋白質。在自然界中，它無限小，但作用無限大。2、胡克和列文虎克對微生物學的貢獻有那些科恩對微生物學的貢獻有那些1665年，羅伯特胡克描述了霉菌的子實體結構，因此他是第一個描述微生物的人。1676年，列文虎克在研究辣椒水滲出的過程中發(fā)現(xiàn)了細菌，因此他是首次描述細菌的人?？贫鳛榧毦鷮W奠定了基礎并且發(fā)現(xiàn)了細菌的內生孢子。3、19世紀前期，人類認識微生物世界的4大障礙是什么什么技術使人類克服了這4大障礙4大障礙個體微小，外貌不顯、雜居混生，因果不顯技術顯微鏡的發(fā)明，滅菌技術的應用，純種分離技術的建立，純種培養(yǎng)技術的建立。4、什么是純培養(yǎng)如何獲得純培養(yǎng)為什么獲得純培養(yǎng)對微生物學的發(fā)展非常重要純培養(yǎng)微生物學中把從一個細胞或一群相同的細胞經(jīng)過培養(yǎng)繁2

簡介：1微生物學實驗復習題一、選擇題1革蘭氏染色的關鍵操作步驟是A結晶紫染色B碘液固定C酒精脫色D復染2放線菌印片染色的關鍵操作是A印片時不能移動B染色C染色后不能吸干DA和C3高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng)A細菌B真菌C放線菌4肉湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng)A酵母菌B霉菌C細菌5無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng)A自生固氮菌。B硅酸鹽細菌C根瘤菌DA、B均可培養(yǎng)EA、B、C均可培養(yǎng)6在使用顯微鏡油鏡時，為了提高分辨力，通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加A二甲苯B水C香柏油7常用的消毒酒精濃度為A75B50C908用甲醛進行空氣熏蒸消毒的用量是A20MLM3B6MLM3C1MLM39實驗室培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌的工藝條件是A121℃30MINB115℃30MINC130℃30MIN3C噴石炭酸DAB并用21干熱滅菌的關鍵操作是A滅菌物不能有水B保溫過程中不能開箱門C降溫不能太快22霉菌水浸制片的關鍵操作是A菌絲要分散B菌絲首先要用50的乙醇浸潤C蓋蓋玻片不能有氣泡DAC23加熱法染芽胞的染料通常是A孔雀綠B結晶紫C復紅D蕃紅24復紅法染鞭毛的關鍵操作是A玻片干凈B染料新鮮C菌體活化適當DA、B、C25鍍銀法染鞭毛的關鍵操作是A玻片干凈B染料無沉淀C加熱適當D菌體活化適當EAD26進行簡單染色使用的染色液通常是A復紅B蕃紅C結晶紫D孔雀綠EAD均可27物鏡頭上的“APO”字母代表A消色差物鏡B復消色差物鏡C半消色差物鏡28物鏡頭上的“ACH”字母表示A平場物鏡B超平場物鏡C消色差物鏡29物鏡頭上的“NH”字母表示A正相差物鏡B負相差物鏡

簡介：微生物學試題庫試題1一、填空每小題1分共10分1真核微生物核糖體類型為80S線粒體和葉綠體中的核糖體為70S。2大腸桿菌長為20ΜM寬為05ΜM其大小表示為05ΜMX20ΜM。3研究細菌遺傳、代謝性能常采用對數(shù)生長時期的細胞。4酵母菌細胞壁的主要成份葡聚糖和甘露聚糖。5侵染寄主細胞后暫不引起細胞裂解的噬菌體稱溫和噬菌體（溶源性噬菌體）。6微生物細胞的主要組成元素是蛋白質，核酸，類脂和碳水化合物。7食用菌是由營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲組成。8用物理或化學方法殺死物品上大部分微生物的過程稱滅菌。9細菌細胞的碳、氮營養(yǎng)比為61。10根瘤菌可與豆科植物共生固氮。二、單項選擇在每小題的四個備選答案中選出一個正確的答案并將其碼寫在題干的○內每小題1分共40分。1組成病毒粒子核髓的化學物質是○①糖類②蛋白質③核酸④脂肪2常用于飲水消毒的消毒劑是○①石灰②CUSO41③KMNO4④漂白粉3以高糖培養(yǎng)酵母菌其培養(yǎng)基類型為○①加富培養(yǎng)基②選擇培養(yǎng)基③鑒別培養(yǎng)基④普通培養(yǎng)基4多數(shù)霉菌細胞壁的主要成分為○①纖維素②幾丁質③肽聚糖④葡聚糖和甘露聚糖5屬于細菌細胞基本結構的為○①莢膜②細胞壁③芽胞④鞭毛6酵母菌常用于釀酒工業(yè)中其主要產(chǎn)物為○①乙酸②乙醇③乳酸④丙醇7土壤中三大類群微生物以數(shù)量多少排序為○①細菌＞放線菌＞真菌②細菌＞真菌＞放線菌③放線菌＞真菌＞細菌④真菌＞細菌＞放線菌8噬菌體屬于病毒類別中的○①乳酸②乙醇③丁酸④乙酸25T4噬菌體屬于○①螺旋對稱②立方體對稱③復合對稱④都不是26下列孢子中屬于霉菌無性孢子的是○①子囊孢子②擔孢子③粉孢子④接合孢子27根霉和毛霉在形態(tài)上的不同點是○①菌絲無橫隔②多核③蓬松絮狀④假根28只在液體表面出現(xiàn)菌膜的微生物屬○①厭氧型微生物②兼性厭氧型微生物③好氧型微生物④微需氧型微生物29半固體培養(yǎng)基中瓊脂使用濃度為○①0②0207③1520④50藍藻的營養(yǎng)類型為○①光能自養(yǎng)型②化能自養(yǎng)型③光能異養(yǎng)型④化能異養(yǎng)型31常用消毒酒精的濃度為○①998②30③70④502霉菌適宜生長的PH范圍為○①＜40②4060③6580④8033放線菌屬于○①病毒界②原核原生生物界③真菌界④真核原生生物界34土壤中三大類群微生物以數(shù)量多少排序為○①細菌＞放線菌＞真菌②細菌＞真菌＞放線菌③放線菌＞真菌＞細菌④真菌＞細菌＞放線菌35下列微生物中不能利用分子氮的是○①霉菌②弗蘭克氏菌③根瘤菌④圓褐固氮菌36屬于傘菌目的是○①銀耳②猴頭③香菇④木耳37加大接種量可控制少量污染菌的繁殖是利用微生物間的○①互生關系②共生關系③競爭關系④拮抗關系38接種環(huán)常用的滅菌方法是○①火焰滅菌②干熱滅菌③高壓蒸汽滅菌④間歇滅菌39沼氣發(fā)酵中發(fā)酵液的最適PH值為○①＜55②5564③6。872④＞76

簡介：1第一章第一章微生物基本概念微生物基本概念【思考題】1從形態(tài)結構、培養(yǎng)特性和致病性上，比較原核細胞型微生物、真核細型微生物和非細胞型微生物的主要區(qū)別。（1）形態(tài)結構）形態(tài)結構原核細胞型微生物如細菌，只有原始核，由裸露的環(huán)狀雙鏈DNA構成，無核膜和核仁，細胞器很不完善，只有核糖體。真核細胞型微生物如真菌，細胞核分化程度高，有核膜和核仁，細胞器分化明顯。非細胞型微生物如病毒，無典型的細胞結構，只能在活的易感細胞內生長繁殖。只有一種類型核酸（為DNA或RNA）。（2）培養(yǎng)特性）培養(yǎng)特性細菌和真菌能在人工合成培養(yǎng)基上生長，病毒不能在無生命培養(yǎng)基上生長，需采用雞胚接種、動物接種和細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)。（3）致病性）致病性細菌主要依靠侵襲力和內、外毒素致病。病毒可直接殺死宿主細胞，但主要是通過免疫病理損傷致病。第二章第二章細菌的形態(tài)與結構細菌的形態(tài)與結構【思考題】1試比較革蘭陽性菌和陰性菌細胞壁結構上的差異及其在致病性、抗原性、染色性和藥物敏感性的意義。革蘭陽性菌細胞壁由肽聚糖和穿插其中的磷壁酸組成，特點是肽聚糖含量高，結構致密，為三維立體網(wǎng)狀結構。革蘭陰性菌細胞壁中肽聚糖含量少，結構疏松，但具有由脂蛋白、脂質雙層和脂多糖構成的外膜。（1）致病性）致病性脂多糖由脂質A、核心多糖和O特異性多糖所構成，是細菌內毒素的主要成分。革蘭陰性菌主要靠內毒素致病，而革蘭陽性菌無內毒素，主要靠外毒素致病。（2）抗原性）抗原性磷壁酸是革蘭陽性菌特有的成分，是重要的表面抗原。（3）藥物敏感性）藥物敏感性革蘭陰性菌脂質雙層上鑲嵌有孔蛋白，可阻止一些抗3第三章第三章細菌的生理細菌的生理【思考題】1細菌分離培養(yǎng)和生化反應在感染性疾病診斷中有何意義為什么（1）感染性疾病的病原學診斷感染性疾病的病原學診斷由細菌引起的感染性疾病，最確切、最可靠的診斷依據(jù)（“金標準”）是，從患者標本中將病原菌分離培養(yǎng)出來，并鑒定其菌屬、種和型。細菌的生化反應對菌體形態(tài)、革蘭染色反應和菌落特征相同和相似的細菌的鑒定尤為重要。細菌藥物敏感試驗能指導臨床選用抗菌藥物治療。（2）生物制品的制備）生物制品的制備制備疫苗、類毒素、抗毒素等用于防治，制備菌液、抗血清等用于診斷。2根據(jù)培養(yǎng)基的性質與用途，可將培養(yǎng)基分為幾類培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質。按營養(yǎng)組成和用途，可分為基礎培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基等；按物理性狀分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基三大類。其中，平板固體培養(yǎng)基用作純種細菌的分離；斜面固體培養(yǎng)基用于菌種的保存；液體培養(yǎng)基主要用于細菌的增菌；半固體培養(yǎng)基主要用于檢查細菌的動力，即有無鞭毛。第四章第四章消毒與滅菌消毒與滅菌【思考題】1在防治疾病過程中，為什么強調醫(yī)務人員一定要樹立無菌觀念和嚴格執(zhí)行無菌操作從預防感染出發(fā)，醫(yī)務工作者必須建立“處處有菌”和無菌觀念，嚴格執(zhí)行無菌操作，這就要求必須對所用的物品（如注射器、手術器械、手術衣等）、工作環(huán)境（如無菌操作室、手術室、產(chǎn)房等）和人體體表進行滅菌或消毒，以確保所用的物品和工作環(huán)境的無菌或處于無菌狀態(tài)。

