簡介：蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個體和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名翟望』量日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻(xiàn)信息情報中心、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所含萬方數(shù)據(jù)電子出版社、中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在年月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名瘟塑墜日期導(dǎo)師簽名趁望劉日期

簡介：導(dǎo)師簡介研究生導(dǎo)師和課題指導(dǎo)小組成員介紹李勝，男，生于1969年2月，山東濟(jì)南人，研究員、碩士研究生導(dǎo)師、醫(yī)學(xué)博士；主要從事肝膽胰外科臨床和科研工作，具有扎實系統(tǒng)的基礎(chǔ)理論知識和豐富的肝膽外科診療工作經(jīng)驗；目前共完成本專業(yè)較復(fù)雜的手術(shù)數(shù)百例，如左、右半肝切除術(shù)，肝左三葉、右三葉切除術(shù)、肝尾狀葉切除術(shù)、胰十二指腸切除術(shù)和高位膽管癌切除術(shù)等肝膽胰腫瘤；熟練掌握了肝膽外科復(fù)雜、疑難病例的診治，處理較復(fù)雜的并發(fā)癥。科研工作中，目前為首承擔(dān)國家自然科學(xué)基金項目2項，進(jìn)行胰腺癌淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制方面的研究；并承擔(dān)山東省科技廳科研課題2項。獲山東省科技進(jìn)步三等獎3項。在國內(nèi)外公開醫(yī)學(xué)刊物上發(fā)表專業(yè)論文60余篇；其中SCI論文5篇IF累計達(dá)105分。課題指導(dǎo)小組成員姓名石學(xué)濤張波仲偉霞性別男男女出生年月196307196712196207職稱研究員副主任醫(yī)師研究員專業(yè)肝膽胰腫瘤外科肝膽胰腫瘤外科腫瘤病理診斷■■■■IR■I目錄中文摘要1英文摘要3主要符號表5￡一J一日J(rèn)舌“一”“‘“一“一?！耙弧薄?材料與方法9結(jié)果14討論17結(jié)論25參考文獻(xiàn)26綜述33攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果41致謝43

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文P物質(zhì)SP對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)及其與WNT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)系THEBIOLOGICALEFFECTSOFSUBSTANCEPSPONBONEMARROWSTROMALSTEMCELLSBMSCSANDMC3T3E1CELLSANDTHERELATIONSHIPWITHWNTSIGNALINGPATHWAY課題來源國家自然科學(xué)基金81171723學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員梅剛金丹主任醫(yī)師、副教授創(chuàng)傷骨科學(xué)術(shù)型碩士研究生第一臨床分會委員會白波教授歐陽鈞教授黃楓教授余斌教授王鋼教授倪國新教授金丹副教授陳濱副教授2014年5月26日廣州摘要GENERELATEDPEPTIDE，CGRP、神經(jīng)肽YNEUROPEPTIDEY含量明顯增加，提示我們在骨折愈合、骨重建中神經(jīng)肽類物質(zhì)可能起到重要作用。近些年來，在骨折愈合、骨組織再生中神經(jīng)肽類物質(zhì)的重要作用逐漸被人們重視，并成為國內(nèi)、外學(xué)者研究熱點之一。神經(jīng)肽是一種肽類物質(zhì)，由神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生具有神經(jīng)調(diào)節(jié)活性，其中，SP、CGRP、NPY是最具代表性的物質(zhì)。SP和CGRP是感覺神經(jīng)纖維分泌的兩種主要神經(jīng)肽；NPY是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中分布最廣、含量最高神經(jīng)肽之一，介導(dǎo)外周神經(jīng)系統(tǒng)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控的重要因子。