簡介：研究認(rèn)為，人子宮內(nèi)膜功能層和基底層中存在子宮內(nèi)膜干細(xì)胞ENDOMETRIALSTEMCELLS，ENSCS，ENSCS與子宮內(nèi)膜的生理性再生及子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜息肉等疾病有明顯的相關(guān)性，另外ENSCS在子宮內(nèi)膜再生、盆腔臟器脫垂、膀胱尿道組織修復(fù)等已有廣泛的研究。當(dāng)前國內(nèi)外主要從正常子宮內(nèi)膜中獲取ENSCS，而由于刮宮、炎癥等引起的子宮內(nèi)膜重度損傷患者，ENSCS的獲取將成為困難。研究認(rèn)為宮腔粘連的發(fā)生主要由子宮內(nèi)膜基底層中ENSCS的不足或功能異常引起，所以我們嘗試從蛻膜中提取ENSCS并儲(chǔ)存，該方法具有操作方便并且不受倫理限制等優(yōu)點(diǎn)，可為日后的相關(guān)疾病中組織修復(fù)的應(yīng)用提供可靠的細(xì)胞基礎(chǔ)。本研究從蛻膜組織中分離、純化、擴(kuò)增、培養(yǎng)ENSCS，并對ENSCS進(jìn)行干細(xì)胞特性鑒定，通過體外誘導(dǎo)觀察ENSCS的多向分化的潛能，為ENSCS在子宮內(nèi)膜損傷、盆腔臟器脫垂、陰道重建等組織修復(fù)應(yīng)用和子宮內(nèi)膜異位癥、子宮內(nèi)膜息肉、子宮內(nèi)膜癌等子宮內(nèi)膜相關(guān)疾病提供可行的細(xì)胞模型。目的1、研究人蛻膜組織中子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的分離及體外培養(yǎng)方法，并對所分離的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的生物學(xué)特性進(jìn)行初步研究。2、研究人蛻膜組織中子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的生物學(xué)特性，通過體外誘導(dǎo)的方法研究人蛻膜組織子宮內(nèi)膜干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的分化能力。方法1、取行人工流產(chǎn)患者的蛻膜組織，用胰酶和膠原酶消化蛻膜組織，分離子宮內(nèi)膜細(xì)胞，計(jì)數(shù)后，以極低密度接種于10CM培養(yǎng)皿，分離單克隆貼壁生長的細(xì)胞，倒置顯微鏡觀察子宮內(nèi)膜干細(xì)胞形態(tài)變化及克隆形成情況。2、采用CCK8法繪制子宮內(nèi)膜干細(xì)胞生長曲線，并計(jì)算倍增時(shí)間。3、流式細(xì)胞儀分析子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的細(xì)胞周期及細(xì)胞表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD146表達(dá)情況。4、通過成骨誘導(dǎo)液和平滑肌誘導(dǎo)液研究子宮內(nèi)膜干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和平滑肌分化的潛能。5、通過堿性磷酸酶染色、茜素紅染色對子宮內(nèi)膜干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的成骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定免疫熒光和蛋白印跡對子宮內(nèi)膜干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的平滑肌細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果1、子宮內(nèi)膜干細(xì)胞呈長梭形，成纖維細(xì)胞樣，可見粗細(xì)不等的胞質(zhì)突起，增殖至8090％呈漩渦狀生長，其克隆形成率分別為391％和914％2、ENSCS生長曲線呈“S”型，接種48H至60H后進(jìn)入對數(shù)生長期，于第9天達(dá)到平臺(tái)期，倍增時(shí)間為3752H。3、流式細(xì)胞儀測定ENSCS細(xì)胞表面抗原CD299913％，CD449739％，CD739968％，CD909676％，CD1058964％，CD1467796％呈陽性表達(dá)，而CD31130％，CD34068％，CD45126％呈陰性表達(dá)，4、流式細(xì)胞儀分析子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的細(xì)胞周期提示，有6179％的細(xì)胞處于G0G1期，2237％的細(xì)胞處于SG2M期。5、通過成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基及平滑肌誘導(dǎo)培養(yǎng)基可以成功將子宮內(nèi)膜干細(xì)胞向成骨細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化。