簡介：上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文乳腺癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及調(diào)控機(jī)制研究姓名黃明主申請學(xué)位級別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師張鳳春20090401上海交通人學(xué)醫(yī)學(xué)院2006級博士研究生論文單層培養(yǎng)細(xì)胞中CD44CD24胡OW的比例為204O1％，而來源不同狀態(tài)的MCF7細(xì)胞進(jìn)行微球體培養(yǎng)，微球體細(xì)胞中CD44CD24卅刪的比例分別為118403％和824O8％，胙001。MDAMB23L及原代乳腺癌細(xì)胞中CD44CD24譏刪的表達(dá)分別為922431％和938424％。結(jié)論MCF7細(xì)胞通過微球體培養(yǎng)富集了腫瘤干細(xì)胞，而MDAMB231及原代乳腺癌細(xì)胞則不能。MDAMB231及原代乳腺癌細(xì)胞中CD44CD24舶W的表達(dá)與微球體形成不呈正相關(guān)。二、表阿霉素對乳腺癌微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞作用的比較目的探討表阿霉素對乳腺癌微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞的不同作用。方法MCF7細(xì)胞在干細(xì)胞培養(yǎng)條件下進(jìn)行微球體培養(yǎng)，噻唑藍(lán)THIAZOLYLBLUE，MTT法檢測表阿霉素對MCF一7微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞的抑制率，流式細(xì)胞術(shù)分析表阿霉素作用下，MCF7微球體細(xì)胞和單層培養(yǎng)細(xì)胞中CD44CD24。的表達(dá)及細(xì)胞周期變化。結(jié)果相同濃度100NG／ML的表阿霉素對MCF7微球體細(xì)胞的抑制率明顯低于對單層培養(yǎng)細(xì)胞的抑制率，腳01；400NG／IJL的表阿霉素作用72H，MCF7微球體細(xì)胞的CD44CD24帕W比例為228448％，高于單層培養(yǎng)細(xì)胞334O8％，氏O01；MCF7微球體細(xì)胞含有較高比例的G0／G1期74334320％細(xì)胞，高于MCF7單層培養(yǎng)細(xì)胞53404345％，氏001，表阿霉素對微球體細(xì)胞與單層培養(yǎng)細(xì)胞的G0／GI期影響較小，但顯著影響S

簡介：Y。警踟7墨?！觥籣分類毒一密緞T二‘U口C；三I每貸塞纏號_；壬I“’學(xué)‘一__位論掣A辨EN9ESI號；白藜蘆醇誘導(dǎo)髓母紐胞瘤細(xì)胞NF一曲括化_J、一√、眵蜷意激析’，，I’、”。_。一J范少華，，R|。，一，。?！?。，1“大連醫(yī)科大學(xué)7一1，～’。H，學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者及指導(dǎo)教師完全_『解大連醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意大連醫(yī)科大學(xué)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。論文作者簽名塹窆竺指導(dǎo)教師簽名主LI互簽字日期D6年6月歹日FRR

簡介：納米材料由于其獨(dú)特的理化性質(zhì)，且不能用常規(guī)的方法和手段進(jìn)行檢測，可能會(huì)對人體及生態(tài)環(huán)境造成污染，從而危及人類健康，因而有必要對其健康效應(yīng)進(jìn)行研究。本論文選用三種納米材料，分別是應(yīng)用較為廣泛的納米TIO、多壁碳納米管MWNT和納米鐵顆粒。由于納米顆粒主要通過呼吸系統(tǒng)進(jìn)入人體，所以本實(shí)驗(yàn)主要研究納米材料對生物體肺部的影響。采用非暴露式氣管內(nèi)注人法對昆明種KM小鼠染毒，所有材料的染毒劑量為10MGKGBW和1MGKGBW，生理鹽水對照組小鼠每只注入01ML生理鹽水，染毒三次，第十天處死小鼠，并進(jìn)行肺泡灌洗，測定肺泡灌洗液BALF中的白細(xì)胞總數(shù)、乳酸脫氫酶LDH活力、羥脯氨酸酶HYP含量、肺臟器系數(shù)，對肺做病理切片觀察，并對小鼠體重變化率進(jìn)行比較，分別考察三種納米材料各自的生物學(xué)效應(yīng)，最后對三種納米材料的生物學(xué)效應(yīng)進(jìn)行比較。