SP作為一種可由骨骼感覺神經(jīng)元分泌的重要神經(jīng)遞質(zhì)，在骨生理調(diào)節(jié)中起到重要作用，神經(jīng)肽SP屬于速激肽，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)5種速激肽亞型，SP、速激肽A、速激肽B、速激肽C、速激肽K3種SP受體NKL、2和3受體，神經(jīng)肽SP在許多生理過程中的調(diào)節(jié)作用是通過NKL受體發(fā)揮作用的。目前的研究多集中在神經(jīng)肽對成骨細(xì)胞的影響，對成骨細(xì)胞的前體細(xì)胞一骨髓基質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWSTEMCELLS，BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的研究較少。BMSCS具有很強(qiáng)的增殖能力和多向分化的潛能，在骨生理中扮演著重要角色，在適宜的體外或者體內(nèi)環(huán)境中可被誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和造血細(xì)胞等多種細(xì)胞，是骨組織工程研究中的理想種子細(xì)胞；MC3T3E1細(xì)胞是成骨前細(xì)胞，具有一定的成骨特性，在適宜的體內(nèi)外環(huán)境中可以向成骨細(xì)胞分化，因而也經(jīng)常用作種子，應(yīng)用于骨組織工程。因此，闡明神經(jīng)肽對BMSCS、MC3T3E1細(xì)胞的具體作用有助于我們更全面地了解神經(jīng)肽在骨生理過程中發(fā)揮的作用，進(jìn)一步揭示神經(jīng)生物學(xué)骨再生過程中的作用機(jī)制。從分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的角度而言，探究SP究竟是通過何種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮其對BMSCS及MC3T3E1細(xì)胞的生物學(xué)調(diào)控效應(yīng)同樣重要。目前關(guān)于BMSCS及MC3T3E1成骨分化過程中SP的生物學(xué)作用及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究較少。WNT／P．CATENIN信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是目前骨骼系統(tǒng)相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制和骨代謝研究的熱點。WNTS蛋白與低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白LDLRECEPTORRELATEDPROTEIN，LRPFRIZZLEDS受體FZD受體復(fù)合體結(jié)合后，通過一系列胞質(zhì)蛋白DSH、GSK313、APC、AXIN等的相互作用，使得D．連環(huán)蛋白13CATENIN在胞質(zhì)穩(wěn)定并累積，II

簡介：芪參益氣滴丸是用于治療心血管疾病的一種口服滴丸中藥制劑。在臨床上有良好的改善心肌損傷、抑制心功能衰退效果，但其發(fā)揮治療作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究尚不夠深入。本研究針對此問題，首先從化學(xué)物質(zhì)組學(xué)的角度，初步探討芪參益氣滴丸的整體質(zhì)量控制及藥代動力學(xué)特征，從而明確其體內(nèi)主要活性物質(zhì)及變化規(guī)律；在此基礎(chǔ)上，通過建立心肌梗塞大鼠模型，對其整方的藥效學(xué)進(jìn)行系統(tǒng)研究，并結(jié)合計算機(jī)模擬篩選和生物芯片技術(shù)，對其網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)相關(guān)的主要作用通路及靶點進(jìn)行系統(tǒng)預(yù)測，從而為揭示其治療心肌梗塞的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制提供研究基礎(chǔ)。本研究首先對芪參益氣滴丸進(jìn)行了質(zhì)量評價研究。通過運用液相質(zhì)譜LCMS聯(lián)用技術(shù)，同時測定了黃芪甲苷、丹參素、原兒茶醛、人參皂苷RG1和RB1的含量；通過氣相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)GCMS對橙花叔醇、金合歡醇等9種揮發(fā)性成分進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定。在此基礎(chǔ)上，探討了包括黃芪甲苷、丹參素、人參皂苷RG1及RB1在內(nèi)的標(biāo)志性活性成分在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)行為，為芪參益氣滴丸的臨床合理化用藥提供實驗依據(jù)。其次，本課題對芪參益氣滴丸整方及組分包括丹參三七組、黃芪組、降香組進(jìn)行了藥效學(xué)研究。