結(jié)論采用組織消化法分離單克隆貼壁生長的子宮內(nèi)膜細(xì)胞，能夠獲得純化的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞，并能在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基及平滑肌誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)下，成功向成骨細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞分化。

簡介：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所博士學(xué)位論文人支氣管上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中DNAPKCS的生物學(xué)功能研究姓名孫敬芬申請學(xué)位級別博士專業(yè)衛(wèi)生毒理學(xué)指導(dǎo)教師吳德昌周平坤20030601KIPLBMMRNCBINERNHEJODPCRPAGEP13KRBRT_PCRSDSTBSTCRTRISVDJXRCCDNADEPENDENTPROTEINKINASEINTERACTIONPROTEINLURIA．BERTANIMEDIUMMISMATCHREPAIRNATIONALCENTERFORBIOTECTMOLOGYINFORMATIONNUCLEOTIDEEXCISIONREPAIRNONHOMOLOGOUSENDJOININGOPTICALDENSITYPOLYMERASECHAINREACTIONPOLYACRYAMIDEGELELECTROPHORESISPHOSPIHC}INOSITIDE3KINASERETINOBLASTOMAPROTEINREVERSETRANSCRIPTIONPCRSODIUMDODECYLSULFATETRISBUFFEREDSALINETRANSCRIPTIONCOUPLEDREPAIRTRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANEVARIABLEDIVERSEJOININGXRAYREPAIRCROSSCOMPLEMENTINGGENE2

簡介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及移植治療腦梗塞的初步研究姓名桂莉申請學(xué)位級別碩士專業(yè)神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師李露斯20030401第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文NFNGFNPFNSE0DPBSSEPTGF一6INCUFOFILAMENTNERVEGROWTHFACTORNEUFITEPROMOTINGFACTORNEURONSPECIFICENOLASEOPTICALDENSITYPHOSPHATEBUFFEREDSALINESOMOTOSENSORYEVOKEDPOTENTIALSTRANSFORMINGGROWTHFACTORBL2神經(jīng)絲蛋白神經(jīng)生長因子促軸索因子神經(jīng)元特異烯醇化酶光密度磷酸鹽緩沖生理鹽水體感誘發(fā)電位轉(zhuǎn)化生長因子BI

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文聲通道上的條狀障礙物對HIFU聲場和生物學(xué)焦域的影響研究姓名付麗媛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師李發(fā)琪20090501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文究竟對HIFU聲場及生物學(xué)焦域有何影響本研究引導(dǎo)聲束透過肋間隙、肋緣及正對肋骨，在每種情況下將肋骨分別置于距焦平面3CM、6CM、9CM處，采用水聽器描繪出每種情況下聲場的分布。在離體組織中進(jìn)行HIFU輻照，研究HIFU聲束透過肋骨時(shí)，肋骨對HIFU生物學(xué)焦域的位置、形態(tài)以及體積的影響和肋骨表面發(fā)生的變化。同時(shí)研究聚焦超聲換能器的FNUMBER即換能器焦距與直徑的比值對HIFU透過肋骨后生物學(xué)焦域的影響，為臨床選擇合適的換能器提供建議，對臨床應(yīng)用HIFU治療受肋骨阻擋的肝癌提供建議，同時(shí)為應(yīng)用HIFU在不切肋骨隋況下治療肝癌提供理論基礎(chǔ)。目的1研究聲通道上的條狀障礙物對HIFU聲場的影響，對臨床應(yīng)用HIFU治療有肋骨遮擋的肝癌提供理論基礎(chǔ)。2研究相同輸出聲功率下，聲通道上的條狀障礙物對HIFU生物學(xué)焦域位置、形態(tài)、體積的影響；研究提高輸出聲功率以補(bǔ)償條狀障礙物對聲能量的衰減，聲通道上的條狀障礙物對HIFU生物學(xué)焦域的影響，以期對臨床應(yīng)用HIFU治療有肋骨遮擋的肝癌提供建議。3研究聚焦超聲換能器的FNUMBER超聲換能器焦距與直徑比值對HIFU透過條狀障礙物的生物學(xué)焦域的影響，為臨床選擇合適的換能器提供建議。方法1采用聲場測量系統(tǒng)由重慶海扶HIFU技術(shù)有限公司研發(fā)對聲場進(jìn)行測量，該系統(tǒng)主要由水聽器、吸聲水槽、吸聲靶、吸聲材3