通過實(shí)驗(yàn)得出如下結(jié)果1納米TIO10MGKGBW組體重增長率最低，其他各指標(biāo)均高于對照組和納米TIO1MGKGBW組，差異顯著P10MGKGBW組臟器系數(shù)、LDH活力、HYP含量均高于常規(guī)TIO10MGKGBW組，差異顯著P10MGKGBW組白細(xì)胞數(shù)目高于常規(guī)TIO10MGKGBW組74710，但差異無顯著性。病理形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示，納米TIO10MGKGBW組引起肺部明顯病變。2MWNT10MGKGBW組體重增長率最低，其它各指標(biāo)均高于對照組和納米1MGKGBW組，差異顯著P10MGKGBW組LDH活力最高，MWNT10MGKGBW組HYP含量最高。納米TIO10MGKGBW組和MWNT10MGKGBW組均導(dǎo)致肺大泡形成和肺實(shí)變發(fā)生，但納米TIO10MGKGBW組使得小鼠肺呼吸性細(xì)支氣管上皮消失，而MWNT10MGKGBW組只發(fā)現(xiàn)細(xì)支氣管、呼吸性細(xì)支氣管內(nèi)有MWNT沉積，未發(fā)現(xiàn)上皮黏膜的損壞。對結(jié)果進(jìn)行分析，得出如下結(jié)論1相同的實(shí)驗(yàn)條件下，納米級TIO比常規(guī)TIO更能引起嚴(yán)重的肺部急性損傷，納米TIO高劑量對肺部損傷作用比低劑量組更加明顯。2MWNT對小鼠肺造成一定的急性損傷作用，并且其高劑量組各指標(biāo)高于低劑量組，對生物體健康構(gòu)成潛在威脅。3納米鐵對小鼠肺造成一定的急性損傷作用，并且其高劑量組各指標(biāo)高于低劑量組，對生物體健康構(gòu)成潛在威脅。4同劑量下納米TIO、MWNT、納米鐵三種材料在體重變化率、LDH活力、HYP含量上存在顯著差異，表明不同材料的納米級顆粒物的肺毒性存在差異，作用機(jī)制也不相同。

簡介：中山大學(xué)博士學(xué)位論文陰道毛滴蟲與人型支原體共生關(guān)系及其相關(guān)生物學(xué)特性的研究姓名肖建春申請學(xué)位級別博士專業(yè)動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師倫照榮20060601肖建春陰道毛滴蟲與人型支原體共生關(guān)系及“相關(guān)生物學(xué)特性的研究中山大學(xué)博士學(xué)位論2006P00038及感染人型支原體PO033這兩種表型與蟲株在捌狀聚類圖上的位置有明顯的相關(guān)性。而ITS的點(diǎn)突變與人型支原體感染和甲硝唑抗性之間沒有明顯的相關(guān)性P005。我們的研究結(jié)果顯示人型支原體在毛滴蟲體內(nèi)的共生顯著地影響了毛滴蟲的RAPD圖譜，0002及其后的分子進(jìn)化分析PO003。通過分析用強(qiáng)力霉素處理前后感染人型支原體的陰道毛滴蟲的RAPD的圖譜變化，發(fā)現(xiàn)圖譜中336％的擴(kuò)增條帶是來源于人型支原體，而且人型支原體去除后，毛滴蟲蟲株間的遺傳相似系數(shù)從70％增加到75％J，O003，顯示它們有著更為密切的遺傳關(guān)系。利用蟲株處理前后的RAPD數(shù)據(jù)構(gòu)建的6株陰道毛滴蟲的系譜樹狀圖，顯示出不同的聚類方式PO003。因此，我們認(rèn)為，使用RAPD方法分析毛滴蟲的基因多態(tài)性時(shí)，應(yīng)首先檢測其是否感染人型支原體，以免得出錯(cuò)誤的結(jié)淪。陰道毛滴蟲蛋白水解酶分析結(jié)果表明，水解酶的活性表現(xiàn)出強(qiáng)烈的PH依賴性，表現(xiàn)在毛滴蟲具有強(qiáng)烈的酸性蛋白水解酶活性，但缺乏堿性蛋白水解酶活性。蟲株堿性蛋白水解酶的缺乏可能是生物適應(yīng)環(huán)境長期進(jìn)化的結(jié)果。雖然，每個(gè)蟲株的酸性蛋白水解酶譜都比較近似，但活性有顯著差異。我們的結(jié)果提示毛滴蟲可能通過降解特異抗體IGG來逃避宿主對它的攻擊，其降解能力呈現(xiàn)時(shí)問和濃度依賴性，且不同蟲株降解LGO的能力有量的差別。