采用結(jié)扎大鼠心臟冠狀動脈左前降支方法構(gòu)建大鼠急性心肌梗塞模型，以腦鈉素BNP和心肌鈣蛋白ⅠCTNI為指標(biāo)檢測整方的藥效比較；結(jié)果表明，芪參益氣滴丸可明顯改善大鼠急性心梗癥狀。芪參益氣滴丸、丹七、黃芪組BNP和CTNI較模型組顯著下降P最后，通過應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)對芪參益氣滴丸中入血的17種成分進(jìn)行體內(nèi)作用靶點、靶點相關(guān)代謝通路的預(yù)測，結(jié)合芪參益氣滴丸前期生物芯片結(jié)果，發(fā)現(xiàn)藥物分子相關(guān)的98個體內(nèi)作用靶點及45條作用通路。對滴丸中的有效化學(xué)成分進(jìn)行了進(jìn)一步確定，說明滴丸中各種已知成分均對心肌梗塞有不同程度的治療作用，其主要藥效物質(zhì)皂苷類、黃酮類、酚酸類成分通過作用于心梗相關(guān)靶點及通路，發(fā)揮改善心肌梗塞癥狀的作用。

簡介：骨組織工程支架方面的研究中，當(dāng)前支架材料均有各自不足之處，獲得一種力學(xué)、生物學(xué)、形態(tài)學(xué)等方面均“完美”的理想支架材料是目前的研究熱點。各種材料中以聚乳酸羥基乙酸（PLGA）為代表的有機(jī)高分子生物材料因其較好的可塑成形性、可降解吸收性以及良好的生物相容性等優(yōu)點，應(yīng)用最為廣泛。而為了克服單純PLGA材料支架機(jī)械強(qiáng)度不足、細(xì)胞吸附力弱、降解時間偏長等缺點，本研究期望通過向PLGA中加入具有細(xì)胞誘導(dǎo)吸附力強(qiáng)、機(jī)械強(qiáng)度較高、降解較快的Β磷酸三鈣（ΒTRICALCIUMPOOSPHATE，ΒTCP），在冷凍干燥（FREEZEDRYING，F(xiàn)D）技術(shù)制成的形狀可塑殼聚糖明膠內(nèi)核外表面，采用靜電紡絲（ELECTROSPINNING，ES）立體包覆PLGAΒTCP納米纖維，從而生產(chǎn)出宏觀結(jié)構(gòu)可塑、微觀三維孔隙結(jié)構(gòu)豐富、成骨細(xì)胞親和性佳、降解時間適宜的新型復(fù)合材料支架。研究方法1分別以10組不同質(zhì)量比的PLGA和ΒTCP為溶質(zhì)（質(zhì)量比分別為100、91、82、73、64、55、46、37、28、19、010），以體積比為21的三氯甲烷丙酮混合液為溶劑，配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12％的10組紡絲液。采用靜電紡絲技術(shù)（電壓12KV，電極間距10CM）試制PLGAΒTCP納米纖維。制備出來的PLGAΒTCP納米纖維薄膜，采用接觸角測量儀測定不同組份的納米纖維親水性，液體置換法測定孔隙率，1％胰酶浸泡降解法測定降解性，從而選取親水性、孔隙率、降解時間各方面均衡的PLGAΒTCP配料比例。并利用掃描電鏡觀查纖維薄膜的微觀孔隙結(jié)構(gòu)。2以殼聚糖和明膠質(zhì)量比為11的混合物為溶質(zhì)，1％醋酸為溶劑，混勻后80℃冷凍干燥，制備出外觀質(zhì)地均勻、富含三維多孔隙結(jié)構(gòu)的內(nèi)核載體（可根據(jù)實際需要修裁外型）。將該內(nèi)核載體置于靜電紡絲接受電極端，以質(zhì)量比為73的PLGAΒTCP復(fù)合納米纖維噴涂包裹于外，制得最終成型的PLGAΒTCP納米纖維支架。3根據(jù)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，采用體外細(xì)胞毒性試驗（GBT1688652003）和溶血試驗（YYT012711993）評價成型PLGAΒTCP納米纖維支架生物安全性。4酶消化法獲取SD仔鼠原代成骨細(xì)胞，分別與殼聚糖明膠支架、PLGA納米纖維支架、PLGAΒTCP納米纖維支架進(jìn)行體外孵育培養(yǎng)，短時間培養(yǎng)為30MIN、60MIN和120MIN三個時間點，共孵育穩(wěn)定1天后，取出支架在無細(xì)胞血清培養(yǎng)基中再培養(yǎng)4D和8D。分別采用MTT（四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)）法檢測粘附于支架上的細(xì)胞新陳代謝活性，并利用掃描電鏡（SEM）觀察支架上細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)量及生物學(xué)形態(tài)。結(jié)果1PLGA與ΒTCP質(zhì)量比為100、91、82、73的4組可制得納米纖維，其余6組產(chǎn)物為細(xì)粉粒狀物，無法制得具有連續(xù)性的納米纖維，不能形成網(wǎng)狀三維結(jié)構(gòu)，因而不符合試驗要求。2在可制成納米纖維的4組中，隨著PLGAΒTCP混合材料中ΒTCP比例的增加，所得納米纖維材料的親水性能逐漸降低，孔隙密度逐漸增加，整體降解速度逐漸增快。故PLGA與ΒTCP質(zhì)量比為73時所獲得的PLGAΒTCP納米纖維材料最為理想。3細(xì)胞毒性實驗表明該種成型PLGAΒTCP支架無細(xì)胞毒性，溶血試驗結(jié)果顯示其溶血率小于5％，具有良好的血液相容性和生物安全性。