簡介：水生生物試題庫水生生物試題庫枝角類的游泳器官是第二觸角橈足類是第一觸角。橈足幼體橈足幼體亦稱劍水蚤型幼蟲期。系繼后無節(jié)幼體之后的撓足類幼蟲的一個發(fā)育階段。身體較無節(jié)幼體長，前體部和后體部之區(qū)分明顯。口器之構造接近于成體，尾叉已形成?？蛇M一步分為第一至第六橈足幼體期，第二橈足幼體期后，每期增加1個體節(jié)，最后完成10個活動體節(jié)。尾鰓蚓屬（鲺屬ARGULUS）孵化時亦為橈足幼體，但可發(fā)生變態(tài)，而具有與橈足亞綱完全不同的外觀。無節(jié)幼體無節(jié)幼體低等甲殼類孵化后最初的幼體，但高等甲殼類在更高的發(fā)育階段才開始出現(xiàn)（十足目、糠蝦目）甲殼綱之幼體中，身體尚不分為頭胸部和腹部，呈扁平橢圓形，在正中線前方有無節(jié)幼體眼1個，其后方有口和消化管（肛門尚未開啟），左右具第一觸角、第二觸角和大顎等3對附肢，這一階段稱為無節(jié)幼體。一種枝角類的剛毛式為剛毛式為00131130013113，請解釋其含義，圖示之并標注各部分名稱。（6分）答此剛毛式的含義為此種枝角類第二觸角外肢4節(jié)，第1、2節(jié)無剛毛，第3節(jié)具1根剛毛，第4節(jié)具3根剛毛；內肢3節(jié)，第1、2節(jié)分別具有1根剛毛，第3節(jié)具3根剛毛。（解釋含義3分；圖示3分）垂直移動垂直移動為了捕食或繁殖活動，魚類等水生動物從水面到水底或從水底到水面的往還遷移。晝夜和季節(jié)橈足類雌雄區(qū)別橈足類雌雄區(qū)別雄的多一節(jié)腹節(jié)。雌性，腹面膨大，叫生殖突起。雄性第一觸角有較多的感覺毛或感覺棒，特化成執(zhí)握器，。中華哲水蚤的特征身體呈長筒形，體長僅2～3毫米。該種最顯著的特征是雌雄的第5胸足第1基節(jié)的內緣都具齒列（雌性齒數(shù)一般為18～22，雄性一般為11～21）。齒的基部彼此連接，齒列的近中央部分有明顯凹陷，齒邊較小。雄性第5胸足左足外枝較右足的長得多。左足外枝第1、2節(jié)較狹長，第3節(jié)短小，呈錐狀；但右足的外枝較短，第3節(jié)末端沒有達到左足外枝第2節(jié)的中央。左足內枝第3節(jié)的末端一般不超過外枝第1節(jié)的末端。蝦的鰓蝦的鰓在甲殼動物中是種類最多的，構造也最復雜，在分類上也具有重要的價值，在鰓腔中通常有側鰓，關節(jié)鰓，足鰓，肢鰓側鰓，關節(jié)鰓，足鰓，肢鰓4）種。水生維管束植物按其生活型一般可分為漂浮植物如鳳眼蓮，浮葉植物如睡蓮，挺水植物如蓮，沉水植物如苦草。腔腸動物常有世代交替現(xiàn)象，即在同一種的生活史中，有水螅型世代（即無性世代）和水母型世代（即有性世代）。ROTIFER的含義是輪蟲其主要特征是具有_______頭部具有輪盤___________________，_____________咽部具有咀嚼囊（器________________和__________原腎管排泄器官_________________。瓣鰓類殼高指由殼頂?shù)礁咕壍木嚯x，殼長指前后兩端之間的距離，殼寬指左右兩殼膨脹的最大的的距離。湖淀湖淀微囊藻在富營養(yǎng)化的水體中，條件適宜的時候（2832℃、PH895），大量繁殖形成砂絮狀水華，使水色呈灰綠色，當形成強烈水華時，常被風浪吹涌堆積在一起，好像在水面蓋上一層厚厚的油漆，人們稱它為湖淀。底棲動物底棲動物生活史的全部或大部分時間生活于水體底部的水生動物群，是水域生態(tài)系統(tǒng)的一個重要組成部分。按系統(tǒng)發(fā)生可分原生底棲動物，次生底棲動物，按大小分為大型底棲動物和小型底棲動物，按與底質的關系可分為底上生活型、底內生活型、底游生活型。常見的如雙殼類軟體動物等。似親孢子似親孢子某些藻類進行無性繁殖時所產(chǎn)生的一種不動孢子。因其形態(tài)和母細胞相似而得名。見于綠球藻屬、小球藻屬等。2復大孢子硅藻特有的一種繁殖細胞（1分）。硅藻細胞進行分裂繁殖時，所產(chǎn)生的2個子細胞中，一個以母細胞的上殼為上殼，故與母細胞同大，一個以母細胞的下殼為上殼，故略小于母細胞。所以，經(jīng)過多代細胞分裂后，部分后代細胞變得越來越?。?分）。但有時可形成特殊的孢子而恢復到原來的大小，這種孢子稱復大孢子（1分）。冬芽冬芽水生植物具有的一種特殊的芽，處于幼態(tài)而未充分伸展的植株。用于繁殖，在秋末環(huán)境條件發(fā)生一定變化時會產(chǎn)生冬芽。冬芽形成后離開母體，沉沒于水底度過不良環(huán)境，等條件適宜時再萌發(fā)成心的植株咀嚼器咀嚼器位于咀嚼囊內，是輪蟲消化系統(tǒng)中的特殊構造，起咀嚼食物的作用。緣膜緣膜位于水螅水母傘口之環(huán)狀薄膜。內有肌纖維，呈環(huán)狀排列，若該肌肉收縮，則緣膜即被上舉至水平位置，傘口

簡介：1,胎膜與胎盤FETALMEMBRANEANDPLACENTA,DEPARTMENTOFDEVELOPMENTALBIOLOGYSCHOOLOFLIFESCIENCESCENTRALSOUTHUNIVERSITYZHANGJIANXIANGCSUEDU,2,FETALMEMBRANEANDPLACENTA主要是為胚胎生長發(fā)育提供保護、營養(yǎng)，并進行呼吸和排泄的附屬器官；同時胎盤有內分泌功能；卵黃囊為胚體發(fā)育提供了造血干細胞和原始生殖細胞。胎兒娩出后胎膜、胎盤及子宮蛻膜一并排出，總稱為衣胞。,3,總稱衣胞（AFTERBIRTH）,一胎膜（FETALMEMBRANE）包括絨毛膜、羊膜、卵黃囊、尿囊和臍帶。是胚泡衍生的附屬結構。不參與胚胎的構成，但有多方面作用。二胎盤（PLACENTA）胎兒的叢密絨毛膜與母體的基蛻膜共同形成的盤狀結構。有物質交換、內分泌、屏障功能,4,一胎膜,,1絨毛膜（CHORION）胚胎發(fā)育的第二周,滋養(yǎng)層細胞迅速向外增殖、分化，形成合體滋養(yǎng)層SYNCYTIOTROPHOBLAST。深面一層立方形細胞,邊界明顯，稱細胞滋養(yǎng)層CYTOTROPHOBLAST。在胚泡表面形成許多不規(guī)則突起，稱為絨毛；,5,絨毛發(fā)育過程,6,絨毛基本構成滋養(yǎng)層和胚外中胚層,發(fā)育過程,,,7,第三周，胚外中胚層伸入絨毛干，此時初級絨毛發(fā)育為次級絨毛干。第17～20天，絨毛中軸和絨毛膜板的胚外中胚層組織分化形成毛細血管網(wǎng)，此時絨毛稱三級絨毛干。三級絨毛干的細胞滋養(yǎng)層細胞增殖，穿出合體滋養(yǎng)層，伸抵基蛻膜組織，將絨毛干固定于基蛻膜上。在絨毛間隙的蛻膜面擴展，形成細胞滋養(yǎng)層殼。,8,絨毛膜DE演變,平滑絨毛膜（朝向包蛻膜）,叢密絨毛膜（朝向基蛻膜）,,,,六周后,9,,10,叢密絨毛膜（朝向基蛻膜）,平滑絨毛膜（朝向包蛻膜）,11,絨毛間隙的形成絨毛的合體滋養(yǎng)層細胞分泌蛋白分解酶，使鄰近的蛻膜分解形成大小不等的間隙稱絨毛間隙。使蛻膜的血管開口于絨毛間隙?，F(xiàn)在大多數(shù)人認為，合體滋養(yǎng)層細胞大量分裂增殖，并出現(xiàn)許多小腔隙，這些腔隙將合體滋養(yǎng)層細胞分隔一些大小不等、形狀不規(guī)則的合體滋養(yǎng)層細胞索。細胞索互相吻合形成網(wǎng)，腔隙也相互通連，形成絨毛間隙INTERVILOUSSPACE。隨后,合體滋養(yǎng)層細胞分泌蛋白分解酶和血管擴張素，分解蛻膜組織與血管內皮，使破裂的血管擴張，形成血竇，并與絨毛間隙相通。并使螺旋動脈開口于絨毛間隙，此時絨毛間隙中充滿了母體動脈血。,12,,,,,絨毛干,13,絨毛膜異常,,PICTURE,14,葡萄胎,15,葡萄胎,16,葡萄胎,17,HYDATIDIFORMMOLE,18,NORMALHYDATIDIFORMMOLE,19,絨癌,20,絨癌,21,絨癌,22,2卵黃囊YOLKSAC卵黃囊是內胚層周邊的細胞向腹側面增殖分化形成的囊狀結構,其外有胚外中胚層的臟層覆蓋。卵黃囊的頂━內胚層形成原始消化管，其余部分留在胚體之外,逐漸變窄,并逐漸被包入臍帶內，至第6周完全閉鎖成卵黃蒂。卵黃囊發(fā)生的意義在人類不發(fā)達，認為是生物進化的遺跡器官重要意義第16天,卵黃囊壁的胚外中胚層細胞增殖,分化出血島BLOODISLAND。發(fā)育分化為造血干細胞。人類原始生殖細胞卵黃囊發(fā)育異常卵黃囊起始部位可閉鎖不全，在與消化管連接處遺留一盲管狀憩室，稱MWCKELDIVERTICULUM或回腸憩室。如果完全未閉可出現(xiàn)臍糞瘺。,23,,卵黃囊,,,胚盤包卷使卵黃囊的頂━內胚層形成原始消化管，其余部分留在胚體之外,逐漸變窄,并逐漸被包入臍帶內,24,2卵黃囊（YOLKSAC）,意義其一，第16天,卵黃囊壁的胚外中胚層細胞增殖,分化出血島BLOODISLAND。發(fā)育分化為造血干細胞，原始血管。其二，人類原始生殖細胞來源于卵黃囊的尾側的內胚層細胞遷入生殖嵴，分化為生殖細胞。,血島,25,,胚外中胚層細胞,卵黃囊壁,內胚層,裂隙（未來的血管腔）,內皮,造血干細胞,血島的演變,26,3羊膜（AMNIOTICMEMBRANE）,羊膜的形成與結構羊膜薄而透明，由羊膜上皮和胚外中胚層構成。胚胎早期羊膜上皮一層扁平細胞，胞質內富含糖原；后半期大部分羊膜上皮呈為立方形，胞質內糖原減少，出現(xiàn)脂滴，其它細胞器不發(fā)達；細胞游離面有不規(guī)則微絨毛；胎盤部的羊膜上皮為柱狀。,27,3羊膜（AMNION）1羊膜最初位于胚盤背側，其邊緣與外胚層相延續(xù)。羊膜與羊膜腔的迅速擴大,胚體凸入羊膜腔內,羊膜腔由背側擴展到胚體的腹側，羊膜反折包在臍帶表面。第20周時,羊膜腔擴大,胚外體腔消失,羊膜與絨毛膜相貼。羊膜是一層半透膜，分泌羊水。,28,,羊膜,羊水,,,,胚體凸入羊膜腔內,羊膜腔不斷擴大，羊膜腔由背側擴展到胚體的腹側，羊膜在胚體腹側包裹體蒂，形成原始臍帶。,29,2羊水AMNIOTICFLUID羊膜腔內充滿羊水,使胚胎在羊水中發(fā)育，這是種系發(fā)生重演特征之一。羊水的來源早期主要由羊膜細胞分泌；至第12周，胎兒開始將尿液排入羊水。羊水吸收途徑①胎盤與臍帶表面的羊膜上皮吸收；②胎兒體表上皮細胞吸收，③胎兒吞飲羊水每天約500～700ML。羊水量隨胚胎發(fā)育不斷增加，分娩時約為10001500ML。＜500ML為羊水過少，胎兒易發(fā)生粘連?？赡芘c胎兒無腎或尿道閉鎖有關。＞2000ML為羊水過多，可影響胎兒正常發(fā)育，可能與胎兒消化管閉鎖，不能吞咽羊水有關,30,羊水的作用①胎兒在羊水中自由活動，防止胚體局部粘連。②緩沖外力的壓迫、沖擊或振蕩。③胎兒吞飲羊水，使胎兒消化、泌尿系統(tǒng)的功能逐漸建立,使羊水不斷更新。④羊水有擴張宮頸和沖洗產(chǎn)道的作用。⑤羊水中有大量脫落細胞，抽羊水進行染色體檢查，可早期診斷某些先天性疾病。,31,4、尿囊ALLANTOIS,形成第3周末，原始消化管尾端腹側面向體蒂內伸出的一個盲管。尿囊遠段變成一細管，伸入臍帶內，稱臍尿管。該管最終閉鎖，形成臍正中韌帶。,,32,4尿囊ALLANTOIS生物學意義其一，誘導臍血管發(fā)生。胚外中胚層形成尿囊動脈和尿囊靜脈各一對。其二，尿囊起始部位參與膀胱的形成。轉歸根部與膀胱相通，演化為膀胱的一部分，其余部分閉鎖并退化為臍正中韌帶。,33,尿囊（ALLANTOIS）尿囊發(fā)育異常如果臍尿管在出生時未閉鎖，可形成臍尿瘺。,34,5臍帶UMBILICALCORD臍帶是連于胚胎臍部與胎盤之間的索狀結構。臍帶的生理功能胎兒血液通過胎盤膜與母血進行物質交換。,35,,臍帶形成與結構臍帶主要來源于體蒂，隨著胚盤邊緣向腹側包卷，羊膜腔不斷擴大，羊膜逐漸將卵黃囊推向體蒂，形成圓索狀結構，稱臍帶。臍帶表面有羊膜上皮包裹，很光滑；臍帶內的胚外中胚層分化為間充質，后者進一步分化為結締組織和臍血管。