率先利用MGEPCR方法研究陰道毛滴蟲蟲株問的分子差異，結(jié)果顯示MGEPCR較之RAPD分析可檢測到蟲株間更多的遺傳變異度平均遺傳距離分別為493％和314％，該法具有良好的穩(wěn)定性與重復(fù)性。因此，MGE可作為種內(nèi)遺傳變異的分子標(biāo)記，為毛滴蟲診斷及進(jìn)化關(guān)系分析等提供更多的理論依據(jù)。通過分析流行中國廣州的陰道毛滴蟲蟲株的核糖體基因序列ITS、28SRRNA，進(jìn)一步確證它們的高度保守性，同時(shí)表明了雖然毛滴蟲是一種古老的真核生物，但可能是最近才開始出現(xiàn)分歧。本論文首次發(fā)現(xiàn)陰道毛滴蟲感染人型支原體與其甲硝唑抗藥性之問存在相關(guān)性，這一發(fā)現(xiàn)對陰道毛滴蟲流行病學(xué)及其相關(guān)的基礎(chǔ)研究具有重要的指導(dǎo)意義。通過深入研究人型支原體在陰道毛滴蟲體內(nèi)的共生對毛滴蟲分子進(jìn)化的影響，表明共生的人型支原體顯著地改變了毛滴蟲的分子圖譜分析的結(jié)果，指出使用RAPD方法分析毛滴蟲的基因多態(tài)性時(shí)，有必要檢測其是否感染人型支原體。本研究不但填補(bǔ)了國內(nèi)陰道毛滴蟲蛋白水II

簡介：目的研究MDS來源的成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性及其體外造血支持能力，探討成骨細(xì)胞在MDS發(fā)病中的作用方法1第一部分采用酶聯(lián)免疫夾心ELISA法檢測12例MDS患者骨髓上清液中SDF1A水平，探討MDS骨髓微環(huán)境是否存在異常。2第二部分以人成骨細(xì)胞系HFOB119為對象，研究成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，初步探討成骨細(xì)胞在造血調(diào)控中的作用。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM分析人成骨細(xì)胞系HFOB119的免疫表型，RTPCR檢測生長因子的表達(dá)情況。3第三部分研究MDS來源的成骨細(xì)胞的生物學(xué)特性，探討成骨細(xì)胞在MDS發(fā)病中的作用。采集MDS患者和正常供者骨髓標(biāo)本，分離、培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELL，MSC，進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、免疫表型及成纖維細(xì)胞集落CFUF形成分析。取第3代MSC體外誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞，絲裂霉素C處理后做為滋養(yǎng)層細(xì)胞。在無外源性細(xì)胞因子的條件下，將經(jīng)FICOLL分離獲取的正常供者來源的單個(gè)核細(xì)胞MNC接種到成骨細(xì)胞上共培養(yǎng)，研究成骨細(xì)胞體外支持造血祖細(xì)胞生存的作用；應(yīng)用RTPCR在MRNA水平上分析由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的成骨細(xì)胞生長因子的表達(dá)情況。結(jié)果1第一部分MDS難治性貧血伴有原始細(xì)胞增多RAEB組患者骨髓上清液中SDF1A水平明顯低于難治性貧血RA環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞性難治性貧血RAS組及對照組均P005。2第二部分FCM顯示，HFOB119表達(dá)CD44、CD73SH3、CD105SH2及CD90THY1，而不表達(dá)CD34、CD45、HLADR等造血細(xì)胞標(biāo)記；RTPCR顯示HFOB119表達(dá)OCT4、REX1等胚胎干細(xì)胞標(biāo)志但不表達(dá)HTERT，并經(jīng)證實(shí)具有多向分化的潛能，此外HFOB119還能表達(dá)SCF，IL6，IL11，SDF1，GMCSF和GCSF等多種生長因子。3第三部分MDS患者M(jìn)SC在體外呈典型的成纖維樣細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞形態(tài)和生長模式與正常供者來源的MSCS無明顯差異。MDS患者和正常供者骨髓細(xì)胞的成纖維集落形成能力CFUF也沒有差異P005。