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文活性復(fù)合鈦基種植體表面的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究姓名魏建華申請學(xué)位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（頜面外科）指導(dǎo)教師劉寶林楊連甲200341第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文TISSARRAHATPSSBFMSCALPNUVNODSEMEDXXRDXPSCLSM縮略詞表J“ITANIUMSMOOTHSURFACESMOOTHALKALI．HEALEDSURFACEROUGHSURFACEROUGHALKALIHEATEDSURFACEHYDROXYAPATILETITANIUMPLASMASPRAYEDSURFACESIMULATEDBODYFLUIDBONEMARROVVSTEMCELLALKALINEPHOSPHATASEFIBRONECTINVITRONECTINOPTICALDENSITYSCANNINGELECTRONMICROSCOPYENERGYDISPERSIVEELECTRONPROBEXRAYANALYSISXRAYDIFFMCTOMETRYXRAYPHOTOELECTRONSPECTROSCOPYCONFOCALLASERSCANNINGMICROSCOPY鈦光滑表面光滑堿熱處理表面耜化表面粗化堿熱處理表面羥基磷灰石鈦漿等離子噴涂表面模擬體液骨髓基質(zhì)干細(xì)胞堿性磷酸酶纖維粘連素玻璃體結(jié)合蛋白光密度掃描電子顯微鏡電子能譜分析X射線衍射分析X射線光電子譜分析掃描激光共聚焦顯微鏡

簡介：目的觀察參芪解毒湯SQJDD對治療后的慢性腎功能衰竭CRF大鼠腎組織的分子生物學(xué)影響，探討SQJDD治療慢性腎功能衰竭的機(jī)制。方法1動(dòng)物模型復(fù)制將90只健康WISTAR雄性大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、低劑量SQJDD組、中劑量SQJDD組和高劑量SQJDD組，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。采用25％的腺嘌呤灌胃4周來誘導(dǎo)大鼠形成慢性腎功能衰竭模型。2分子生物學(xué)檢測模型復(fù)制后，通過檢測血肌酐SCR、尿素氮BUN水平來判斷是否造模成功。經(jīng)過SQJDD干預(yù)治療8周后，檢測SCR、BUN、24小時(shí)尿蛋白定量24HRUP、三酰甘油TAG、膽固醇CHOL、血清白蛋白ALB水平；處死大鼠，采用HE染色觀察各組大鼠腎臟組織的病理改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測結(jié)締組織生長因子CTGF、血小板源性生長因子BPDGFB的表達(dá)情況；采用蛋白印跡法WESTERNBLOTTING檢測各組大鼠腎臟組織轉(zhuǎn)化生長因子Β1TGFΒ1、SMAD2、SMAD3的表達(dá)情況。結(jié)果1模型復(fù)制結(jié)果腺嘌呤灌胃后，模型組及低、中、高劑量SQJDD組的SCR、BUN水平均較正常組明顯升高P＜001，提示慢性腎衰大鼠模型制作成功。2藥物干預(yù)結(jié)果與治療前相比，低、中、高劑量SQJDD組的SCR、BUN水平明顯降低P＜001；治療后，各治療組的SCR、BUN水平均低于模型組（P＜001），提示SQJDD可以降低SCR、BUN水平；治療后，各治療組24HRUP、CHOL水平均低于模型組P＜001，P＜005，ALB水平高于模型組P＜001，提示SQJDD可以降低24HRUP、CHOL，升高ALB病理結(jié)果顯示，各治療組大鼠的腎臟組織病理損傷明顯輕于模型組，提示SQJDD能減輕腎組織損傷。免疫組化結(jié)果顯示，各治療組CTGF、PDGFB在腎組織的表達(dá)均明顯低于模型組P＜001，提示SQJDD可以減少腎衰大鼠腎組織的CTGF、PDGFB的表達(dá)；蛋白印跡法檢測結(jié)果顯示，各治療組腎組織的TGFΒ1、SMAD2、SMAD3蛋白表達(dá)均低于模型組（P＜001），提示SQJDD可減少腎衰大鼠腎組織的TGFΒ1、SMAD2、SMAD3蛋白的表達(dá)。結(jié)論SQJDD可能是通過減少CTGF、PDGFB、TGFΒ1、SMAD2、SMAD3在腎組織的表達(dá)來減輕大鼠腎組織損傷，防止腎功能惡化、延緩慢性腎衰進(jìn)展。