4培養(yǎng)30MIN、60MIN和120MIN后，MTT實驗表明，共孵育同等時長時PLGAΒTCP納米纖維支架上粘附的成骨細(xì)胞吸光值最高，殼聚糖明膠組次之，PLGA納米纖維支架組最低。SEM觀察到PLGAΒTCP納米纖維支架上粘附的成骨細(xì)胞數(shù)量最多，殼聚糖明膠組次之，PLGA納米纖維支架組較少。5成骨細(xì)胞共孵育1D后，各組MTT值無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞005），SEM照片顯示各組中成骨細(xì)胞粘附良好，開始鋪展生長。在4D和8D時，PLGAΒTCP組MTT值均高于PLGA和殼聚糖明膠組（P＜005）。SEM照片顯示各組中成骨細(xì)胞狀態(tài)良好，平鋪層疊生長，可見細(xì)胞偽足向孔洞內(nèi)部生長，開始遷移，且PLGAΒTCP組中細(xì)胞數(shù)量明顯多于PLGA和殼聚糖明膠組。結(jié)論采用質(zhì)量比為73的PLGAΒTCP混合紡絲液，利用靜電紡絲技術(shù)可制得三維孔隙結(jié)構(gòu)豐富、成骨細(xì)胞吸附性強(qiáng)、降解時間適宜的納米纖維，輔以凍干法制備的殼聚糖明膠可塑性內(nèi)核，制得較為理想的PLGAΒTCP納米纖維支架。該支架具有可靠的生物安全性和良好的細(xì)胞相容性，同時還具有外型可塑性高，成骨細(xì)胞吸附性強(qiáng)，促細(xì)胞增殖能力佳，降解時間適宜等優(yōu)點。

簡介：華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文抑制成纖維細(xì)胞PTEN基因的表達(dá)及其對乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)影響姓名黃念念申請學(xué)位級別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師冷彥201104華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2方法方法將HELFPTEN與乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231共培養(yǎng)。（1）通過流式細(xì)胞儀對MDAMB231細(xì)胞進(jìn)行KI67檢測，檢測共培養(yǎng)體系對MDAMB231細(xì)胞增殖能力的影響；（2）5FU誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，通過ANNEXINV/PI流式細(xì)胞儀檢測共培養(yǎng)體系對MDAMB231細(xì)胞抗凋亡能力的影響；（3）通過明膠酶譜實驗驗證共培養(yǎng)體系的培養(yǎng)基中MMP蛋白的表達(dá)變化以及MMP活性率的改變；（4）通過TRANSWELL小室法，明確共培養(yǎng)體系對乳腺癌細(xì)胞MDAMB231遷移能力的影響；（5）用MATRIGEL模擬并重建基底膜，通過TRANSWELL小室法，建立成纖維細(xì)胞HELFPTEN與乳腺癌細(xì)胞MDAMB231的交互作用模型，觀察HELFPTEN對乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果結(jié)果（1）與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231其KI67表達(dá)較空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組顯著增高P005。（2）流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231具有拮抗5FU誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的作用，凋亡率明顯低于空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組P005。（3）明膠酶譜實驗檢測發(fā)現(xiàn)HELFPTEN以及乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231共培養(yǎng)的培養(yǎng)基中MMP蛋白的表達(dá)和MMP活性率均明顯高于空白培養(yǎng)組和“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組P005。（4）TRANSWELL遷移實驗發(fā)現(xiàn)，遷移的細(xì)胞數(shù)呈現(xiàn)以下趨勢與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231＞“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組＞MDAMB231細(xì)胞普通培養(yǎng)組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P005。