,36,臍帶發(fā)育異常臍帶長約40～60CM，平均為55CM短于35CM稱臍帶太短，分娩時易引起胎盤早剝，造成出血過多。等于或超過80CM,稱臍帶過長易纏繞胎兒肢體或頸部，可致局部發(fā)育不好，甚至胎兒窒息死亡,37,,大體結構,外形園盤狀，Φ1520CM，中厚邊薄，10～40CM，均厚25CM，重約450～650克。胎兒面灰白、光滑，羊膜覆蓋，臍帶位于中央或偏位。血管分支呈放射狀向四周散開。,二胎盤（PLACENTA）,38,,,二胎盤（PLACENTA）,母體面暗紅、粗糙、1530個胎盤小葉，小葉間為淺溝。胎盤隔分隔絨毛間隙。每個小葉由1～4個絨毛干及其發(fā)出的絨毛和外表的基蛻膜構成。,大體結構,39,,臍動脈,,,,臍靜脈,,,螺旋動脈,,子宮靜脈,,絨毛間隙,,基蛻膜,,胎盤隔,40,微細結構,叢密絨毛膜絨毛膜板發(fā)出4060個絨毛主干。主干延伸至基蛻膜，形成細胞滋養(yǎng)層殼。絨毛間隙絨毛干之間的間隙，含母體血液。基蛻膜底部有螺旋動脈和子宮靜脈開口，有胎盤隔分隔絨毛間隙。,胎盤（PLACENTA）,41,胎盤血循環(huán),特點兩套，互不相混，但可進行物質交換途徑①胎血循環(huán)臍Ａ→胎盤Ａ→毛細血管→胎盤Ｖ→臍Ｖ②母體循環(huán)子宮Ａ→螺旋Ａ→絨毛間隙→子宮內膜Ｖ→子宮Ｖ,胎盤（PLACENTA）血循環(huán)與胎盤膜,42,,胎盤膜,胎盤膜PLACENTALMEMBRANE，又稱胎盤屏障（PLACENTALBARRIER）。胎兒血與母體血進行物質交換所必須通過的結構稱胎盤膜或胎盤屏障PLACENTALBARRIER。由合體滋養(yǎng)層、細胞滋養(yǎng)層與基膜、絨毛內結締組織、絨毛內毛細血管基膜及內皮組成,,43,胎盤膜,,,胎兒血,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,母體血,,,,,,,,,合體滋養(yǎng)層,細胞滋養(yǎng)層,基膜,結締組織,血管基膜,血管內皮,44,胎盤功能,①物質交換,,,,,,,胎盤膜,,,,,,45,胎盤功能,②屏障作用,,,,,,,胎盤屏障,,,,,,想進來沒門,大多數(shù)致病微生物,46,胎盤功能,②屏障作用,,,,,,,胎盤屏障,,,,,,大多數(shù)致病微生物,,少數(shù)致病微生物,47,胎盤功能,③內分泌功能,胎盤（PLACENTA）,48,3胎盤的功能胎盤的生理功能極其重要，也非常復雜。主要有物質交換、物質代謝、分泌激素及屏障作用。1物質交換胎兒所必須的氧和營養(yǎng)物質均需從母體獲得，其代謝產(chǎn)物也需通過胎盤排除體外。2胎盤的代謝功能早期胎盤能合成糖原；合成脂肪酸等；并具有葡萄糖、戊糖磷酸鹽、三羧酸循環(huán)及電子轉移系統(tǒng)。3胎盤的內分泌功能能合成多種類固醇激素、肽類激素和蛋白類激素；還能合成多種細胞因子和多種遞質。絨毛膜促性腺激素能促進母體黃體生長發(fā)育，維持妊娠。絨毛膜促乳腺生長激素能促進母體乳腺生長發(fā)育。孕激素和雌激素促進子宮增生肥大，抑制子宮平滑肌收縮、維持妊娠、調節(jié)孕婦血壓等作用。合成的多種細胞因子對胚胎細胞生長發(fā)育、細胞分化及形態(tài)發(fā)生具有極其重要的意義。如表皮生長因子、神經(jīng)生長因子、轉化生長因子、胰島素樣生長因子等，通過胎盤細胞自分泌或旁分泌作用互相調控，維持胎盤和胎兒正常發(fā)育。,49,胚胎齡的推算,根據(jù)胚胎月經(jīng)齡的概念和胚胎發(fā)育時限，推導出了計算預產(chǎn)期的公式末次月經(jīng)的年份1，月份－3，日7。例如某孕婦末次月經(jīng)第一天為2019年8月1日，其預產(chǎn)期為2019年1＝2019年，8月3＝5月，1日7＝8日，即2019年5月8日。,50,THANKS,51,,謝謝,

簡介：醫(yī)學微生物學的新挑戰(zhàn),湖南省第二人民醫(yī)院尹鐵球,OUTLINE,微生物學發(fā)展簡史感染性疾病與人類自動化儀器的進展分子生物學在微生物檢驗中的應用細菌鑒定及分類耐藥性檢測病毒變異的臨床意義,微生物學發(fā)展簡史,經(jīng)驗微生物學時期實驗微生物學時期現(xiàn)代微生物學時期,認識微生物的歷程,微生物的發(fā)現(xiàn)微生物學的開山鼻祖列文虎克微生物學的奠基人巴斯德醫(yī)學微生物學的奠基人科赫,微生物學的經(jīng)驗時期十七世紀上半葉以前利用微生物,古希臘時蒸酒,,,微生物在地球上存在了30多億年，人類并不知道一直和微生物生死共處我國公元2000多年前就利用微生物釀酒許多疾病是由微生物引起的11世紀肺癆我國17世紀初，吳有性醫(yī)生在瘟疫論中認為傳染病是“乃天地間別有一種異氣所感”，并且指出“氣即是物，物即是氣”，肯定地預見有某種實體是傳染病的病原體我國18世紀，描述鼠疫,實驗微生物學時期十七世紀下半葉至二十世紀初1、微生物的發(fā)現(xiàn)和微生物形態(tài)學時期,,,,荷蘭人列文虎克LEEUWENHOEK16321723是微生物學的先驅,微生物學的開山鼻祖列文虎克,荷蘭人用自己制造的顯微鏡觀察到了被他稱為“小動物”的微生物世界發(fā)現(xiàn)了桿菌、球菌和螺形菌實實在在看到并記錄了一類從前沒有人看到過的微小生命因為這個偉大的發(fā)現(xiàn)，他當上了英國皇家學會的會員,列文虎克觀察到的微生物,2、微生物生理學時期建立了一套獨特的研究方法,尋找各種傳染病病原菌,巴斯德在觀察受狂犬病感染的兔脊髓,,,,巴斯德在工作中,著名的巴斯德研究院,巴斯德在微生物學上的貢獻,有機物發(fā)酵和腐敗由微生物引起解決葡萄酒和啤酒變酸問題創(chuàng)立巴氏消毒法解決蠶繭的“微粒子病”的疾病，挽救了法國蠶絲業(yè)主張傳染病是由微生物引起的，并可通過接觸、唾液及糞便傳播19世紀70年代，研究炭疽病，拯救了畜牧業(yè)1881年研制成功減毒活疫苗開創(chuàng)人類戰(zhàn)勝傳染病的新世紀1885年，巴斯德第一次治好了被瘋狗咬傷的9歲男孩梅斯特奠定了免疫學基礎,微生物方法學和醫(yī)學微生物學奠基人科赫,科赫,1882年發(fā)現(xiàn)引起結核病的病原分離出結核桿菌創(chuàng)立了微生物學檢查方法固體培養(yǎng)技術、染色技術、實驗動物感染發(fā)現(xiàn)炭疽桿菌、霍亂弧菌總結了著名的“科赫法則”確立病原微生物1905年獲得了諾貝爾醫(yī)學和生理學獎,分離細菌的固體培養(yǎng)基,KOCH氏確定病原體四要點,在每一例患病的病人中，都應找到此種微生物該微生物能被分離，且能在純培養(yǎng)基中生長培養(yǎng)出的微生物接種于易感動物，一定能導致動物產(chǎn)生該病在實驗性發(fā)病動物中，一定能觀察并重新獲得此種微生物,李斯特在石炭酸噴霧下進行手術,李斯特無菌操作奠基人,伊凡諾夫斯基病毒的發(fā)現(xiàn)者歐立希（EHRLICH）1910年砷凡納明抗梅毒藥的發(fā)現(xiàn)者,1929年青霉素發(fā)現(xiàn)者弗萊明1940年弗洛瑞提純應用于臨床,弗萊明研究微生物的生命活動,,,,DOMAGK發(fā)現(xiàn)黃胺藥,GRIFFITH發(fā)現(xiàn)細菌轉化現(xiàn)象,新病原微生物的確定方面1974年從萊姆LYME病患者分得疏螺旋體1976年在美國費城一次退伍軍人會議期間發(fā)生肺炎流行,次年分離出軍團菌1983年從慢性胃炎病人活檢標本中分離出幽門螺桿菌,現(xiàn)代微生物學時期,二十世紀中葉至今,1986年我國臺灣省分離得肺炎衣原體1983年首先在美國發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒（HIV）近期新發(fā)現(xiàn)的病毒有腎綜合征出血熱病毒、新疆出血熱病毒、B組輪狀病毒、丙型肝炎病毒和戊型肝炎病毒等,1973年以來認識的病原體示例,年份微生物疾病1973輪狀病毒全球性嬰兒腹瀉的主要原因1976小隱孢子蟲急性和慢性腹瀉1977埃博拉病毒埃博拉出血熱1977嗜肺性軍團桿菌軍團病1977HANTAAN病毒伴有腎綜合征的出血熱1977空腸彎曲菌全球散布的腸病1980HTLVIT細胞淋巴瘤白血病1981金葡萄菌產(chǎn)毒素株中毒性休克綜合征1982大腸桿菌O157H7出血性腸炎、溶血性尿毒癥1982HTLVII毛細胞白血病1982BURGDORFERI螺旋體萊姆病1983HIV愛滋病1983幽門螺旋桿菌消化性潰瘍病1988HEV腸道傳播的非A、非B型肝炎1990GUANARITO病毒委內瑞拉出血熱1992霍亂弧菌O139與流行性霍亂有關的新株1992HELLEM巴爾通氏體貓抓病，桿狀血管瘤病1994SABIA病毒巴西出血熱2019G型肝炎病毒（HGV）非腸道傳播的非A、非B型肝炎2019人類皰疹病毒8型與愛滋病有關的KAPOSI肉瘤2019TSE致病因子克羅伊茨非爾特雅各布病的新變型2019禽流感病毒A（H5N1）流感,,湯飛凡發(fā)現(xiàn)沙眼衣原體,,病原微生物的致病機制方面微生物基因組研究方面微生物檢測技術方面防治病原微生物措施方面,感染性疾病與人類,人類已經(jīng)宣布消滅的疾病天花在某些地區(qū)已經(jīng)得到控制的疾病麻疹、脊髓灰質炎、白喉、百日咳、結核、鼠疫正在流行的疾病傷寒、痢疾、病毒性肝炎、霍亂,,感染性疾病與人類,新發(fā)生的傳染性疾病原有微生物的再發(fā),,一、新發(fā)生的傳染性疾病,1、原已存在但未被認為是傳染病例如，消化性潰瘍,T細胞白血病,2、可能早已存在但未知,技術進步發(fā)現(xiàn)或人畜接觸機會增加例如，丙型肝炎,萊姆病,3、過去確實不存在,由于微生物發(fā)生變異而產(chǎn)生例如，AIDS,O139,耐藥菌株,禽流感,SARS,,新發(fā)生的傳染性疾病的原因,人類的不良行為進入以前未進入的原始森林和地區(qū)采礦旅游開墾嗜食野生動物寵物熱性亂和吸毒氣候都市化人口遷移擁擠易感人群增加“貧民區(qū)”醫(yī)源性感染和濫用抗生素戰(zhàn)爭貿(mào)易水土流失微生物的持續(xù)不斷變異,新近認識的致病微生物,禽流感病毒、SARS、H1N1、產(chǎn)NDM1細菌,產(chǎn)NDM1細菌,超級細菌,產(chǎn)NDM1細菌,產(chǎn)NDM1細菌全稱“產(chǎn)Ⅰ型新德里金屬Β內酰胺酶（NEWDELHIMETALLOΒLACTAMASE1,NDM1）腸桿菌科細菌”，簡稱“產(chǎn)NDM1細菌”，是一種對多種抗菌藥物廣泛耐藥的細菌，主要為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌；特點屬于腸桿菌科細菌，致病力與普通腸桿菌科細菌沒有差別；由于產(chǎn)生NDM1導致廣泛耐藥，為“泛耐藥菌”；主要導致醫(yī)院感染；源于南亞地區(qū)，已在全球播散。