和MNC共培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)MDS患者來源的成骨細(xì)胞在無外源性細(xì)胞因子的情況下仍能夠短期3周維持GMCFC造血祖細(xì)胞的存活。MDS成骨細(xì)胞組培養(yǎng)上清中的細(xì)胞形成的CFUGM集落數(shù)與對照組比較無明顯差異P005。RTPCR發(fā)現(xiàn)，正常供者來源的MSC表達(dá)SCF，IL6，IL11，SDF1等生長因子MRNA，當(dāng)誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞時(shí)開始表達(dá)GCSFMRNA，但始終未見GMCSF表達(dá)。MDS患者來源的MSCS也能表達(dá)上述生長因子的MRNA，當(dāng)誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞后開始表達(dá)GCSFMRNA，同樣未見GMCSF表達(dá)。結(jié)論1MDS患者SDF1CXCR4系統(tǒng)存在異常，檢測SDF1A水平可能有助于MDS的診斷、判斷其預(yù)后，并為治療MDS提供新思路。2人成骨細(xì)胞系HFOB119可能是處于較早階段的成骨祖細(xì)胞，表達(dá)多種造血相關(guān)的生長因子，成骨細(xì)胞可能對骨髓正常造血具有重要的調(diào)控作用。3MDS患者來源的成骨細(xì)胞表達(dá)多種造血相關(guān)的生長因子，并能維持GMCFC造血祖細(xì)胞的存活，提示MDS的病變可能并不累及成骨細(xì)胞。

簡介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文一種新型結(jié)直腸癌單克隆抗體的制備與生物學(xué)特性鑒定姓名陳曦申請學(xué)位級別碩士專業(yè)人體解剖學(xué)與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師周德山20070501

簡介：福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MIR21、MIR98、MIR328和MIR494在喉鱗癌中的表達(dá)及其與腫瘤生物學(xué)特性的關(guān)系姓名鄧晶申請學(xué)位級別碩士專業(yè)耳鼻咽喉頭頸外科指導(dǎo)教師程金妹林功標(biāo)20100301ABSTRACTOBJECTIVETOINVESTIGATETHEEXPRESSIONOFMIR21、MIR一98、MIR一328ANDMIR一494INTHELARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCINOMAANDEXPLORETHEIRRELATIONSHIPSWITHBIOLOGICALBEHAVIORS，F(xiàn)ORFINDINGPATHOGENESISANDDEVELOPMENTOFLARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCINOMAANDTHEORYFORCLINICMOLECULARBIOLOGYTHERAPYMETHODSUSINGTAQMANMIRNAASSAYSTODETECTTHEEXPRESSIONLEVELSOFMIRNASINTHELARYNGEALSQUAMOUSCARCINOMAANDADJACENTTUMORNORMALTISSUESANDDISCUSSTHEIRASSOCIATIONSBETWEENMIRNASANDTUMORBIOLOGICALCHARACTERSACCORDINGTOTHEIRCLINICDATASRESULTS1DIFFERENTEXPRESSIONLEVELSOFMIR一21，MIR一98，MIR328ANDMIR一494AREDETECTEDINTHELARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCINOMAANDADJACENTTUMORNORMALTISSUESANDEXPRESSIONLEVELOFMIR21ISHIGHERTHANOTHERMIRNAS’2THEEXPRESSIONLEVELOFMIR21ISHIGHERINTHELARYNGEALCELLSQUAMOUSCARCINOMATHANTHESEINTHEADJACENTTUMORNORMALTISSUESP0053THEEXPRESSIONLEVELOFMIR