簡介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文人體組織神經(jīng)干細(xì)胞的培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究姓名陳剛申請學(xué)位級別博士專業(yè)神經(jīng)外科指導(dǎo)教師薛德麟20040401華中科技太拳同濟(jì)區(qū)學(xué)境博士學(xué)位磚文人體組織神經(jīng)T細(xì)胞的培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究博士研究生；陳剛導(dǎo)師薛德麟教授中文摘要第一部分人胚腦神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定摘要目的探討體外分離培養(yǎng)人胚腦神經(jīng)干細(xì)胞的方法，觀察其生長特性并進(jìn)行鑒定。方法利用無痢清培養(yǎng)和單細(xì)胞克隆技術(shù)從人胚腦組織中分離培養(yǎng)神經(jīng)T細(xì)胞并用血清誘導(dǎo)其分化，應(yīng)用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)對培養(yǎng)細(xì)胞及其分化細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果從人胚腑組織分離的細(xì)胞群呈懸浮生長，具有連續(xù)增殖的能力，表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物NESTIN，這種細(xì)胞可分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞并表達(dá)特異性抗原NSE、6FAP和CNP。結(jié)論我們從人胚腦組織中分離出的細(xì)胞具有自我更新能力和多向分化潛能，是神經(jīng)干細(xì)胞，它為進(jìn)～步的神經(jīng)干細(xì)胞基礎(chǔ)研究提供了一個(gè)良好的模型，為臨床應(yīng)_蚪J提供了細(xì)胞來源。關(guān)鍵詞神經(jīng)干細(xì)胞人類胚胎腦培養(yǎng)第二部分入胚腦與脊髓神經(jīng)于細(xì)胞體外培養(yǎng)的差異摘要目的探討人胚腦源性神經(jīng)干細(xì)胞和脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和分化的差異。方法從人胚腦組織和脊髓組織中分離培養(yǎng)神經(jīng)干紐臆。分為E；F組、BFGF組、E6F_BFBF組，在連續(xù)傳代過程中觀察并比較神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)特性的差異；用血清誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化，觀察其分化狀況的不同。結(jié)果從人胚腦組織分離的細(xì)胞在BFGF犖獨(dú)存在時(shí)無法形成神經(jīng)球，在EOF或E6FBF6F存在時(shí)形成大量具有連續(xù)增殖能力的神經(jīng)球；從人胚脊髓組織分離的細(xì)胞在EGF單獨(dú)存在時(shí)無法形成神經(jīng)球，在BFGF單獨(dú)存在時(shí)只形成少量神經(jīng)球，在EGFBFGF存在時(shí)形成大量具有連續(xù)增殖能力的神經(jīng)球，同樣在EGFBFGF存

簡介：該實(shí)驗(yàn)同時(shí)定時(shí)、定量研究了MSCS對異基因T淋巴細(xì)胞表型的影響以經(jīng)CO60照射后的不同數(shù)量的MSC作為基底層細(xì)胞接種體外分離純化的相同數(shù)量的異體T淋巴細(xì)胞分別于0小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)、7天后用流式細(xì)胞技術(shù)測定各組T細(xì)胞表型的變化并計(jì)數(shù)各組T細(xì)胞數(shù)結(jié)果顯示當(dāng)T細(xì)胞數(shù)與MSC數(shù)比例為251A組、501B組時(shí)CD4CD25細(xì)胞與對照組相比均明顯增加A組P00023B組P00031CD8細(xì)胞明顯增多A組P00106B組P00148兩者均隨著共培養(yǎng)時(shí)間的延長而表達(dá)量逐漸增加A組和B組之間無明顯差別P02350實(shí)驗(yàn)組A組和B組與對照組相比CD3、CD4、CD25細(xì)胞無明顯差別當(dāng)T細(xì)胞數(shù)與MSC數(shù)比例為1001C組時(shí)與對照組相比CD4表達(dá)略上調(diào)但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