,細菌耐藥概念,多重耐藥（MULTIPLEDRUGRESISTANCE,MRD）指細菌同時對三種以上結構不同（作用機制不同）抗菌藥物耐藥，如頭孢菌素、喹諾酮類、氨基糖苷類；泛耐藥（PANDRUGRESISTANCE,PDR）細菌對本身敏感的所有藥物耐藥；超級細菌（SUPERBUG）并非科學概念，一般指PDR與部分MDR，沒有確切定義，以下細菌屬于此列MRSA/VRSAVREMDRPA,PDRABESBLAMPC腸桿菌產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌（包括產(chǎn)NDM1細菌）,細菌耐藥的危害,COSGROVE,ETALCLINICALINFECTIOUSDISEASES201942S82–9,產(chǎn)與不產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的后果比較,細菌耐藥的危害,肖永紅等，抗生素類藥物濫用公共問題研究，2019,為什么需要關注產(chǎn)NDM1細菌,泛耐藥導致的治療挑戰(zhàn)；多種腸桿菌科細菌發(fā)現(xiàn)；快速從南亞地區(qū)傳播到歐美國家；不僅在醫(yī)院感染這種發(fā)現(xiàn)，同時社區(qū)感染這種發(fā)現(xiàn)。,,產(chǎn)NDM1細菌的發(fā)現(xiàn),2019年在一位印度裔瑞典尿路感染患者中發(fā)現(xiàn)對碳青霉烯耐藥肺炎克雷伯菌，該菌對所有Β內酰胺類抗菌藥物耐藥，對環(huán)丙沙星也不敏感，僅對多粘菌素E敏感；該患者有多年糖尿病和中風史，經(jīng)常往返于印度和瑞典之間，此前4月曾因臀部膿腫在印度住院治療，其后回到瑞典，因尿路感染再度入院；這株細菌攜帶一種新型金屬Β內酰胺酶，研究人員根據(jù)患者感染地命名這種酶為NDM1。,,南亞和英國流行情況,THELANCET/INFECTIONPUBLISHEDONLINEAUGUST11,2019DOI101016/S1473309910701432,產(chǎn)NDM1細菌種類,,傳播方式,醫(yī)院內感染污染的醫(yī)療器械污染的醫(yī)療用品污染的手跨國傳播跨國醫(yī)療旅游,,,,產(chǎn)NDM1細菌感染臨床特點,產(chǎn)NDM1細菌主要表現(xiàn)為多重耐藥，致病力與敏感細菌沒有差別；主要引起醫(yī)院感染；有社區(qū)感染報道；感染危險因素危重患者，入住ICU；長期住院患者；使用廣譜抗菌藥物，或長期應用抗菌藥物；插管或侵襲性操作；免疫抑制；呼吸機應用,產(chǎn)NDM1細菌感染臨床特點,主要感染類型泌尿道感染；傷口感染；醫(yī)院肺炎；呼吸機相關肺炎；血流感染；導管相關感染；感染表現(xiàn)沒有特別之處。碳青霉烯治療感染無效，提示該類細菌感染可能，需要及時進行檢查。,,實驗室診斷,產(chǎn)NDM1細菌感染臨床表現(xiàn)與敏感菌沒有差異，臨床診斷困難；對碳青霉烯治療無效的陰性菌感染需要考慮這類細菌感染可能；診斷主要依據(jù)實驗室檢查結果；實驗室檢查分為三步表型篩查表型確認基因確證,產(chǎn)NDM1細菌表型篩查,美羅培南或亞胺培南紙片法（KB法，10ΜG紙片）或最低抑菌濃度（MIC）測定法對腸桿菌科細菌進行初步篩查，達到以下標準，需進行表型確認。KB法美羅培南或亞胺培南抑菌圈直徑≤22MM。MIC測定法美羅培南MIC≥2MG/L；或亞胺培南對大腸埃希菌、克雷伯菌屬、沙門菌屬和腸桿菌屬MIC≥2MG/L。,亞胺培南,美羅培南,亞胺培南,美羅培南,產(chǎn)NDM1細菌表型確認,雙紙片協(xié)同試驗采用亞胺培南10ΜG、EDTA（1500ΜG）兩種紙片進行KB法，兩紙片距離1015MM，在含EDTA紙片方向處，亞胺培南抑菌圈擴大，即可判定產(chǎn)金屬酶。,產(chǎn)NDM1細菌表型確認,采用亞胺培南（美羅培南）/EDTA復合紙片進行KB法藥敏試驗，復合紙片比單藥紙片的抑菌圈直徑增大值≥5MM；亞胺培南（美羅培南）/EDTA復合E試條協(xié)同試驗測定MIC，單藥與復合制劑的MIC比值≥8即可判定產(chǎn)金屬酶。,產(chǎn)NDM1細菌基因確證,采用NDM1的基因特異引物進行PCR擴增及產(chǎn)物測序。,,PCR,測序,各醫(yī)院對陽性結果須加以復核，同時菌株送有條件參考實驗室進一步檢測確證。,1加強對產(chǎn)NDM1細菌監(jiān)測,醫(yī)院重視臨床微生物檢驗，提高細菌耐藥監(jiān)測能力；臨床參考細菌檢驗結果應用抗菌藥物；定期公布各醫(yī)院細菌耐藥監(jiān)測結果；定期回顧細菌耐藥流行趨勢，及時發(fā)現(xiàn)異常耐藥現(xiàn)象，早期發(fā)現(xiàn)產(chǎn)NDM1細菌加以控制。,2加強抗菌藥物合理使用監(jiān)管,醫(yī)療機構應當有專門抗菌藥物合理使用管理小組，開展教育、培訓、監(jiān)督、檢查抗菌藥物使用情況；嚴格執(zhí)行相關管理規(guī)定，特別是抗菌藥物分類管理規(guī)定。特殊使用抗菌藥物衛(wèi)生部衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)200938號第四代頭孢菌素頭孢吡肟、頭孢匹羅、頭孢噻利等；碳青霉烯類抗菌藥物亞胺培南/西司他丁、美羅培南、帕尼培南/倍他米隆、比阿培南等；多肽類與其他抗菌藥物萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺等；抗真菌藥物卡泊芬凈，米卡芬凈，伊曲康唑（口服液、注射劑），伏立康唑（口服劑、注射劑），兩性霉素B含脂制劑等。,3加強醫(yī)院感染的預防與控制,加強醫(yī)務人員感染控制教育、培訓，強化對NDM1細菌等多重耐藥菌感染的預防、控制的認識。在進行各種侵襲性操作中，嚴格執(zhí)行無菌操作。,,嚴格執(zhí)行醫(yī)務人員手衛(wèi)生規(guī)范醫(yī)療機構必須提供充足的手衛(wèi)生設施。醫(yī)務人員在接觸病人前后、進行侵入性操作前、接觸病人使用的物品或處理其分泌物、排泄物后，必須洗手或用含醇類速干手消毒劑擦手。,3加強醫(yī)院感染的預防與控制,3加強醫(yī)院感染的預防與控制,加強對重點部門尤其是ICU物體表面的清潔、消毒。消毒劑含氯消毒劑、05過氧乙酸、2戊二醛、05醋酸環(huán)己啶乙醇等；表面消毒方法選擇不同消毒液擦拭或浸泡。,,3加強醫(yī)院感染的預防與控制,隔離疑似或確診產(chǎn)NDM1細菌感染或定植者，預防耐藥菌傳播。采用接觸隔離，將病人安置單獨房間，接觸患者時需要穿隔離衣、戴手套，相關醫(yī)療器械或物品如聽診器、血壓計等專用，不能專用的物品，需用后嚴格消毒。隔離期間需要定期檢測耐藥菌情況。,,二、原有微生物的再發(fā),病毒性疾病狂犬病、登革熱、黃熱病寄生蟲瘧疾、血吸蟲病、神經(jīng)囊尾幼病、棘阿米巴病、內臟利氏曼病、弓形蟲病、賈第蟲病、棘球幼病細菌性A群鏈球菌、戰(zhàn)壕熱、鼠疫、白喉、結核、百日咳、沙門菌屬、肺炎球菌、霍亂、多重耐藥菌株的流行,,多重耐藥菌株的流行,葡萄球菌腸球菌肺炎鏈球菌腸桿菌科結核分支桿菌,,多重耐藥的結核桿菌,是指病人排出的TB至少已對INH和RFP產(chǎn)生耐藥或對5種基本抗癆藥物（INH、RFP、鏈霉素、乙胺丁醇、砒嗪酰胺）中的兩種以上（包括兩種）耐藥者發(fā)生原因單一化療、不合理化療、不規(guī)律化療對策合理化療，預防MTB出現(xiàn)加強檢測，及時檢出MTB約有75的臨床分離株存在RNA聚合酶Β亞單位基因RPOB發(fā)生突變，對RFP耐藥,,腸桿菌科,對三代頭孢菌素耐藥的腸桿菌科在臨床大量出現(xiàn)主要耐藥機制產(chǎn)生超廣譜Β內酰胺酶EXTENDSPECTRUMΒLACTAMASES,ESBLS持續(xù)產(chǎn)Ⅰ型Β內酰胺酶,腸球菌,可引起多種臨床感染對頭孢菌素、林可霉素、磺胺類呈現(xiàn)天然耐藥,對氨基糖甙類部分天然耐藥現(xiàn)已出現(xiàn)耐萬古霉素的腸球菌VRE,耐萬古霉素的腸球菌VRE,由VANA,VANB和VANC控制VANA對萬古霉素和替考拉寧高度耐藥VANB對萬古霉素高度耐藥,對替考拉寧敏感VANC對萬古霉素和替考拉寧高度耐藥選用氯霉素紅霉素四環(huán)素及利福平或其它藥物,葡萄球菌,對甲氧西林耐藥的葡萄球菌對萬古霉素中度敏感的葡萄球菌對萬古霉素耐藥的葡萄球菌,,對甲氧西林耐藥的葡萄球菌,由MECA基因編碼的PBP2A與現(xiàn)有的Β內酰胺類抗生素親和力極低常伴有大內環(huán)酯類、林可霉素類和其它抗生素的多重耐藥常呈異質性表達萬古霉素是唯一有確切療效的藥物凝固酶陽性和陰性的葡萄球菌均有較高的發(fā)生率,,MRSA的調控機制,調控基因MECI,MECRIMECI為阻遏基因，其編碼產(chǎn)物為MECI蛋白，為MECA基因的抑制子（REPRESSORMECRI為誘導劑激活基因，在誘導劑存在時編碼MECRI蛋白，是一種輔助誘導因子（COINDUCER,解除對MECI蛋白對MECA基因的抑制,,對萬古霉素中度敏感的葡萄球菌（VISAORGISA,對萬古霉素的MIC在816UG/ML已有數(shù)起報道、主要發(fā)生在MRS中測定困難異源性表達、生長緩慢、常規(guī)方法不能識別（KB法、MICROSCANRAPIDPLATEVITEK舊版軟件不能測定（只能測到4UG/ML萬古霉素），新版能測定,,三、自動化技術在微生物學檢驗中的應用,數(shù)碼及數(shù)值鑒定技術常見的鑒定系統(tǒng),常見的鑒定系統(tǒng),VITEKAMS系統(tǒng)ＭICROSCAN系統(tǒng)BDBDPHOENIXSYSTEMBBL?CRYSTAL?半自動細菌鑒定系統(tǒng)BBL?CRYSTAL?AUTOREADER自動細菌鑒定系統(tǒng),,使用自動化鑒定儀的局限性,所有實驗室工作人員必須認識儀器的局限性。細菌的分類系統(tǒng)隨著人們對細菌本質認識的加深而不斷演變，及時補充和修改數(shù)據(jù)庫是自動化鑒定儀生存的根本要加強對自動化儀器的日常維護和質控自動化鑒定儀得出的結果，必須要與其它已獲得的生物性狀（如標本來源、菌落特征及其它的生理生化特征）進行核對，以避免錯誤的鑒定。,,四、分子生物學在微生物檢驗應用,核酸雜交生物芯片）核酸擴增技術①靶擴增系統(tǒng)，包括PCR、TMA、SDA；②探針擴增系統(tǒng)，包括QBETA復制酶、LCR；③標記擴增技術。④多重PCR，RTPCR，NESTPCR，RAPD,PCRSSCP等技術,,細菌鑒定及分類,分子生物學耐藥性檢測,耐藥基因的檢測糖肽類VANA，VANB，VANB2,VANC1，VANC3，VAND。