一21INTHETUMORSHAVERELATIONSHIPSWITHTNMSTAGINGHC9272P005ANDCILNICSTAGEU1328，PO05【CONCLUSIONS】THEHIGHEREXPRESSIONSOFMIR21INTHECARCINOMA，THEHIGHERPOSSIBILITYFORTUMORMETASTASIS，ANDTHEEXPRESSIONOFMIR21HAVERELATIONSHIPSWITHTUMORTNMSTAGINGANDPATHOLOGYGRADE，HAVENELATIONSHIPSWITHSMOKINGANDCILNIESTAGE；MIR一21ISRELATEDTOTHEPATHOGENISISANDDEVELOPMENTOFLARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCINOMAANDMAYBERELATEDTOITSPROGNOSISMIR98，MIR328ANDMIR一494HAVEPROBABLYNELATIONSHIPSWITHTHEFORMATIONOFTHELARYNGEALSQUAMOUSCELLCARCINOMAKEYWORDSLARYNGEALSQUARNOUSCELLCARCINOMA；MIRNAS5

簡介：R7342密級密級培美曲塞聯(lián)合索拉非尼對肺癌細(xì)胞株的生物學(xué)作用及其機(jī)制探討培美曲塞聯(lián)合索拉非尼對肺癌細(xì)胞株的生物學(xué)作用及其機(jī)制探討THEEFFECTOFCOMBINEDADMINISTRATIONOFPEMETREXEDSAFENIBITSMECHANISMINNSCLCCELLLINES作者姓名蔣延文學(xué)科專業(yè)呼吸病學(xué)導(dǎo)師陳良安教授答辯委員會(huì)主席趙鳴武論文答辯日期二0一二年五月三十日院校地址北京市復(fù)興路28號郵政編碼100853作者姓名蔣延文學(xué)科專業(yè)呼吸病學(xué)導(dǎo)師陳良安教授答辯委員會(huì)主席趙鳴武論文答辯日期二0一二年五月三十日院校地址北京市復(fù)興路28號郵政編碼100853目錄目錄中文摘要1英文摘要2前言4正文7第一部分第一部分培美曲塞和索拉非尼不同用藥方式對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長的抑制作用培美曲塞和索拉非尼不同用藥方式對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長的抑制作用第一節(jié)A549和H1975細(xì)胞株EGFR、KRAS基因突變檢測分析1、材料72、方法83、結(jié)果124、討論195、結(jié)論19第二節(jié)培美曲塞和索拉非尼IC50值的確定1、材料202、方法213、結(jié)果224、討論225、結(jié)論24第三節(jié)培美曲塞和索拉非尼不同給藥方式對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長的抑制作用1、材料252、方法263、結(jié)果284、討論315、結(jié)論33第四節(jié)聯(lián)合用藥指數(shù)分析培美曲塞和索拉非尼不同給藥方式對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株生長的抑制作用

簡介：目的從胎盤組織中分離培養(yǎng)獲得間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS已成為干細(xì)胞研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)。MSCS在胎盤的分布并不均衡，如何取材直接影響到胎盤問充質(zhì)干細(xì)胞PLACENTADERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLS，PMSCS在體外的有效獲取及擴(kuò)增。目前尚無特異性的標(biāo)記物可用于成體MSCS的識別。本實(shí)驗(yàn)旨在利用一些通用的MSCS標(biāo)記物，探索MSCS在人胎盤的分布規(guī)律，并在此基礎(chǔ)上通過分組分離培養(yǎng)PMSCS，觀察細(xì)胞生物學(xué)的特性，初步驗(yàn)證其規(guī)律，為MSCS的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用奠定良好的基礎(chǔ)。