（5）侵襲轉(zhuǎn)移能力比較發(fā)現(xiàn)與HELFPTEN共培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231＞“HELFMDAMB231”細(xì)胞共培養(yǎng)組＞MDAMB231細(xì)胞普通培養(yǎng)組，其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P005。結(jié)論結(jié)論成纖維細(xì)胞HELF可提升乳腺癌細(xì)胞MDAMB231的增殖、抗凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移能力，而PTEN表達(dá)受抑的HELF細(xì)胞，對MDAMB231的增殖、抗凋亡以及侵襲轉(zhuǎn)移能力的增加影響更大，并可明顯提升MMP蛋白的表達(dá)和活性率。因此，成纖維細(xì)胞中的抑癌基因PTEN有望成為腫瘤治療干預(yù)的新靶點。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞成纖維細(xì)胞；乳腺癌；PTEN；細(xì)胞增殖；侵襲轉(zhuǎn)移

簡介：純鈦及鈦合金具有良好的生物相容性和機(jī)械加工性能，為目前臨床應(yīng)用最廣泛的口腔種植材料，但鈦基種植體存在生物活性差，與骨結(jié)合強(qiáng)度低，愈合時間長及耐磨、耐腐蝕性差，在生理環(huán)境下易造成金屬離子釋放等問題，因此為了獲得更優(yōu)的純鈦種植體，需通過對鈦進(jìn)行表面改性來解決。本實驗采用微弧氧化技術(shù)，結(jié)合種植體表面改性一般原則及臨床應(yīng)用要求對純鈦表面進(jìn)行生物改性，并對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究。目的通過微弧氧化技術(shù)在不同電解液中對純鈦進(jìn)行表面改性，以得到2種不同化學(xué)組成的TIO2涂層，并對其進(jìn)行生物學(xué)特性研究分析，探討設(shè)計適于牙種植體的表面改性方法，為如何提高種植體表面的生物活性，改善其耐腐蝕性，促進(jìn)種植體與骨組織的早期結(jié)合，提高種植體成功率提供重要的理論依據(jù)。方法與結(jié)果1純鈦表面微弧氧化TIO2涂層的制各及涂層分析方法在目前對鈦合金微弧氧化MICROARCOXIDATIONMAO工藝研究基礎(chǔ)上，結(jié)合MAO原理與種植體臨床應(yīng)用要求，設(shè)計出特定的電參數(shù)與電解液配方，試件預(yù)處理后分別在2種不同化學(xué)組成的電解液中進(jìn)行微弧氧化處理，獲得2種TIO2涂層，分組為MAOCA組和MAOMG組，以掃描電鏡SEM觀察微弧氧化涂層的表面形貌；X射線能譜EDX和X射線衍射XRD儀分析膜層的元素構(gòu)成和晶相結(jié)構(gòu)；自動劃痕儀測量涂層結(jié)合強(qiáng)度；表面粗糙度儀測量涂層表面粗糙度。結(jié)果電鏡觀察表明在2種電解液中試件表面都形成了內(nèi)層致密，外層多孔的陶瓷膜；能譜分析證實這2種陶瓷膜分別由TI，CA，P，O4種元素和TI，MGO3種元素組成；X射線衍射表明陶瓷膜由銳鈦礦型與金紅石型TIO2及CATIO3和MGTIO3組成。結(jié)合強(qiáng)度分別達(dá)到265與287牛頓，表面粗糙度分別為O756與O691微米。2純鈦表面TIO2涂層在模擬體液中誘導(dǎo)磷灰石沉積的研究方法對含2種不同化學(xué)組成TIO2涂層的試件進(jìn)行模擬體液SBF浸泡實驗，在7，14，28天后取出試件，分別以掃描電鏡SEM對試件表面微觀形貌進(jìn)行觀察，并對試件表面元素成分及結(jié)構(gòu)進(jìn)行能譜EDS和X射線衍射XRD分析。結(jié)果電鏡觀察到MAOCA組涂層表面覆蓋大量沉積物，呈針狀結(jié)構(gòu)，能譜分析發(fā)現(xiàn)CA、P元素比例升高，X射線衍射證實表層物質(zhì)為羥基磷灰石HA結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)出誘導(dǎo)活性；MAOMG組未能誘導(dǎo)磷灰石沉積。3純鈦表面TIO2涂層生物學(xué)特性研究方法以2種涂層為實驗組進(jìn)行如下實驗1溶血實驗取新鮮兔血，以分光光度計測定光密度OD值，計算溶血率。2細(xì)胞毒性實驗采用L929成纖維細(xì)胞，以材料浸提液測定細(xì)胞毒性，以MTT法評測細(xì)胞活性情況，并計算細(xì)胞的相對增殖度RGR3成骨細(xì)胞粘附、增殖實驗結(jié)果溶血率分別為O81％和O96％，符合材料溶血要求；細(xì)胞相對增殖度均大于80％，無細(xì)胞毒性；成骨細(xì)胞在兩種涂層表面的早期貼附性明顯高于未經(jīng)處理的純鈦表面，但這兩種涂層間并無顯著性差異；MAOCA組涂層表現(xiàn)出較好的促成骨細(xì)胞增殖作用，MAOMG組涂層和光滑純鈦對成骨細(xì)胞增殖無明顯促進(jìn)作用。結(jié)論通過微弧氧化技術(shù)在不同電解液中對純鈦表面進(jìn)行生物改性后所得到的兩種TIO2涂層，均形成了一層與基體結(jié)合緊密，表面粗糙多孔的陶瓷膜，并使CA、P、MG元素分別進(jìn)入氧化層中，獲得了含有不同比例元素的活性氧化層。在本工藝處理下，材料表面血液相容性良好，無細(xì)胞毒性，可促進(jìn)成骨細(xì)胞的早期附著，具有較好的生物活性。而MAOCA組涂層還可在體外環(huán)境下，誘導(dǎo)磷灰石沉積并促進(jìn)成骨細(xì)胞早期增殖性的提高。