Β內酰胺類MECA，BLATEM，BLAROB1，BLASHV，BLAIMP，BLAMIR1，BLAOXA，BLAPER1，BLAPER2，BLAOXY1，BLAOXA10/11喹諾酮類GYRA，GYRB，PARE乙胺丁醇EMBB，吡嗪酰胺PNCA。利福平RPOB。鏈霉素RPSL，RRS。異煙肼KATG，INHA，AHPC,,應用基因技術進行分型和鑒定,菌種鑒定菌株分型研究其親緣關系復發(fā)和再感染判斷分析不同種屬間的差別揭示種內不同菌株間的細微差異彌補了表型分型的不足多用于分子流行病學研究,這些技術包括RAPDRFLPAFLPSSCPPFGEDNASEQUENCE,細菌種屬的鑒定,DNA堿基組成的測定,DNADNA雜交,16SRRNA同源性分析,細菌種屬特異基因,細菌毒力基因,,,DNA堿基組成的測定,細菌間DNA分子同源程度可以用細菌DNA分子的GC或AT摩爾百分比來反映。親源關系越近的細菌，GCMOL越相近GCMOL含量不同的細菌，為不同種細菌含量相同的可能為不同種的細菌不同菌屬間GCMOL范圍在2575之間。細菌的GCMOL相當穩(wěn)定，不受培養(yǎng)條件、菌齡和其他外界因素影響。最常用的方法是熱變性法，其次是高效液相色譜法和浮力密度法,DNADNA雜交,DNA雜交可得出DNA之間核苷酸順序的互補程度，從而推斷不同細菌基因組間的同源性。目前最常用的是復性速率法同一菌的復性率為1008090的同源為同一種內同一亞種的細菌6070同源性為同一種內不同亞種的細菌2060同源則是同一屬中的不同菌種這種方法還可對新菌種或表型性狀差別很小而難以肯定的菌株做出較可靠的判定，并可修正其他方法的分類和鑒定錯誤,16SRRNA同源性分析,RRNADNA雜交變性RRNA與變性DNA混合時，RRNA與其互補的DNA鏈形成雜交雙鏈，RRNA分子與異源DNA雜交時，也能在其同源區(qū)形成互補雙鏈，這種雜交雙鏈的穩(wěn)定性與其同源性成正相關，適于細菌屬及屬上水平的分類研究。現(xiàn)最常用的是硝酸纖維膜結合法16SRRNA序列測定RRNA分子具有高度保守性，在所有的細胞生物中都存在，在長期的進化中，16SRRNA的總堿基數(shù)有所不同，保守的部分使不同序列很容易相互對齊進行比較,16S23SRRNA序列測定,在16S和23SRRNA的間隔區(qū)，各菌種的長度是不一樣的，利用包含16S和23SRRNA部分序列的引物對間隔區(qū)進行擴增，分析其長度多態(tài)，或結合RFLP技術進行分析來鑒定菌種此外限制性內切酶長度多態(tài)性分析（RFLP）、脈沖場凝膠電泳（PFGE）、隨機引物擴增法（RAPD）等技術常用于菌株間的差異比較,細菌種屬特異基因,某些基因為細菌種特有或屬共有，通過對這些基因的檢測可以鑒定細菌的種或屬如編碼吸附和侵襲上皮細胞表面蛋白的INV基因INVA、INVB、INVC、INVD、INVE等是一組只存在于致病性沙門菌中的獨特的保守基因序列。鞭毛蛋白DLH基因通常只存在于傷寒沙門菌IS6110、IS986插入片段為結核分枝桿菌復合群所擁有等,細菌毒力基因,某些以毒素致病的細菌含有特定的毒力基因霍亂弧菌的霍亂毒素基因產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌的耐熱（ST）和不耐熱腸毒素（LT）白喉棒狀桿菌的外毒素基因可以應用以上技術測定毒力基因的存在，以示相應的細菌存在,五、病毒變異的臨床意義,病毒突變體的起源,某些病毒的基因突變率可高達103～104（例如逆轉錄病毒HIV），而有些病毒突變率僅為108～1011（如皰疹病毒），相當于細胞DNA的自發(fā)突變率。大多數(shù)RNA病毒的突變率要遠遠高于DNA病毒誘發(fā)突變突變具有雙重作用，病毒突變可使其抗原性發(fā)生改變,從而逃逸免疫應答，但大多數(shù)突變是有害的，并會產(chǎn)生許多缺陷顆粒人工突變現(xiàn)代分子生物學技術可以對病毒基因組進行突變，如直接誘發(fā)寡核苷酸突變和基于PCR的基因突變技術已得到廣泛應用?，F(xiàn)在結合酶消化技術（引起基因缺失）和接頭掃描技術（形成基因插入），可以在病毒基因組的任何特異性位點，準確安全地誘導出幾乎任何類型的突變。這類突變可成為人工突變。,病毒突變的類型,生化標志物基因突變耐藥基因突變，導致病毒毒力改變的特異突變；形成多態(tài)性，使蛋白質和核酸電泳遷移率發(fā)生改變以及對滅活劑的敏感性改變。缺失突變在某些方面與無義突變相似，但可以是一個或多個病毒基因缺失，也可以是基因組中非編碼調控區(qū)（如啟動子等）的缺失。自發(fā)缺失突變體通?？稍诓《救后w中累積，生成大量缺陷干擾（DI）顆粒。盡管這些顆粒不具有感染性，但仍有一定的遺傳學上的意義，有人認為它們在某些病毒感染過程中以及發(fā)病機理方面起著重要作用。通過重組，可以使基因缺失病毒回復突變?yōu)橐吧筒《?，但發(fā)生頻率通常比較低。,肝炎病毒的變異及基因分型概述,HAV為小RNA病毒科成員，現(xiàn)已被歸入嗜肝RNA病毒科。人源HAV存在4個基因型（ⅠⅣ型），型間核苷酸同源性85不同基因型的HAV抗原性相同，因此，HAV只有一個血清型HBV為嗜肝DNA病毒科成員，可分為6個基因型（基因型AF）,不同地域、人種的HBV基因型可能有著不同的分布?；蛐偷牟町惻c致病性、抗病毒治療效果、預后等的關系尚無明確結論，尚待進一步研究,肝炎病毒的變異及基因分型概述,HDV是一種RNA缺陷病毒現(xiàn)被歸類于衛(wèi)星病毒科成員。世界各地HDV不同分離株的核苷酸變異在11～17之間。HDV可分為3個基因型，大部分分離株為Ⅰ型，Ⅱ型和Ⅲ型分別在日本和南美多見。HCV為黃病毒科成員，該病毒變異較大，目前至少存在6個以上的基因型。HCV的基因型與致病、預后、干擾素的治療等密切相關，需引起高度重視。HEV為環(huán)狀病毒科成員，感染后導致急性肝炎，臨床表現(xiàn)和發(fā)病經(jīng)過與甲型肝炎有一定差異，比如妊娠婦女感染的死亡率較高；發(fā)病者年齡分布不明顯；更容易發(fā)生瘀膽；重型肝炎的發(fā)生率高于甲肝；患病后無終身免疫等等。世界各地的HEV分離株可分為2個基因型，即緬甸型和墨西哥型，我國、東南亞各國及印度流行的為緬甸型。,HBV生物學特性,不完全閉合環(huán)狀雙鏈DNAS、C、P和X4個ORFSS基因C基因P基因X基因,S基因區(qū)變異,S基因區(qū)包括前S1、前S2及S基因，分別編碼前S1蛋白、前S2蛋白及主蛋白前S1蛋白能調節(jié)HBSAG的分泌；它的第21～47AA是HBV與靶細胞上特異受體結合的主要部位，但第3～77AA均參與HBV感染靶細胞的過程前S2蛋白N末端的5個AA是自被感染細胞內分泌完整病毒顆粒所必需的。前S1起始碼下游第230堿基，可突變形成終止碼，并影響前S2起始碼，這種突變與HBV逃避干擾素治療和宿主免疫清除有關HBVDNA第29953177NT位于前S開放讀碼框ORF內，但其缺失可削弱前S的免疫性，但仍能保留與肝細胞的結合位點，有利于HBV逃避機體的免疫攻擊，形成慢性攜帶狀態(tài)。,S基因區(qū)變異,HBSAG第99169AA是誘導中和抗體產(chǎn)生的決定簇。124137AA和138L47AA，特別是第142，L44，145AA三處突變，包括典型的“疫苗逃避株”145甘氨酸→精氨酸。這些突變可削弱或改變HBSAG的免疫原性，降低HBSAG被HBIG識別的能力；這些突變可能是長期免疫壓力篩選的結果。,P基因區(qū)變異,P基因區(qū)編碼HBVDNA聚合酶DNAP，其自然突變率與逆轉錄病毒GAG基因相近，每年約為2104堿基／位點抗HBV藥物胞苷類似物拉咪呋啶1AMIVUDINE和鳥苷類似物泛昔洛韋FAMCICLOVIR，主要作用于DNAP，通過與底物DNTP競爭結合以抑制HBV的逆轉錄和復制HBV耐藥株的突變就發(fā)生在DNAP基因內。DNAP催化中心由“酪氨酰Y、蛋氨酰M、天冬氨酰D”基序YMDDMOTIF組成，是DNAP發(fā)揮催化活性所必需的關鍵結構。針對核苷類藥物的抗病毒治療，病毒YMDD中M突變?yōu)楫惲涟彼酙或纈氨酸V。發(fā)生突變以后可能使病情加劇（即所謂反跳），對所用藥物產(chǎn)生耐受,S基因區(qū)和P基因區(qū)變異的相互影響,由于S基因區(qū)完全重疊于P基因區(qū)內，特別是HBSAG決定簇區(qū)和DNAP致第454524AA系主要催化活性區(qū)相重疊，因此，與拉咪夫丁等抗病毒藥相關的DNAP的突變至少可致HBSAG中5處AA改變DNAP的突變正好位于HBSAG決定簇區(qū)主要親水區(qū)，提示該處P基因的突變也可導致“中和逃避NEUTRALIZATIONESCAPE”,C基因區(qū)的調控序列,C基因區(qū)中前C和C基因上游的調控序列基本C區(qū)啟動子BASALCOREPROMOTER，BCP可啟動前CMRNA和CMRNA的轉錄核心上游調節(jié)序列COREUPSTREAMREGULATORYSEQUCNCE，CURS能定向調節(jié)BCP的活性負調節(jié)元件NEGATIVEREGULATORYELEMENT,NRE，可抑制或消除CURS的活性,C基因區(qū)調控序列的變異,C基因區(qū)調控序列均可發(fā)生變異，其中最重要和最常見的突變是BCP中的1762NTA→T，L764