義CD3、CD8、CD25、CD4CD25細(xì)胞無明顯差別隨培養(yǎng)時(shí)間的延長與MSC共孵育組和單獨(dú)T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)組中T淋巴細(xì)胞的數(shù)量均呈下降趨勢在第7天時(shí)T細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組細(xì)胞數(shù)減少約215﹪與MSC共孵育組T淋巴細(xì)胞數(shù)A組減少650﹪以上B組減少600﹪C組減少125﹪以上結(jié)果提示MSCS與T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)當(dāng)加入的MSCS達(dá)到一定的數(shù)量時(shí)T細(xì)胞MSC≤501可以引起T淋巴細(xì)胞的表型發(fā)生改變表現(xiàn)為CD4CD25細(xì)胞和CD8細(xì)胞明顯增多并且抑制T淋巴細(xì)胞的增殖而當(dāng)加入的MSCS小于一定的數(shù)量時(shí)T細(xì)胞MSC≥1001T淋巴細(xì)胞的表型無明顯改變并且刺激T淋巴細(xì)胞增殖表明MSC的負(fù)調(diào)控機(jī)制可能與誘導(dǎo)CD4CD25免疫調(diào)節(jié)性T細(xì)胞以及CD8T細(xì)胞增多有關(guān)同時(shí)也表明MSC對T淋巴細(xì)胞的作用與MSC的數(shù)量有關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果為防治異基因造血干細(xì)胞移植中GVHD和VGHR的發(fā)生、誘導(dǎo)免疫耐受提出了一條新的思路為臨床異基因造血干細(xì)胞移植時(shí)輸注MSCS預(yù)防GVHD的MSCS輸注數(shù)量提供了參考依據(jù)

簡介：J洳≥≥～唼博士學(xué)位論文⑧豫醫(yī)無毛小鼠的生物學(xué)特征及其分子遺傳學(xué)研究作者姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)章金濤方盛國教授動(dòng)物學(xué)所在學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院論文提交F1期2005年5月巾L習(xí)杭州浙江大學(xué)章金濤豫醫(yī)無毛小鼠的生物學(xué)特征及其分子遺傳學(xué)研究著年齡增長變得異常而稀疏。并在突變基因?qū)隑ALB／C小鼠品系過程中發(fā)現(xiàn)了一種嘴角脫毛的顯性表型小鼠，驗(yàn)證了遺傳的異質(zhì)性。電鏡掃描發(fā)現(xiàn)脫毛前毛囊上部的毛管先變大，然后再脫毛無毛同類系小鼠表面有較厚的一層鱗片狀角化物，毛囊腔寬大，部分毛囊內(nèi)含有一些能脫落到表面的角化樣碎片。35日齡無毛同類系小鼠可見明顯的包囊結(jié)構(gòu)，4月齡包囊增多、變大。3用RTPCR方法首次對昆明小鼠無毛基因的CDNA序列進(jìn)行了克隆，獲得了昆明小鼠無毛基因的全長4014BPEGNA序列GENBANK登錄號AY547391，基因的CGS長度為3546BP。AY547391基因編碼的蛋白質(zhì)在GENBANK中的序號為AAT45233，由I181個(gè)氨基酸組成。昆明小鼠與國外報(bào)導(dǎo)的小鼠、大鼠、豬、羊、猴、人等6種動(dòng)物CDS序列同源性分別為999％、944％、831％、781％、8L_9％、821％，氨基酸同源性分別是999％、922％、817％、708％、799％、801％。這一結(jié)果反應(yīng)了無毛基因在進(jìn)化過程中的高度保守性，表明其具有重要的生理功能。此外，還發(fā)現(xiàn)了4個(gè)SNP和一個(gè)缺失突變，其中3個(gè)位點(diǎn)沒有改變氨基酸殘基的性質(zhì)，兩個(gè)位點(diǎn)有氨基酸改變，并證實(shí)為多態(tài)性突變位點(diǎn)，研究結(jié)果為無毛基因的SNPS的數(shù)據(jù)庫提供了新的信息。并修正了國外報(bào)導(dǎo)的534位谷氨酸缺失為犀牛無毛表型病理性突變的錯(cuò)誤結(jié)論。4克隆獲得了豫醫(yī)無毛小鼠無毛基因的全長4014BPCDNA序列GERDJANK登錄號AY547390。并證實(shí)了豫醫(yī)無毛小鼠表型是由于無毛基因R第12I“顯子上31LO位發(fā)生無義突變GA，導(dǎo)致911位的色氨酸被終止密碼子替代所引起，結(jié)合其犀牛狀、壽命短的特征。此突變基因被命名為RHINOCEROTICANDSHORTLIVED，符號為加刪；現(xiàn)己被小鼠基因組數(shù)據(jù)庫收錄。新無毛突變基因的發(fā)現(xiàn)擴(kuò)展了無毛突變數(shù)據(jù)庫，增加了對遺傳性脫發(fā)疾病中基因型和表現(xiàn)型相互關(guān)系的了解。由于豫醫(yī)無毛小鼠譜系清楚、遺傳機(jī)制明確，將是一種較有價(jià)值的動(dòng)物模型。關(guān)鍵詞小鼠；無毛基因；突變形態(tài)；組織學(xué)；超微結(jié)構(gòu)；同類系；克?。粺o毛小鼠；皮膚。2