簡介：點擊查看更多外源基因CXCR4轉(zhuǎn)染對山羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)生物學(xué)特性影響的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目錄L微直流電刺激對成骨細(xì)胞生物學(xué)性能影響的體外實驗研11中文摘要112英文摘要313前言614材料與方法815結(jié)果OOOOOOOOOQOOOOOOOO1616討論2017結(jié)論OOOOOOOOOOOO0000003018參考文獻(xiàn)OOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOO3219英漢縮略詞對照表372致謝OOOOOOOOOOOOOOO000000000383電刺激促進(jìn)牙槽骨生長的研究進(jìn)展綜述OOOOOO39微直流電刺激對成骨細(xì)胞生物學(xué)性能影響的體外實驗研究摘要目的通過對體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞施加不同強(qiáng)度的直流電刺激，探討微量直流電對成骨細(xì)胞增殖和功能的影響，為口腔修復(fù)臨床應(yīng)用直流電促進(jìn)牙槽骨生長提供體外細(xì)胞學(xué)依據(jù)。方法自行設(shè)計研制體外成骨細(xì)胞直流電刺激裝置將電源、滑動變阻器、開關(guān)、六孔培養(yǎng)板固定在一塊300MMX200MM的有機(jī)玻璃板上，并把電路串聯(lián)起來，在六孔培養(yǎng)板每孔所對應(yīng)的板蓋上打兩個小孔，將鎳鈦弓絲一端與電路連接，另一端穿過培養(yǎng)板蓋浸入培養(yǎng)液內(nèi)，將電路接通，于通電后LOMIN，30MIN，50MIN時用萬用表測定電路中電流的強(qiáng)度，經(jīng)檢測電流穩(wěn)定，絕對誤差在3PA內(nèi)。通過組織塊法原代分離培養(yǎng)新生SPRAGUEDAWLEY大鼠顱項骨的成骨細(xì)胞，傳代培養(yǎng)至第三代進(jìn)行堿性磷酸酶ALKALINEPHOSPHATASE，ALP染色鑒定。純化后擴(kuò)增成骨細(xì)胞，傳代培養(yǎng)至第四代或第五代備用。實驗第一部分，將細(xì)胞按10X105個／孔的濃度接種于六孔培養(yǎng)板中，每板接種四孔，每孔2ML。實驗分為三組，微電流對三組細(xì)胞刺激的強(qiáng)度分別為O“A、201上A和100肛A，每天刺激三次，于微電流刺激的第1天，第3天，第5天，第7天時分別收集三組細(xì)胞，用MTT法測定三組成骨細(xì)胞的數(shù)量，之后重復(fù)該實驗兩次，用SPSSL60軟件將所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析并繪制細(xì)胞增殖曲線；實驗第二部分，細(xì)胞分組及接種的方法同第一部分，之后于微直流電刺激的第L天，第3天，第5天，第7天時收集三個實驗組的成骨細(xì)胞測定其ALP活性，重復(fù)該實驗兩次，將實驗所得數(shù)據(jù)用SPSSL60軟件進(jìn)

簡介：隨著我國水產(chǎn)加工業(yè)的發(fā)展，特別是魚糜制品產(chǎn)量的不斷增加，水產(chǎn)加工原料的品質(zhì)控制變得尤為重要。為了保護(hù)某些種群，確保食品生產(chǎn)嚴(yán)格遵照規(guī)范進(jìn)行，同時避免假冒現(xiàn)象，保護(hù)消費者權(quán)益，水產(chǎn)制品中魚種的鑒別已經(jīng)成為消費者和質(zhì)量檢測部門共同關(guān)注的熱點。鑒于魚糜制品水產(chǎn)加工程度較高，經(jīng)各工序如高溫、切割、添加調(diào)料和色素等處理后，已很難通過形態(tài)、味覺等常規(guī)感官鑒定方法對其魚種進(jìn)行準(zhǔn)確的辨別，而對于食品中原料成分的鑒定，我國至今還缺乏相關(guān)的檢測標(biāo)準(zhǔn)。因此，必須盡快摸索建立一條有效、實用的魚種鑒定技術(shù)。本文探索了利，用分子生物學(xué)技術(shù)來檢測魚糜制品中原料魚種，通過PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，對水產(chǎn)品MTDNA中的16SRRNA基因片段進(jìn)行測序，對魚種進(jìn)行鑒別。本文先對新鮮的活魚通過上面的方法進(jìn)行了鑒定，通過比對，發(fā)現(xiàn)實驗所得序列與基因庫中的序列相吻合，說明該法用于魚種鑒別是可行的。