簡介：大量管理資料下載第1章緒論本章的學習目的與要求掌握微生物的概念和生物學特征，及其在生物分類中的地位；了解微生物學和其主要分支學科，微生物學的形成與發(fā)展，以及食品微生物學研究的內容與任務。1微生物的概念及其在生物分類中的地位11微生物的概念微生物（MICROGANISMMICROBE）一詞并非生物分類學上的專門名詞，而是指大量的、極其多樣的、不借助顯微鏡看不見的微小生物類群的總稱。因此，微生物通常包括病毒、細菌、真菌、原生動物和某些藻類，它們的大小和特征見表11。表11微生物形態(tài)、大小和細胞類型微生物大小近似值細胞特征病毒001～025ΜM非細胞的細菌01～10ΜM原核生物真菌2ΜM～1M真核生物原生動物2～1000ΜM真核生物藻類1ΜM～幾米真核生物但是有些例外。如許多真菌子實體、蘑菇等常肉眼可見；相同的，某些藻類能生長幾米長。一般來說，微生物可以認為是相當簡單的生物，大多數(shù)的細菌、原生動物、某些藻類和真菌是單細胞的微生物，即使為多細胞的微生物，也沒有許多的細胞類型。病毒甚至沒有細胞，只有蛋白質外殼包圍著的遺傳物質，且不能獨立生活。12微生物在生物分類中的地位在生物發(fā)展的歷史上，曾把所有的生物分為動物界和植物界兩大類。而微生物，不僅形體微小、結構簡單，而且它們中間有些類型像動物，有些類型像植物，還有些類型既有動物的某些特征，又具有植物的某些特征，因而歸于動物或植物都不合適。于是，1866年海克爾（HAECKEL）提出區(qū)別動物界與植物界的第三界原生生物界。它包括藻類、原生動物、真菌和細菌。隨著科學的發(fā)展，新技術和研究方法的應用，尤其是電子顯微鏡和超顯微結構研究技術的應用，發(fā)現(xiàn)了生物的細胞核有兩種類型，一種是沒有真正的核結構，稱為原核，其細胞不具核膜，只有一團裸露的核物質；另一種是由核膜、核仁及染色體組成的真正的核結構稱為真核。動物界、植物界及原生生物界中的大部分藻類、原生動物和真菌是真大量管理資料下載氏菌，簡稱大腸桿菌，其細胞在合適的生存條件下，每分裂一次的時間是125～200分。如按20分鐘分裂一次計，則每小時分裂3次，每晝夜可分裂72次，后代數(shù)為4722366500萬億個（重約4722噸），48小時為221043（約等于4000個地球之重）。事實上，由于種種客觀條件的限制，細菌的指數(shù)分裂速度只能維持數(shù)小時，因而在液體培養(yǎng)中，細菌的濃度一般僅能達到每毫升108～109個左右。微生物的這一特性在發(fā)酵工業(yè)上具有重要的實踐意義，主要體現(xiàn)在它的生產(chǎn)效率高、發(fā)酵周期短上。而且大多數(shù)微生物都能在常溫常壓下，利用簡單的營養(yǎng)物質生長，并在生長過程中積累代謝產(chǎn)物，不受季節(jié)限制，可因地制宜、就地取材，這就為開發(fā)微生物資源提供了有利的條件。如生產(chǎn)用做發(fā)面鮮酵母的SACMYCESCEREVISIAE釀酒酵母，其繁殖速度不算太高（2小時分裂1次），但在單罐發(fā)酵時，幾乎每12小時即可收獲1次，每年可“收獲”數(shù)百次。這是其他任何農(nóng)作物所不能達到的“復種指數(shù)”。這對緩和人類面臨的人口增長與食物供應矛盾也有著重大意義。另外微生物繁殖速度快的生物學特性對生物學基本理論的研究也帶來了極大的優(yōu)越性它使科學研究周期大大縮短、經(jīng)費減少、效率提高。當然對于危害人、畜和植物等的病原微生物或使物品發(fā)生霉腐的霉腐微生物來說，它們的這個特性就會給人類帶來極大的麻煩甚至嚴重的禍害。因而需要認真對待。23種類多、分布廣微生物在自然界是一個十分龐雜的生物類群。迄今為止，我們所知道的微生物約有10萬種。它們具有各種生活方式和營養(yǎng)類型，它們中大多數(shù)是以有機物為營養(yǎng)物質，還有些是寄生類型。如微生物的生理代謝類型之多，是動、植物所不及的。分解地球上貯量最豐富的初級有機物天然氣、石油、纖維素、木質素的能力，屬微生物專有；微生物有著多種產(chǎn)能方式，如細菌光合作用、嗜鹽菌紫膜的光合作用、自養(yǎng)細菌的化能合成作用、各種厭氧產(chǎn)能途徑；生物固氮作用；合成各種復雜有機物次生代謝產(chǎn)物的能力；對復雜有機物分子的生物轉化能力；分解氰、酚、多氯聯(lián)苯等有毒物質的能力；抵抗熱、冷、酸、堿、高滲、高壓、高輻射劑量等極端環(huán)境能力；以及獨特的繁殖方式病毒的復制增殖，等等。不同微生物可以有不同的代謝產(chǎn)物，如抗生素、酶類、氨基酸及有機酸等，還可以通過微生物的活動防止公害。自然界的物質循環(huán)是由各種微生物參與才得以完成的。微生物在自然界的分布極為廣泛，土壤、水域、大氣，幾乎到處都有微生物的存在，特別是土壤是微生物的大本營。任意取一把土或一粒土，就是一個微生物世界，其中含有不同種類的微生物。可以這樣說，凡是有高等生物存在的地方，就有微生物存在，即使

簡介：普通昆蟲學結課論文班級植保09班姓名符澤學號2009123475是說昆蟲的受精卵排出體外后尚需經(jīng)過一定時間才能發(fā)育成新個體，這是絕大多數(shù)昆蟲的生殖方法。胎生是指雌蟲產(chǎn)出的后代個體蟲態(tài)是幼體，也就是說昆蟲的受精卵在母體內即行孵化成為幼體，爾后脫離母體繼續(xù)生長發(fā)育。孤雌生殖（PARTHENOGENESIS）也叫單性生殖或處女生殖，是少數(shù)昆蟲具有的生殖方法，其特點是卵不經(jīng)過受精也能正常發(fā)育成新個體。目前除蜻蜓目、革翅目、脈翅目和蚤目外，其它類群的昆蟲都發(fā)現(xiàn)有孤雌生殖。多胚生殖是指一粒卵產(chǎn)生兩個或兩個以上的個體，這種現(xiàn)象僅見于膜翅目的姬蜂科、小蜂科、跳小蜂科、細蜂科、緣腹細蜂科和螯蜂科以及捻翅目等極少數(shù)寄生性種類中。胎生是指雌蟲產(chǎn)出的后代個體蟲態(tài)是幼體，也就是說昆蟲的受精卵在母體內即行孵化成為幼體，爾后脫離母體繼續(xù)生長發(fā)育。根據(jù)幼蟲離開母體前的營養(yǎng)方式，胎生又分4類，即卵胎生、腺養(yǎng)胎生、偽胎盤胎生和血腔胎生等。二昆蟲生殖方式的進化及生物學意義二昆蟲生殖方式的進化及生物學意義從生物學來看，有性生殖和無性生殖的目的不同，無性生殖是為了在短時間內能夠迅速增加種群的數(shù)量；有性生殖主要是為了增加基因型以增加其在未來的生存機會。而有性生殖與無性生殖的利與弊，是要看環(huán)境來決定，如果是在穩(wěn)定的環(huán)境，那無性生殖可快速繁衍后代；如果是在不穩(wěn)定的環(huán)境，則有性生殖可產(chǎn)生遺傳變異，造成基因多樣性，使生物有更大的機會繁衍下去，而不致滅絕。無

簡介：細胞生物學實驗報告細胞生物學實驗報告掃描電子顯微鏡生物樣品制備與觀察姓名學號班級專業(yè)同組成員2、掃描電鏡的基本組成和成像過程掃描電鏡成像系統(tǒng)的基本組成由圖11所示。電子槍、聚光鏡和物鏡等組成掃描電鏡的電子光學系統(tǒng)。電子槍發(fā)射的電子經(jīng)聚光鏡和物鏡的會聚作用形成極細的電子束入射樣品。在掃描偏轉線圈的控制下，入射電子束在樣品表面做光柵狀掃描。掃射過程中產(chǎn)生的二次電子由光電倍增管檢測，該信號經(jīng)視頻放大器放大后輸入觀察顯示器的柵極以調制其亮度。由于入射電子束與觀察顯示器的掃描偏轉線圈均由同一掃描信號發(fā)生器控制，所以兩者掃描同步。當入射電子束對樣品某區(qū)域掃描時，在顯示器上可以觀察到該區(qū)域的二次電子像。像點的亮度與樣品物點上所產(chǎn)生的二次電子信號強度相關。當來自物點的二次電子信號強時，對應的像亮點；反之則暗。3、掃描電子顯微鏡的技術指標分辨率、加速電壓和放大倍數(shù)是掃描電鏡的基本技術參數(shù)。掃描電鏡的分辨率通常指二次電子像分辨率，該分辨率與入射電子束斑直徑有關。配備熱發(fā)射電子槍的掃描電鏡分辨率約為3NM，而高分辨率場發(fā)射掃描電鏡的分辨率在1NM左右。掃描電鏡加速電壓范圍約為120KV。掃描電鏡的放大倍數(shù)由觀察顯示器的尺寸與入射電子束在樣品掃描區(qū)域尺寸之間的比值決定。通過改變入射電子束掃描區(qū)域的大小，可以提高或降低放大倍數(shù)，其范圍為數(shù)十倍至數(shù)十萬倍。4、二次電子像的襯度機制二次電子的產(chǎn)率Η定義為二次電子數(shù)與入射電子數(shù)之間的比值，并且Η∝1／COSΘ，Θ為入射電子束與樣品表面法線之間的夾角。由于樣品表面不是平整的，各點的Θ值與Η值不同，即樣品表面各點的二次電子信號強度不同。因此二次電子像的襯度反應樣品表面幾何形貌。此外，由于入射電子束孔徑角很小，二次電子像還具有景深大，立體感強的特點。

簡介：食品微生物學檢驗食品微生物學檢驗GB4789系列知識點匯總系列知識點匯總GB478912016食品衛(wèi)生學檢驗食品衛(wèi)生學檢驗總則總則一、2016版總則變更內容1刪除了標準中的英文名稱、起草單位變更為中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會國家食品藥品監(jiān)督管理總局。2刪除了規(guī)范性引用文件。3修改了實驗室基本要求應具有相應的微生物專業(yè)教育或培訓經(jīng)歷（如生物學、植物學、醫(yī)學、食品科學與工程、食品質量與安全等與微生物有關的相關專業(yè)），具備相應的資質（應有崗位上崗證、生物安全上崗證和壓力容器上崗證），能夠理解并正確實施檢驗。①人員修改為檢驗人員應掌握實驗室生物安全操作和消毒知識（相關標準及培訓，如GB194892008實驗室生物安全通用要求、消毒技術規(guī)范（2002））。應在檢驗過程中保持個人整潔與衛(wèi)生，防止人為污染樣品。應在檢驗過程中遵守相關安全措施的規(guī)定，確保自身安全。有顏色視覺障礙的人員不能從事涉及辨色消毒是殺死微生物的物理或化學手段，但不一定殺死其中的孢子。滅菌是殺死和去除所有微生物及其中孢子的過程。紫外線消毒（臭氧）環(huán)境潔凈室消毒空間熏蒸（如空間被霉菌污染可用甲醛熏蒸法消毒）消毒劑表面消毒微生物實驗濕熱滅菌或常用室消毒滅菌方式平皿工器具滅菌和設備消毒高壓滅菌干熱滅菌（180℃1H或170℃2H）濕熱滅菌或高壓滅菌培養(yǎng)基和試劑滅菌煮沸滅菌過濾除菌紫外線消毒法紫外燈管放射一定波長，破壞細菌或病毒的DNA和RNA，使他們喪失生存能力和繁殖能力，從而達到滅菌目的。紫外線的特點是對芽孢和營養(yǎng)細胞都能起作用，但細菌芽孢和霉菌芽孢

簡介：進化生物學課后習題1241第一章第一章緒論緒論習題習題一、名詞解釋一、名詞解釋1、生物進化論、生物進化論生物進化論是研究生物界進化發(fā)展的規(guī)律以及如何運用這些規(guī)律的科學。主要研究對象是生物界的系統(tǒng)發(fā)展，也包括某一物種2、進化生物學、進化生物學是研究生物進化的科學，不僅研究進化的過程，更重要的是研究進化的原因、機制、速率和方向。（研究生物進化的科學，包括進化的過程、證據(jù)、原因、規(guī)律、演說以及生物工程進化與地球的關系等。）3、災變論、災變論認為地球在不同時期，不同地點發(fā)生了巨大的“災難”，毀滅了當時的動植物，以后由其他地方遷來的新的類型，所以不同地層有不同化石的類型。（多次創(chuàng)造，每次均不同。認為生物的改變是突然發(fā)生的，是整體地消滅和整體地重新被創(chuàng)造的。反對一個物種從另一個物種演變而來的思想。）4、中性突變、中性突變中性突變是指不影響蛋白質功能的突變，也即既無利也無害的突變，如同工突變和同義突變。5、進化、進化進化指事物由低級的、簡單的形式向高級的、復雜的形式轉變過程。廣義進化是指事物的變化與發(fā)展。涵蓋了天體的消長，生物的進化，以及人類的出現(xiàn)和社會的發(fā)展。6、生物進化、生物進化生物進化就是生物在與其生存環(huán)境相互作用的過程中，其遺傳系統(tǒng)隨時間而發(fā)生一系列不可逆的改變，并導致相應的表型改變，在大多數(shù)情況下這種改變導致生物總體對其生存環(huán)境的相對適應。7、神創(chuàng)論、神創(chuàng)論（物種不變論）地球上的生物，都是上帝按照一定計劃和一定目的，一下子創(chuàng)造出來的。并且當初創(chuàng)造后物種沒有實質性的變化，物種數(shù)也無增減，各種之間也無親緣關系。