簡介：作者姓名劉薇學(xué)科專業(yè)普通外科學(xué)學(xué)院系、所湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師湯恢煥教授論文答辯日期型蘭’7．答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二。一一年五月U枝1從，。Ⅲ搿K缸噬盯磚僧RE甩，翟鬈Y麓，。1}，IR‘}原創(chuàng)性聲明?淵燃＼Y1917905所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名剮數(shù)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名童1墊導(dǎo)師簽名￡圣巫絲日期業(yè)年旦月衛(wèi)日

簡介：許多傳統(tǒng)的抗生素具有毒副作用且能夠誘導(dǎo)耐藥菌株的產(chǎn)生，甚至出現(xiàn)了能夠耐受幾乎所有抗生素的“超級細(xì)菌”，致使一些抗生索療效降低，甚至無效。世界衛(wèi)生組織在1994年就已宣布，抗生素的使用將成為全世界醫(yī)療衛(wèi)生的一個(gè)嚴(yán)重問題L。細(xì)菌耐藥性的問題推動(dòng)了人們尋求新型抗菌藥物的決心?？咕腁NTIMICROBIALPEPTIDES，AMPS是由生物體基因編碼的一類具有抗菌活性的小分子多肽，是宿主先天性非特異性防御系統(tǒng)的重要組分2，3，具有非特異性抗細(xì)菌、真菌、病毒等病原體作用45，還有研究表明，抗菌肽無致畸作用且不易發(fā)生蓄積中毒。因此，抗菌肽成為最具開發(fā)前景的抗生素替代品。蛔蟲寄生在動(dòng)物和人體富含細(xì)菌的腸道內(nèi)，提示蛔蟲有某種抗菌機(jī)制，近年來國外學(xué)者從其體內(nèi)分離到CECROPIN類抗菌肽2，顯示有廣譜的殺菌作用，抗菌譜主要包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌，對病毒、腫瘤細(xì)胞、原蟲、真菌也有一定的抑制作用。而且耐高溫，100℃加熱仍能保持一定的活性。LEE等首先從豬小腸分離得到CECROPINP1，含31個(gè)氨基酸，后來證實(shí)是由蛔蟲ARISSUUM在抵抗微生物時(shí)分泌的。PILLAI等2005利用CDNA差異顯示技術(shù)對蛔蟲ARISSUUMCDNA研究，測定了編碼CECROPINP1的基因序列，同時(shí)又發(fā)現(xiàn)了3個(gè)新的蛔蟲抗菌肽基因，分別命名為CECROPINSP2、P3和P4，化學(xué)合成這些短肽，發(fā)現(xiàn)其有廣譜抗菌活性，其中尤以CECROPINPL殺菌活性最強(qiáng)。由于蛔蟲是動(dòng)物和人體內(nèi)的寄生蟲，獲得大量的抗菌肽十分的困難，基因工程領(lǐng)域的飛速發(fā)展，為大量獲得蛔蟲抗菌肽提供了兩全其美的方案。由于抗菌肽對工程菌有毒性，必須采用融合表達(dá)和酵母表達(dá)策略，近年來國內(nèi)外對此研究取得了可喜的進(jìn)展，多種來源的抗菌肽基因在大腸桿菌和酵母菌中表達(dá)成功，表達(dá)產(chǎn)物具有生物學(xué)活性，說明本研究路線是可行的。在本文中，我們期望通過分析以蛔蟲為主的抗菌肽的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)、合成一段多肽并使其在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中分泌表達(dá)，期望能夠獲得具有抗菌活性的轉(zhuǎn)基因酵母菌株，獲得大量有活性抗菌肽用于研究應(yīng)用當(dāng)中初步探索蛔蟲CECROPINP1生物活性，為日后獲得抗菌活性更高、抗菌譜更廣的抗菌肽打下一定的基礎(chǔ)。目的應(yīng)用基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)研究蛔蟲抗菌肽CECROPINP1及其體內(nèi)外抗菌活性，為重組抗菌肽CECROPINP1的工程化生產(chǎn)以及公共衛(wèi)生健康服務(wù)奠定基礎(chǔ)。本研究通過基因工程獲得CECROPINP1抗菌肽希望給社會(huì)帶來經(jīng)濟(jì)效益。方法在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)蛔蟲抗菌肽CECROPINP1并檢測其生物活性，根據(jù)畢赤酵母的密碼子偏好性，人工設(shè)計(jì)并合成3條CECROPINP1基因寡核苷酸片段，通過PCR擴(kuò)增得到CECROPINP1基因，構(gòu)建重組載體PMD18TCECPL。