方法取無指征剖宮產(chǎn)之足月健康產(chǎn)婦的新鮮胎盤組織，按中央帶A、中間帶B和邊緣帶C、絨毛板層A、中間層B和基底板層C分為九組AA、AB、AE、BA、BB、BE、CA、CB、CC，連續(xù)切片，以CDL66、CD44、CD29分別做免疫熒光和免疫組化染色。顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞分布區(qū)域，采用HPIAS1000彩色病理圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行圖象分析，檢測陽性細(xì)胞區(qū)域的光密度值OD，以平均光密度值作為衡量表達(dá)強(qiáng)弱的標(biāo)準(zhǔn)。所測數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行分析。再按上述分組取材分離培養(yǎng)PMSCS，觀察各組細(xì)胞增殖情況有無差異，進(jìn)一步驗(yàn)證上述標(biāo)記物定位的可靠性；同時(shí)檢測所培養(yǎng)細(xì)胞的表面抗原，誘導(dǎo)傳代后的細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化，證實(shí)其具有MSCS的特點(diǎn)。結(jié)果1首次證實(shí)3個(gè)標(biāo)記物CDL66、CD44、CD29陽性表達(dá)細(xì)胞的分布情況較一致，主要集中于血管內(nèi)皮下及血管附近間質(zhì)內(nèi)，胎盤中央帶中間層AB陽性細(xì)胞較集中，陽性表達(dá)的強(qiáng)度較強(qiáng)，其OD值與其它組相比差異有顯著性P＜005，邊緣帶陽性細(xì)胞稀少，陽性表達(dá)的強(qiáng)度較弱；2分組分離培養(yǎng)PMSCS結(jié)果顯示在相同處理方法下和相同條件培養(yǎng)基中，各組間細(xì)胞增殖情況有差異，其中AB組生長速率和細(xì)胞數(shù)量的增加較其它組顯著；3流式細(xì)胞儀檢測表面抗原表明，培養(yǎng)所獲細(xì)胞表達(dá)CDL66、CD44、CD29、CDL05，而不表達(dá)CD45、CD34以及HLADR，提示呈MSCS表型；4向神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)果表明，培養(yǎng)細(xì)胞有MSCS跨胚層分化的潛能。結(jié)論胎盤各部位均存在CDL66、CD44、CD29陽性表達(dá)的細(xì)胞，但臍帶附著處下方胎盤中間層AB相對其他部位而言可能為MSCS富集區(qū)域。各組MSCS的數(shù)量與MSCS的體外分離培養(yǎng)效率呈正相關(guān)。CDL66、CD44和CD29作為成體MSCS的定位指標(biāo)有較好的可信度。

簡介：細(xì)菌性食物中毒和感染性腹瀉是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。其中在魚、肉、蛋以及各類食品的存放、運(yùn)輸和加工過程中，致病性大腸桿菌是引起污染的重要原因之一，不僅給公眾健康造成了嚴(yán)重危害，也使國民經(jīng)濟(jì)遭到巨大損失。食品原料和食品的防腐抗菌技術(shù)一直以來是控制食物中毒的關(guān)鍵技術(shù)，急待需要建立和發(fā)展新的方法。鑒于噬菌體應(yīng)用的專一宿主性、環(huán)境親和性、經(jīng)濟(jì)方便和持續(xù)性特點(diǎn)，研究人員繼噬菌體技術(shù)在臨床治療的探索研究后，已將噬菌體抗菌技術(shù)擴(kuò)展到環(huán)境凈化和食品抗菌的領(lǐng)域，其結(jié)果令人鼓舞。歐美國家已經(jīng)開始推廣并應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)在食品抗菌領(lǐng)域。因此，篩選得到有價(jià)值的烈性噬菌體己成為開發(fā)應(yīng)用的有力資源和儲(chǔ)備，也是相關(guān)技術(shù)深入研究的基礎(chǔ)。本課題從環(huán)境樣本中分離致病性的大腸桿菌噬菌體，觀察分析噬菌體生物學(xué)特征，并通過觀察噬菌體在營養(yǎng)液中抑制宿主菌的規(guī)律，為營養(yǎng)液儲(chǔ)存的抑菌技術(shù)開發(fā)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，也為其他食品加工、儲(chǔ)存的抑菌技術(shù)探索方法。