在18世紀的歐洲占統(tǒng)治地位二、進化生物學研究的對象是什么二、進化生物學研究的對象是什么進化生物學是研究生物進化的科學，不僅研究進化的過程，更重要的是研究進化的原因、機制、速率和方向，也就是說進化生物學是回答“為什么”的科學，是追究實物或過程的因果關系的科學。它不僅要從生物組織不同層次揭示進化的原因，也要從時間上追溯進化的過程。三、比較拉馬克學說和達爾文學說的異同。三、比較拉馬克學說和達爾文學說的異同。相同點相同點1二者均認為物種是可變的，而是在自然界里，在環(huán)境的影響下，發(fā)生變異，并且從一種生物類型變?yōu)榱硪环N生物類型。2二者均主張生物的進化史漸進的。不同點不同點1達爾文進化論的一個重要方面是他主張物種演變和共同起源，他認為地球上現(xiàn)今生存的物種都是曾經(jīng)生存的物種的后代，溯源于共同的祖先。共同起源是生物進化一元論的觀點，而拉馬克則是認為最原始的生物源于自然發(fā)生，各系統(tǒng)或群體生物并不起源于共同祖先，是典型的生物進化多元論的觀點。2二者對適應起源看法比不同。按照拉馬克看法，用進廢退或獲得性遺傳是一步適應，也稱直接適應，即變異是定向的，“變異＝適應”。按照達爾文的看法，適應是兩步適應，也稱間接適應，第一步是變異的產(chǎn)生，第二步是通過生存斗爭的選擇，即變異是不定項的，“變異≠適應”。3、拉馬克學說是在同災變論的斗爭中創(chuàng)立的，達爾文學說是在同神創(chuàng)論的斗爭中創(chuàng)立的。四、簡述現(xiàn)代綜合進化論的主要內容。四、簡述現(xiàn)代綜合進化論的主要內容?，F(xiàn)代綜合進化論的主要內容有以下幾個方面第一，認為自然選擇決定進化的方向，使生物向著適應環(huán)境的方向發(fā)展。主張兩步適應即變異經(jīng)過選擇的考驗才能形成適應。第二，認為種群是生物進化的基本單位，進化機制的研究屬于群體遺傳學的范疇。第三，認為突變、選擇、隔離是物種形成和生物進化的機制。五、你認為中性突變進化學說是對達爾文學說的否定嗎為什么五、你認為中性突變進化學說是對達爾文學說的否定嗎為什么否。因為達爾文注意到了變異的有害性和有利性，而中性突變進化學說注意到的是既無利也無害的所謂中性突變，應該說是從不同角度，不同層次看問題的結果，使達爾文學說得到了補充和發(fā)展。且中性說是始終以分子水平的結構來提問題的，而達爾文學說是從表型水平來說的，二者并不相矛盾。六、談談你對進化生物學發(fā)展新方向的見解（六、談談你對進化生物學發(fā)展新方向的見解（P15P15進化生物學課后習題3243身的多分子體系。生物體是一個開放系統(tǒng)，不斷地與環(huán)境進行著物質和能量的交換，不斷地從環(huán)境吸取負熵，用以克服自身還活著的時候不得不產(chǎn)生的全部的熵，是一個遠離平衡態(tài)的有序結構。三、生物體新陳代謝的特點是什么三、生物體新陳代謝的特點是什么生命活動的基本特征自我更新、自我復制、自我調節(jié)、自我突變1、生物體的新陳代謝過程是一個對立統(tǒng)一的過程，是生物體新陳代謝作用自我完成的動力源泉。同化作用于異化作用就是對立的相反過程，又是統(tǒng)一的。這種統(tǒng)一性首先表現(xiàn)為相互依存，即同化作用為異化作用提供了物質基礎，而異化作用為同化作用提供了能量。其次，表現(xiàn)為互相轉化，即同化作用使外界物質轉化為自身物質，而異化作用使自身物質轉化為外界物質，循環(huán)往復，使生物自身的有序性得到維持。第三表現(xiàn)為相互滲透，即在合成作用中包含了分解作用，在分解作用中又有合成作用的存在。2、還表現(xiàn)在生物體與外界環(huán)境調節(jié)的特殊聯(lián)系上。這種聯(lián)系，首先是生物體在生長發(fā)育過程中需要一定的環(huán)境調節(jié)，主動地從周圍環(huán)境中吸取自身所需要的營養(yǎng)物質，體現(xiàn)了主動性和選擇性。其次，這種聯(lián)系也是神物體生存和發(fā)展的必要條件。四、試述四、試述DAYHOFF假說的內容及其合理性。假說的內容及其合理性。內容內容最原始的三體密碼大概是GNC三體密碼。第一次擴展時由GNC擴展為GNY，Y代表C或U兩種嘧啶。第二次擴張時由GNY擴展為RNY，R代表G或A兩種嘌呤。第三次擴展是由RNY擴展為RNN。最后一次擴展是由RNN擴展為NNN。合理性合理性DAYHOFF及其同事認為密碼的進化路線是由GNC→GNY→RNY→RNN→NNN。在這一進化路線中，在GNC和GNY階段，僅第二位堿基才決定氨基酸的種類，實質上相當于單體密碼；在RNY密碼中第一位剪接和第二位堿基共同決定氨基酸種類，因此相當于二體米娜；在RNN和NNN密碼中，三位堿基都不同程度地參與了氨基酸種類的決定，實質上已過渡到真正的三體密碼。所以，DAYHOFF及其同事的密碼進化學說包含了過去的一體、二體、三體學說，是目前最合理的假說。五、試述生物大分子起源研究的最新進展五、試述生物大分子起源研究的最新進展（P35P35）六、米勒模擬早期地球的簡單能源進行的實驗有什么意義六、米勒模擬早期地球的簡單能源進行的實驗有什么意義1、米勒的實驗為生命起源的化學演化提供了實驗依據(jù)。米勒模擬早期地球的條件，采用火花放電，燒瓶中的CH4，NH3，H2，和H2O（水蒸氣），反應一周后得到了11中氨基酸。其中甘氨酸、丙氨酸、天冬氨酸和纈氨酸是普通蛋白質中含量最多的幾種氨基酸）2、開創(chuàng)了通過實驗研究生命起源的新階段。思考題思考題一、生命與非生命的區(qū)別點是怎樣的一、生命與非生命的區(qū)別點是怎樣的生命就其本質而言就是物質的，它是物質存在和運動的一種特殊形式。地球上的所有生物在其化學組成上有其統(tǒng)一性，在結構上表現(xiàn)了高度的有序性，在功能上具有復雜性。作為生命活動的基本特征是自我更新、自我復制、自我調控、自我突變。所以，生命實際上主要是由核酸和蛋白質組成，具有不斷自我更新的能力，以及向多方向發(fā)生突變并可復制自身的多分子體系。生物體是一個開放的系統(tǒng)，不斷地與環(huán)境進行著物質和能量的交換，不斷地從環(huán)境吸取負熵，用以克服自身還活著時不得不產(chǎn)生的全部的熵，是一個遠離平衡態(tài)的結構。三、談談你對生物大分子起源的看法三、談談你對生物大分子起源的看法（P35P35）

簡介：1、被覆上皮的共同特征有哪些根據(jù)上皮細胞的形態(tài)與層次，被覆上皮分哪幾種被覆上皮的共同特征有①細胞多間質少；②上皮細胞呈極性分布；③上皮組織一般無血管；④神經(jīng)末梢豐富。根據(jù)上皮細胞的形態(tài)和層次，被覆上皮分為7種單層扁平上皮；單層立方上皮；單層柱狀上皮；假復層纖毛柱狀上皮；角化復層扁平上皮，非角化復層扁平上皮、變移上皮。2、何謂腺上皮何謂腺根據(jù)分泌物的排出方式不同，腺分幾種機體內以分泌功能為主的上皮稱腺上皮。以腺上皮為主要結構成分的器官稱腺，根據(jù)分泌物的排出方式不同，腺分兩種，即外分泌腺（有管腺），內分泌腺（無管腺）。結締組織由細胞和細胞音質構成。結締組織中有膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維三種纖維。2、固有結締組織可分為疏松結締組織致密結締組織、脂肪組織和網(wǎng)狀組織四種，其中疏松結締組織分布最為廣泛。3、疏松結締組織中最常見的細胞是成纖維細胞，它能合成基質和纖維兩種成分。4、巨噬細胞具有趨化性、吞噬作用、抗原遞呈作用和分泌功能等功能。5、能產(chǎn)生并釋放肝素、組織胺等化學物質的結締組織細胞是肥大細胞。6、能合成并分泌抗體的結締組織細胞是漿細胞。7、根據(jù)基質中的纖維成分不同，軟骨可分成透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種。8、長骨干的密質骨計有外環(huán)骨板、內環(huán)骨板、骨單位和間骨板四種骨板。9、血液是一種流動的結締組織，由血漿和血細胞組成。10、血漿與血清的主要區(qū)別在于血清中無纖維蛋白原。11、根據(jù)細胞質中有無特殊顆粒，WBC可分為有粒白細胞和無粒白細胞兩種。12、有粒WBC根據(jù)特殊顆粒染色特點可分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞三種。1、肌組織由肌細胞和少量疏松結締組織構成，根據(jù)結構與功能可分為骨骼肌、心肌和平滑肌、三種。2、一個肌節(jié)有粗、細兩種肌絲，H帶兩端的A帶有粗、細肌絲，H帶只有粗肌絲，I帶有細肌絲。3、肌纖維收縮時，細肌絲向H帶方向滑行，其結果是I帶和H帶同時縮短，H可完全消失，A帶長度不變。4、橫小管又稱T小管它是肌膜向肌纖維內凹陷而形成的小管它與肌纖維長軸相垂直，其功能是將肌膜興奮傳向細胞內部。5、心肌纖維呈短圓柱狀，有分支，細胞核位于肌纖維的中央。6心肌纖維在相互連接處形成閏盤用光鏡觀它呈橫行或階梯狀粗線用電鏡觀橫行部為中間連接和橋?？v行部為縫隙連接骨骼肌心肌肌纖維形態(tài)長圓柱狀，無分支短圓柱狀，有分支細胞核多核，位于肌膜下一般為單核，位于細胞中央橫紋很明顯明顯閏盤無有肌原纖維粗細相等，界限分明粗細不等，界限不甚分明橫小管細，位于明暗帶交界處多而粗，位于Z線水平肌漿網(wǎng)發(fā)達稀疏三（二）聯(lián)體三聯(lián)體二聯(lián)體1簡述細胞生物學的基本概念，以及細胞生物學發(fā)展的主要階段。以細胞為研究對象，經(jīng)歷了從顯微水平到亞顯微和分子水平的發(fā)展過程，研究細胞結構與功能從而探索細胞生長發(fā)育繁殖遺傳變異代謝衰老及進化等各種生命現(xiàn)象的規(guī)律的科學；主要階段①細胞的發(fā)現(xiàn)與細胞學說的創(chuàng)立②光學顯微鏡下的細胞學研究③實驗細胞學研究④亞顯微結構與分子水平的細胞生物學。2簡述細胞學說的主要內容。施萊登和施旺提出一切生物，從單細胞生物到高等動物和植物均有細胞組成，細胞是生物形態(tài)結構和功能活動的基本單位。魏爾肖后來對細胞學說作了補充，強調細胞只能來自原來的細胞。3簡述原核細胞的結構特點。1）結構簡單DNA為裸露的環(huán)狀分子，無膜包裹，形成擬核。細胞質中無膜性細胞器，含有核糖體。2）體積小直徑約為1到數(shù)個微米。4簡述真核細胞和原核細胞的區(qū)別。5簡述DNA的雙螺旋結構模型。①DNA分子由兩條相互平行而方向相反的多核苷酸鏈組成。②兩條鏈圍繞著同一個中心軸以右手方向盤繞成雙螺旋結構。③螺旋的主鏈由位于外側的間隔相連的脫氧核糖和磷酸組成，內側為堿基構成。④兩條多核苷酸鏈之間依據(jù)堿基互補原則相連螺旋內每一對堿基均位于同一平面上并且垂直于螺旋縱軸，相鄰堿基對之間距離為034NM雙螺旋螺距為34NM。6蛋白質的結構特點。