然后以食品學(xué)院自制的白鰱魚丸及超市購買回來的含有兩種組分的鱈魚丸、章魚餅和國外蟹柳作為原料，采用普通酚氯仿抽提法進(jìn)行基因組DNA提取、選用16SRRNA基因作為目的基因，利用16SARL2510CGCCTGTTTATCAAAAACAT和16SBRH3080CCGGTCTGAACTCAGATCACGT兩條序列作為引物，對16SRRNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增、克隆、測序，從而獲得原料產(chǎn)品的16SRRNA基因部分片段序列，通過運用BLAST。軟件，將16SRRNA部分片段序列和GENBANK中更多的序列進(jìn)行比較，找到相似性最高的序列，根據(jù)同源性理論，做出魚種鑒定。通過實驗，本文確立了魚糜制品基因組DNA的提取方法、優(yōu)化了PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系、PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件。對最終測序獲得的16SRRNA基因部分片段序列，運用CLUSTWALW軟件進(jìn)行序列比對時發(fā)現(xiàn)自制白鰱魚丸的16SRRNA基因部分片段序列與白鰱肌肉的保持一致。而對于超市買回的魚糜制品含有豬肉和魚糜，運用BLAST軟件，將獲得的序列與GENBANK中的序列進(jìn)行同源性比較時，結(jié)果顯示該產(chǎn)品中含有兩種組分，一種是名為鯛魚的成分，另外一種是豬肉組分。章魚餅中的章魚餡料為OCTOPUSVARIABILIS，產(chǎn)品符合產(chǎn)品說明。國外蟹柳該產(chǎn)品含有鱈魚成分，與標(biāo)簽說明一致。由以上結(jié)果說明該法對于魚糜制品中的原料魚種的鑒定具有可行性。

簡介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文重組人釉原蛋白和豬釉基質(zhì)蛋白對人成纖維重組人釉原蛋白和豬釉基質(zhì)蛋白對人成纖維細(xì)胞生物學(xué)特性作用的比較研究細(xì)胞生物學(xué)特性作用的比較研究碩士研究生碩士研究生林智愷學(xué)號學(xué)號0553002導(dǎo)師束蓉教授學(xué)位專業(yè)學(xué)位專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向研究方向牙周病學(xué)培養(yǎng)單位培養(yǎng)單位上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院答辯日期2012年05月授予學(xué)位單位授予學(xué)位單位上海交通大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院資助基金項目資助基金項目國家自然基金（81070838，30801292）關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞重組人釉原蛋白，豬釉基質(zhì)蛋白，成纖維細(xì)胞，增殖，粘附，遷移上海交通大學(xué)上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日

簡介：SOOCHOWUNIVERSITY博士學(xué)位論文論文題目胎盤羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及細(xì)胞移植對膠質(zhì)瘤生長抑制作用的實驗研究研究生姓名余水長指導(dǎo)教師姓名夏春林專業(yè)名稱人體解剖與組織胚胎學(xué)研究方向神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生與分化及相關(guān)疾病論文提交日期2014年3月

簡介：蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名至立邀日期2Z笙二二2RTIM3在胃癌免疫細(xì)胞上表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)功能的初步研究中文摘要TIM一3在胃癌免疫細(xì)胞上表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)功能的初步研究中文摘要中又兩斐TIM3是重要的免疫調(diào)節(jié)分子，在腫瘤進(jìn)展和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。然而不同免疫細(xì)胞上TIM3表達(dá)的臨床意義和生物學(xué)作用還知之甚少。本研究通過臨床標(biāo)本檢測和體內(nèi)外功能研究，分析了TIM3在胃癌免疫細(xì)胞表達(dá)的臨床意義，調(diào)控機(jī)制和生物學(xué)功能。第一部分胃癌患者NK細(xì)胞上TIM3異常表達(dá)及臨床意義目的擬通過檢測胃癌患者體內(nèi)免疫細(xì)胞上TIM3的表達(dá)情況，結(jié)合臨床資料分析該分子表達(dá)與胃癌進(jìn)展的關(guān)系。