雙酶切PMD18TCECP1，將CECROPINP1基因克隆到載體PPICZΑA信號序列Α因子之后，構(gòu)建酵母分泌表達(dá)載體PPICZΑACECPI，用SACI將其線性化后，采用電穿孔法進(jìn)行轉(zhuǎn)化畢赤酵母X33，采用ZEOCIN抗性篩選陽性菌株并進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，獲得酵母分泌表達(dá)載體PPICZΑACECP1。獲得的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDSPAGE電泳、應(yīng)用紙片法抑菌實(shí)驗(yàn)初步測定表達(dá)產(chǎn)物的抑菌活性，進(jìn)一步測定表達(dá)產(chǎn)物的生物學(xué)活性。結(jié)果SDSPAGE證實(shí)PPICZΑACECPLX33甲醇誘導(dǎo)產(chǎn)物的分子質(zhì)量單位為63KU，表達(dá)產(chǎn)物對大腸埃希菌DH5Α的生長有抑制作用。初步抑菌活性測定顯示其對大腸桿菌DH5Α、嗜酸乳桿菌、金黃色葡萄球菌、鼠傷寒沙門氏菌CMCC50222和志賀氏菌SDCDC563有明顯的抑制作用，但對銅綠假單胞菌27853沒有抑菌圈的產(chǎn)生。誘導(dǎo)表達(dá)上清液對骨髓瘤細(xì)胞SP2O有明顯的抑制生長作用，抑制率最大為74845％，IC50為87181ΜGML。對杜氏利什曼原蟲也有明顯的抑制生長作用抑制率最大為85381％，IC5O為37333ΜGML。結(jié)論成功地利用基因工程在畢赤酵母X33表達(dá)了抗菌肽CECROPINP1，并初步對CECROPINP1的生物學(xué)功能進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)CECROPINPI對一部分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有抗菌活性，同時(shí)對部分腫瘤細(xì)胞和寄生蟲也有抗菌活性。此研究對抗菌肽CECROPINP1在醫(yī)藥衛(wèi)生方面應(yīng)用，打下了一定的基礎(chǔ)。

簡介：Y9089FI戮一蚓1195№毒島大學(xué)碩士學(xué)位論文鋇士罕伍1侖叉胃腸道腫瘤放療對胰腺生物學(xué)效廊影響曲JJ岫_1ILLJLL研究J紅英蜜丞隨副數(shù)授一一刖型由坐一2QQ51暖且量目一一一衛(wèi)】【】勤壹』壘I一』型海越攫～THESTUDYOFTHEBIOLOGICALEFFECTOFPANCREASEFOLLOWINGIRRADIATIONOFTHEGASTROENTERICTUMORABSTRACT0BJECTIVETOINVESTINGATETHEMAXIMUMTOLERATEDRADIATIONDOSEANDTHERALATIONOFVOLUMTIMEEFFECTOFPANCREASEMETHODS150MALEMICE，ABOUT2029，WEREDISTRIBUTEDIN5GROUPSRANDOMLYEVERYMICERECEIVEDIRRADIATIONWITH60COYTOTHEEPIGASTRICZONEIRRADIATIONDOSESOF2，4，6，8GYWEREGIVENTOGROUPB，C，DANDERESPECTIVELYTHEANIMALSWEREKILLEDAT3，7，14，21，28，35，42，49AND54DAYSAFTERIRRADIATIONANDMICROSCOPICALLYANDHISTOLOGICALLYEXAMINED，ANDBLOODGLUCOSEANDSERUMALPHAAMYLASEWEREDETERMINEDRESULTSTHELEVELOFBLOODGLUCOSEOFTHESETESTGROUPSLOWERTHANTHECONTROLAFTER7DAYSBUTHIGHERTHANTHECONTROLAFTER14DAYSP005ANDTHEDIFFERENCEBETWEENEACHEXPERIMENTWASSTATISTICALSIGNIFICENCEP005THELEVELOFSERUMALPHAAMYLASEBETWEENEACHEXPERIMENTWASALSOSTATISTICALSIGNIFICENCEP005DURING49DAYSTHEPANCREASEOFEXPERIMENTBEGINTOSHOWPATHOLOGICALCHANGESAFTER7DAYSDEGRANULATION，VACUOLIZATION，MITOCHONDRIALDESTRUCTION，ANDINTERSTITIALFIBROSISAFTER21DAYS，CONCLUSIONSTHEPATHOLOGICALCHANGESOFPANCREASEFOLLOWRADIATIONLIKETHESEOFDIABETICWHICHTOCUETHATRADIATIONMAYINITIATIONDIABETICANDTHEDEGREEOFCHANGESISRELATEDTOTHEDOSEOFRADIATIONANDTHETIMEAFTERRADIATIONTHEBIGGEROFDOSE，THEGRAVEROFTHECHANGANDTHELONGEROFDURATIONTHELEVELOFBLOODGLUCOSEISCOINCIDENCETOTHEDEGREEOFPATHOLOGICALCHANGE，SOTHISISAGOODMEANSTODETECTTHEOFCHANGESOFPANCREASEWHICHRECEIVEDIRRADIATIONTOTHEEPIGASTRICZONEPOSTGRADUATESTUDENTIVHONGYINGONCOLOGYDIRECTEDBYPROFANYONGHENGKEYWORDS瑚DJATION；PANCREAS；EFFECT；PATHOLOGICALCHANG；BLOODGLUCOSE；SERUMALPHAAMYLASE