①都是由一層單位膜包裹而成的囊球狀結構小體②均含有豐富的酸性水解酶，是溶酶體的標志酶③溶酶體膜腔面富含高度糖基化的穿膜整合蛋白，可防止溶酶體酶對自身膜結構的消化分解④溶酶體膜上嵌有質子泵，可將H泵入溶酶體中，維持溶酶體酸性內環(huán)境。26簡述溶酶體形成與成熟過程。①酶蛋白在內質網(wǎng)合成并糖基化形成帶有甘露糖的糖蛋白；②甘露糖糖蛋白轉運至高爾基復合體形成面，被磷酸化形成溶酶體酶的分選信號M6P（甘露糖6磷酸）；③在反面高爾基網(wǎng)腔面，被M6P受體識別，包裹形成網(wǎng)格蛋白有被小泡；④有被小泡脫被形成無被小泡與胞內晚期內吞體結合成內體性溶酶體；⑤在前溶酶體膜上質子泵作用下形成酸性內環(huán)境，溶酶體酶與M6P受體解離，去磷酸化而成熟。27內膜系統(tǒng)各細胞器的主要標志性酶內質網(wǎng)葡萄糖6磷酸酶高爾基體糖基轉移酶溶酶體酸性磷酸酶過氧化物酶體過氧化氫酶28細胞內轉運囊泡的類型及其功能①網(wǎng)格蛋白有被小泡的功能A高爾基復合體網(wǎng)格蛋白小泡介導從高爾基復合體向溶酶體、胞內體或質膜外的物質轉運。B細胞內吞作用形成的網(wǎng)格蛋白小泡將外來物質轉送到細胞質或溶酶體。②COPⅠ有被小泡功能捕捉、回收轉運內質網(wǎng)逃逸蛋白；逆向運輸高爾基復合體膜內蛋白；行使從內質網(wǎng)到高爾基復合體的順向轉移。③COPⅡ有被小泡功能介導從內質網(wǎng)到高爾基復合體的物質轉運。29細胞骨架的組成微管，微絲，中間纖維30微絲、微管的裝配過程踏車運動微管組織中心。一微絲裝配過程①成核期微絲組裝的限速過程。②聚合期肌動蛋白在核心兩端聚合，正端快，負端慢。③穩(wěn)定期聚合速度與解離速度達到平衡。二微管裝配過程①成核期管蛋白聚合成短的寡聚體（核心）片狀微管②聚合期聚合速度大于解聚速度。③穩(wěn)定期聚合速度等于解聚速度。三在微絲裝配時，肌動蛋白分子添加到肌動蛋白絲上的速率正好等于肌動蛋白分子從肌動蛋白絲上解離速率時，微絲凈長度沒有改變，這一現(xiàn)象稱為踏車運動。四微管組織中心（MTOC）在活細胞內，能夠起始微管的成核作用，并使之延伸的細胞結構，稱為微管組織中心。如中心體、基體等31微管在細胞中的三種不同存在形式及其特點。在細胞中有三種存在形式單管、二聯(lián)管和三聯(lián)管。單管由13根原纖維組成，是細胞質中常見的形式，其結構不穩(wěn)定易受環(huán)境因素影響而降解。二聯(lián)管由A，B兩個單管組成，A管有13根原纖維，B管有10根原纖維，與A管共用3根原纖維，主要分布于纖毛和鞭毛內。三聯(lián)管由A，B，C三個單管組成，A管有13根原纖維，B、C各有10根原纖維，主要分布于中心粒、鞭毛和纖毛的基體中。32微絲、微管的特異性藥物分別有哪些，它們的作用分別是什么秋水仙素、長春新堿抑制微管裝配。紫杉醇能促進微管的裝配并使已形成的微管穩(wěn)定。細胞松弛素抑制微絲的聚合，對微管無作用。鬼筆環(huán)肽同聚合的微絲結合后，抑制微絲的解體。33詳述微管的主要生物學功能。一支持和維持細胞的形態(tài)微管具有一定的強度，能夠抗壓和抗彎曲，給細胞提供機械支持力，是支撐和維持細胞形狀的主要物質。二參與中心粒、纖毛和鞭毛的形成1中心粒和中心粒旁物質構成中心體2纖毛與鞭毛是細胞表面的運動器官，二者結構基本相同，在電鏡下都可見92的結構，中央為一組二聯(lián)微管稱為中央微管，周圍有9組二聯(lián)微管。三參與細胞內物質運輸細胞內的細胞器移動和胞質中的物質轉運都和微管有著密切的關系，具體功能由馬達蛋白來完成。馬達蛋白是指介導細胞內物質沿細胞骨架運輸?shù)牡鞍?。主要分三大類動力蛋白將物質沿微管運輸驅動蛋白肌球蛋白將物質沿微絲運輸四維持細胞內細胞器的定位和分布①線粒體的分布與微管相伴隨；②游離核糖體附著于微管和微絲的交叉點上；③內質網(wǎng)沿微管在細胞質中展開分布；④高爾基體沿微管向核區(qū)牽拉，定位于細胞中央。五參與染色體的運動，調節(jié)細胞分裂微管是構成有絲分裂器的主要成分，可介導染色體的運動，從而調節(jié)細胞分裂。六參與細胞內信號傳導微管參與HEDGEHOG、JNK、WNT、ERK及PAK蛋白激酶信號轉導通路。信號分子可直接與微管作用或通過馬達蛋白和一些支架蛋白來與微管作用。34中間纖維的包裝及其特點。兩個平行排列的中間纖維蛋白分子形成螺旋狀的二聚體；由兩個二聚體反向平行排列成一個四聚體；兩個四聚體組裝成一個八聚體，八個四聚體組裝成中間纖維。特點直徑10NM左右，介于微絲和微管之間，是最穩(wěn)定的細胞骨架成分。35核膜的結構、特點及功能。電鏡下，核膜是由內外層核膜、核周隙、核孔復合體和核纖層等結構組成。外核膜與糙面內質網(wǎng)相連。內核膜表面光滑包圍核質。核周隙為內外兩層核膜之間的緩沖區(qū)；核孔復合體是由多種蛋白質構成的復合結構。核纖層是緊貼內核膜的纖維蛋白網(wǎng)。功能核膜為基因表達提供了時空隔離屏障，參與蛋白質的合成，核孔復合體控制著核質間的物質交換。36核孔復合體的捕魚籠式結構模型。核孔復合體由胞質環(huán)、核質環(huán)、輻和中央栓四部分組成。①胞質環(huán)位于位于核孔復合體結構邊緣胞質面一側的環(huán)狀結構與柱狀亞單位相連，環(huán)上對稱分布8條短纖維，并伸向細胞質。②核質環(huán)位于核孔復合體結構邊緣核質面一側的孔環(huán)狀結構與柱狀亞單位相連，在環(huán)上也對稱分布8條纖維伸向核內，纖維末端形成一個由8個顆粒組成的小環(huán)構成捕魚籠似的結構，稱“核籃”。

簡介：病原生物學檢驗習題集一、一、名詞解釋名詞解釋1L型細菌是指在某情況下，（如受溶菌酶或青霉素作用），細菌細胞壁中肽聚糖結構可遭破壞，或其合成受到抑制，當菌細胞壁受損后細菌并不一定死亡而成為細胞壁缺陷的細菌，稱L型細菌。2轉化是指受體菌直接攝取供體菌的游離DNA片段，并正整合到自己的基因組中，從而獲得新的遺傳性狀叫轉化。3SPA葡萄球菌A蛋白（SPA）是絕大多數(shù)金黃色葡萄球菌細胞壁的一種表面蛋白。SPA可與除IGG3外的IGG分子的FC段發(fā)生非特異性結合，二者結合后，IGG的FAB段仍然可以與特異性抗原結合，實驗室常利用SPA這種特性進行協(xié)同凝集試驗，廣泛應用于多種微生物抗原的檢測。4抗原性漂移通常認為流感病毒基因發(fā)生了點突變，變異幅度小或連續(xù)變異，部分人群對新毒株沒有免疫力，引起小規(guī)模流行。一般認為是屬于量變，即亞型內變異。5AIDS人類獲得性免疫缺陷綜合征。病原體為HIV。傳播途徑主要為性傳播、血液傳播和垂直傳播。臨床表現(xiàn)經(jīng)過原發(fā)感染急性期、無癥狀潛伏期、AIDS相關綜合征及典型AIDS四階段，最后常死于感染和相關腫瘤。6KIA克氏雙糖實驗，可檢測出細菌是否能夠分解乳糖、葡萄糖，7串珠試驗將待檢菌接種于含青霉素00505UML培養(yǎng)基上，經(jīng)37℃培養(yǎng)6小時后，炭疽桿菌可發(fā)生形態(tài)變化，顯微鏡下可見大而均勻的圓球狀菌體，成串珠樣排列，為串珠試驗陽性。8衛(wèi)星現(xiàn)象流感嗜血桿菌章節(jié)9洶涌發(fā)酵將產(chǎn)氣莢膜梭菌接種于牛乳培養(yǎng)基中，該菌能分解乳糖產(chǎn)酸，使酪蛋白凝固，同時產(chǎn)生大量氣體，將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，并將液面上的凡士林向上推擠，甚至沖開管口棉塞，氣勢兇猛，稱為洶涌發(fā)酵。10轉導是以溫和噬菌體為媒介，將供體菌DNA片段轉移到受體菌內，使受體菌獲得新的遺傳性狀，稱轉導。11溶原性轉換是指細菌因染色體上整合有前噬菌體，從而獲得新的遺傳性狀。如產(chǎn)氣白喉桿菌的形成。12接合是指兩個細菌直接接觸，供體菌通過性菌毛將DNA轉入受體菌內，使受體菌獲得新的遺傳性狀，稱接合。13肥達試驗是用已知傷寒沙門菌菌體（O）抗原和鞭毛（H）抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作試管或微孔板凝集試驗，測定受檢血清中有無相應抗體及其效價的試驗，用于腸熱癥的輔助潛伏期長，引起人和動物形成以海綿狀腦?。═SE）為特征的致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)的慢性退行性疾病。主要表現(xiàn)為癡呆、共濟失調、震顫等癥狀，隨即昏迷死亡。26衛(wèi)星現(xiàn)象將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時，由于后者能合成V因子，故在金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，此為衛(wèi)星現(xiàn)象SATELLITEPHENOMENON。27轉座子一類在細菌的染色體、質粒和噬菌體之間自行移動的遺傳成分，是細菌基因組中一段特異的具有轉位特性的獨立DNA序列。28遷徙生長變形桿菌章節(jié)29毒血癥細菌只在局部生長繁殖，不入血，但產(chǎn)生的外毒素入血，引起全身的中毒癥狀。30霍亂紅試驗霍亂弧菌有色氨酸酶和硝酸鹽還原能力，當將霍亂弧菌培育于含硝酸鹽的蛋白胨水中時，分解培養(yǎng)基中的色氨酸產(chǎn)生吲哚，同時，還原硝酸鹽成為亞硝酸鹽，兩種產(chǎn)物結合成亞硝酸鹽吲哚，滴加濃硫酸后呈現(xiàn)薔薇色，是霍亂紅試驗。二、填空題二、填空題1細菌生長曲線可分四期遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期。（25）2血漿凝固酶試驗有玻片法和試管法二種方法，主要用于致病性葡萄球菌的鑒定。（77）3由于A群鏈球菌可產(chǎn)生透明質酸酶、鏈激酶、鏈道酶等侵襲性酶，所以炎癥容易擴散。（83）4腸桿菌科的鑒定，先依據(jù)克氏雙糖鐵（KIA）和MIU的反應結果初步鑒定到菌屬。（101）5能夠分解尿素的腸桿菌是變形桿菌。（）6流感嗜血桿茵的生長需要X因子和V因子。（175）7炭疽芽胞桿菌的鑒別試驗包括_串珠試驗__、_青霉素抑制試驗_、_莢膜腫脹試驗、_NAHCO3毒力試驗。（213）8IMVIC是指吲哚、甲基紅、VP和枸櫞酸鹽試驗。9細菌的遺傳物質有染色體、質粒、轉座子。（27）10莢膜腫脹試驗是用已知抗血清與細菌的莢膜特異性結合，形成復合物時，可使細菌莢膜顯著增大，常用于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、肺炎克雷伯桿菌的檢測和分型。（16）11傷寒發(fā)病第一周內，陽性率最高的檢查方法是驗血。12霍亂病人的典型大便呈“米泔水”樣便霍亂主要的致病物質為腸毒素，采集標本后首先進行動力和制動試驗，然后接種入堿性蛋白胨培養(yǎng)基中培養(yǎng)。（193）