方法收集初診胃癌患者和健康對照組的外周血以及對應(yīng)的癌組織和癌旁正常組織，流式細(xì)胞術(shù)分析TIM一3在CD56NK細(xì)胞上表達(dá)，并結(jié)合臨床資料分析該分子表達(dá)的臨床意義。利用GAL9蛋白體外激活NK，觀察該分子對NK生物學(xué)功能的影響。為進(jìn)一步驗證臨床中觀測到的現(xiàn)象，繼而開展了相應(yīng)的動物學(xué)實驗。首先利用胃癌細(xì)胞株MCF皮下移植瘤構(gòu)建荷瘤小鼠模型，于荷瘤不同時間點，檢測外周血和腫瘤組織浸潤的NK上TIM3動態(tài)表達(dá)情況。隨后利用TBET√一基因敲除小鼠、EOMES乒基因敲除小鼠和TBET斗聯(lián)合EOMES斗雙基因敲除小鼠，以WT小鼠作為對照，分析核轉(zhuǎn)錄因子TBET和EOMES在調(diào)控NK細(xì)胞表達(dá)TIM一3中否發(fā)揮了作用。結(jié)果無論健康對照組還是胃癌患者，在外周淋巴細(xì)胞群體中TIM3主要表達(dá)于NK細(xì)胞而非B細(xì)胞或T細(xì)胞。擴(kuò)大樣本進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，胃癌患者NK細(xì)胞上TIM一3表達(dá)則顯著高于健康對照組，兩者存在統(tǒng)計學(xué)差異。體外功能學(xué)實驗證實，在RHLL12刺激條件下，配體GAL9RHGAL9；GALPHARMA激活TIM一3，可以顯著促進(jìn)IFN吖分泌。動物實驗表明，隨著腫瘤負(fù)荷增加，外周血、脾臟和腫瘤組織中NK表達(dá)TIM一3水平均隨之顯著增加。表達(dá)調(diào)控分子發(fā)現(xiàn)，TBET而非EOMES在NK調(diào)控TIM一3

簡介：手足口病是一類主要由小RNA病毒科腸道病毒屬病毒引起的傳染病主要感染對象是嬰幼兒ENTEROVIRUS71EV71與COXSACKIEVIRUSA16CVA16是引起手足口病的兩個最主要病原體。在2009年1月至2011年5月期間我國發(fā)現(xiàn)的由EV71流行引起的感染病例超過了200萬其中約有1000人死亡。并且EV71的感染者常常會產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)疾病而CVA16導(dǎo)致的手足口病則不會有嚴(yán)重的并發(fā)癥。所以針對EV71的研究備受人們關(guān)注。EV71病毒為單股正鏈RNA病毒基因組約有75KB。該基因組編碼一個約250KDA的多聚蛋白這個多聚蛋白被自身產(chǎn)生的2A蛋白酶2APRO和3C蛋白酶3CPRO切割產(chǎn)生11個成熟的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。其中以RNA為模板的RNA聚合酶RNADEPENDENTRNAPOLYMERASERDRP即水解后所產(chǎn)生的3DPOL主要負(fù)責(zé)病毒的復(fù)制是抗病毒藥物設(shè)計的主要靶點之一。解析出3DPOL的結(jié)構(gòu)再根據(jù)結(jié)構(gòu)特征篩選出特異性的抑制劑對防治手足口病具有重要意義。我們將3DPOL構(gòu)建在了實驗室改造的含有TEV蛋白酶酶切位點的PGEX4T1上來表達(dá)蛋白并通過GST親和層析、離子交換和分子篩純化獲得了較純的蛋白。在篩選了大約1800個結(jié)晶條件并對有效條件進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化后獲得了衍射結(jié)果較好的蛋白晶體。通過在上海同步輻射光源SSRF的衍射實驗我們獲得的3DPOKL分辨率達(dá)到了24A。這對基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計篩選抗EV71藥物具有重要意義。

簡介：碩士學(xué)位論文窨級EGFR突變與晚期肺腺癌生物學(xué)特性及TKLS療效關(guān)系研究BIOLOGICALCHARACTERISTICSANDEGFRTKISRESPONSEINLUNGADENOCARCINOMAASSOCIATED、’7ITHTHEEGFRMUTATIONANDITSSUBTYPES研究生學(xué)科專業(yè)學(xué)院系、所指導(dǎo)老師E文答辯日期矽N．S毯陸蓉莉呼吸內(nèi)科湘雅醫(yī)院胡成平教授以J夢書答辯委員會主席’I大學(xué)≠五月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論又是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者々；；名煞重玉LJ期址年￡列二￡日’】學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱學(xué)校可以公布學(xué)位淪文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。作行溉斗緝引M簦名鹽灘慨勘C蘭年9蠣