簡介：點(diǎn)擊查看更多Fas信號激活樹突狀細(xì)胞炎性復(fù)合體形成的生物學(xué)意義與分子機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：分類號密級國際十進(jìn)分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文125I放射性粒子近距離治療前列腺癌的生物學(xué)基礎(chǔ)研究（題名和副題名）上官劍鋒（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名袁建林教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院泌尿外科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱外科學(xué)（泌尿外科）論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2009年10至2011年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)125I放射性粒子近距離治療前列腺癌的放射性粒子近距離治療前列腺癌的放射性粒子近距離治療前列腺癌的放射性粒子近距離治療前列腺癌的生物學(xué)基礎(chǔ)研究生物學(xué)基礎(chǔ)研究生物學(xué)基礎(chǔ)研究生物學(xué)基礎(chǔ)研究研究生上官劍鋒學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（泌尿外科）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院泌尿外科導(dǎo)師袁建林教授（主任醫(yī)師）輔導(dǎo)教師武國軍副教授（副主任醫(yī)師）資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院助推計(jì)劃關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞前列腺癌；放射性125I；近距離治療裸鼠中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2011年5月

簡介：分類號密級國際十進(jìn)分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文高氟對成釉細(xì)胞生物學(xué)特性影響的體外研究（題名和副題名）楊婷（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名段小紅副教授指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔生物學(xué)教研室申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（口腔生物學(xué)）論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2010年10月至2011年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)高氟對成釉細(xì)胞生物學(xué)特性影響的體外研究研究生楊婷學(xué)科專業(yè)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（口腔生物學(xué)）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院導(dǎo)師段小紅副教授資助基金項(xiàng)目資助基金項(xiàng)目國家自然科學(xué)基金（項(xiàng)目編號81070819）陜西省科技計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目編號2009K1706）關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞氟；成釉細(xì)胞；內(nèi)吞；吞噬；氯離子通道；凋亡；增殖中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一一年四月