本課題研究分為兩部分1致病性大腸桿菌噬菌體的篩選及分子生物學(xué)特征；2腸侵襲性大腸桿菌噬菌體LSB1的應(yīng)用探索。相關(guān)研究內(nèi)容和結(jié)果如下1通過雙層培養(yǎng)法從污水樣本中分離到4株致病性大腸桿菌的烈性噬菌體。兩株為“多價(jià)”噬菌體，另兩株為“單價(jià)”噬菌體。其中LSB1對大腸桿菌EIEC8401有專一的高溶解作用。2通過噬菌體培養(yǎng)、透射電鏡、核酸分離電泳、隨機(jī)序列分析等技術(shù)，觀察噬菌斑、超微結(jié)構(gòu)、核酸性質(zhì)及核酸序列。結(jié)果顯示，噬菌體LSB1的噬菌斑直徑約3～4MM，透明，邊緣清楚，無暈環(huán)；其結(jié)構(gòu)是由兩個(gè)大小不同的圓形衣殼體單位組成，似葫蘆狀約70NM，其中大衣殼體單位直徑為46NM左右，小衣殼體單位直徑為24NM左右；核酸大約為23000BP，雙鏈DNA，似覆蓋噬菌體科；根據(jù)基因比對結(jié)果，未發(fā)現(xiàn)同源噬菌體株。3通過活菌計(jì)數(shù)試驗(yàn)，觀察噬菌體LSB1對牛奶中宿主菌的抑制作用，試驗(yàn)顯示，在非營養(yǎng)環(huán)境中，高比配110000的噬菌體投入在室溫下有一定的抑菌趨勢，但抑菌效率很低；在營養(yǎng)條件下和在4℃的作用溫度下，11比配的抑菌效應(yīng)穩(wěn)定，宿主菌滴度降低維持在2個(gè)對數(shù)級左右；同樣條件在22℃～37℃作用時(shí)，數(shù)小時(shí)內(nèi)宿主菌滴度可達(dá)到約4個(gè)對數(shù)級，但抑菌的穩(wěn)定性較差，隨著時(shí)間的延長，抑菌作用明顯減弱；繼續(xù)增加噬菌體投入劑量也將明顯降低抑菌效果。后兩種現(xiàn)象均顯示宿主菌有“免疫性”產(chǎn)生。4考慮到噬菌體LSB1的宿主譜相對較窄，而且有宿主菌獲得“免疫性”現(xiàn)象，我們提出引入電磁波協(xié)同處理和開發(fā)噬菌體溶解酶的途徑以擴(kuò)大噬菌體LSB1在食品及其他領(lǐng)域的抗菌應(yīng)用效率的設(shè)想。

簡介：誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（IPS），具有和胚胎干細(xì)胞類似的發(fā)育多潛能性，由于其避開了胚胎干細(xì)胞研究面臨的倫理和法律等問題，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。目前有關(guān)缺氧低氧對IPS細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響尚不清楚。IPS對腎缺血再灌注損傷ISCHEMIAREPERFUSIONINJURY，IRI有否治療作用，目前尚無報(bào)道。目的本工作擬在IPS細(xì)胞，研究缺氧對IPS細(xì)胞的增值、遷移、黏附、凋亡以及基因表達(dá)等的影響；進(jìn)而用缺氧誘導(dǎo)因子1?。℉IF1?。㏒IRNA轉(zhuǎn)染IPS細(xì)胞，觀察降低HIF1Α表達(dá)后，缺氧對IPS細(xì)胞作用的影響；建立小鼠急性腎缺血模型，觀察IPS細(xì)胞是否對腎缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。方法應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體向原代培養(yǎng)的MEF細(xì)胞導(dǎo)入SOX2、KLF4、OCT4和CMYC四種基因，誘導(dǎo)出IPS細(xì)胞。IPS細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分為四組①常氧（NMOXIA）組、②缺氧（HYPOXIA）組、③缺氧轉(zhuǎn)染隨機(jī)序列SIRNA（HYPOXIACONSIRNA）組、④缺氧轉(zhuǎn)染HIF1ASIRNA（HYPOXIAHIF1ASIRNA）組，向③④組IPS細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染CONSIRNA和HIF1ASIRNA，然后將②③④同時(shí)置缺氧盒里缺氧處理12小時(shí)，應(yīng)用REALTIMEPCR、流式細(xì)胞儀等技術(shù)檢測各組IPS細(xì)胞的基因表達(dá)、凋亡、增殖、遷移、粘附等情況。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立腎缺血再灌注模型，采用摘除右腎，左腎動(dòng)靜脈扎閉50分鐘的方法，分別向各組左腎包膜內(nèi)注射以下不同處理過的IPS細(xì)胞常氧IPS細(xì)胞、低氧處理IPS細(xì)胞、低氧CONSIRNAIPS細(xì)胞、低氧HIF1ASIRNAIPS細(xì)胞和PBS，觀察上述IPS細(xì)胞干預(yù)對腎缺血再灌注損傷的影響。結(jié)果1缺氧及HIF1A對IPS細(xì)胞增殖的影響與常氧組（1±0）相比，HYPOXIA組（086±004）IPS細(xì)胞數(shù)明顯下降，下降至缺氧前的86±4％，P結(jié)論1缺氧處理12小時(shí)可抑制IPS細(xì)胞增殖；降低IPS細(xì)胞HIF1A表達(dá)可加重缺氧對IPS細(xì)胞增殖的抑制作用。2缺氧處理12小時(shí)可促進(jìn)IPS細(xì)胞遷移；降低HIF1A表達(dá)，可明顯抑制缺氧促進(jìn)IPS細(xì)胞遷移的作用。3IPS細(xì)胞可自由穿過內(nèi)皮細(xì)胞；缺氧處理可明顯抑制IPS細(xì)胞穿內(nèi)皮細(xì)胞遷移；降低HIF1A表達(dá)又會(huì)逆轉(zhuǎn)缺氧抑制遷移的現(xiàn)象，促進(jìn)IPS細(xì)胞穿內(nèi)皮遷移。4缺氧處理12小時(shí)，對IPS細(xì)胞早期凋亡和晚期凋亡沒有顯著作用；但轉(zhuǎn)染HIF1ASIRNA降低缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)后，可在一定程度上抑制晚期凋亡。5缺氧處理IPS細(xì)胞明顯抑制IPS細(xì)胞與IPS細(xì)胞黏附以及IPS細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，降低缺氧誘導(dǎo)因子表達(dá)能逆轉(zhuǎn)此效應(yīng)。6缺氧處理可抑制IPS細(xì)胞SOD1、FGFR2、CCS、TEK、PLAU、NME4、MTA2等基因的RNA表達(dá)，降低IPS細(xì)胞HIF1A表達(dá)能抑制缺氧對IPS細(xì)胞上述基因表達(dá)的影響。7缺氧處理能促進(jìn)IPS細(xì)胞在小鼠缺血腎臟中的遷移，降低HIF1A表達(dá)后，IPS細(xì)胞遷移距離相對縮短。8腎包膜下給予缺氧處理過的IPS細(xì)胞，與PBS組以及正常IPS組相比，小鼠血清肌酐值明顯下降，表明缺氧處理過的IPS細(xì)胞能改善缺血再灌注損傷腎臟的功能。9IPS細(xì)胞可明顯減小缺血再灌注損傷腎臟缺血面積；降低缺氧處理的IPS細(xì)胞的HIF1A表達(dá)，可抑制缺氧IPS細(xì)胞對缺血再灌注腎臟的作用。

簡介：點(diǎn)擊查看更多肺結(jié)核患者外周淋巴細(xì)胞亞群及協(xié)同刺激分子PD-1-PD-L1的表達(dá)特性與生物學(xué)意義.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：背景氣道結(jié)構(gòu)重塑尤其是氣道平滑肌重塑是支氣管哮喘病程中的重要病理改變之一。已有研究顯示這一改變與氣道平滑肌細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移等生物學(xué)特性的異常有關(guān)但具體機(jī)制尚不十分明確。業(yè)已證實(shí)網(wǎng)狀蛋白家族4RETICULARPROTEINFAMILYRTN4成員中的NOGOB參與了血管平滑肌細(xì)胞的凋亡、增殖、遷移等生物學(xué)過程。對于具有同樣胚胎起源的氣道平滑肌細(xì)胞AIRWAYSMOOTHMUSCLECELLASMCNOGOB在該細(xì)胞中的表達(dá)情況及生物學(xué)作用目前尚未見報(bào)道。因此探討NOGOB在氣道平滑肌細(xì)胞中的的表達(dá)進(jìn)一步闡明其對氣道平滑肌細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響并揭示其在哮喘氣道結(jié)構(gòu)重塑中所起的作用具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值。目的明確NOGOB在原代培養(yǎng)的人支氣管平滑肌細(xì)胞表達(dá)情況及其表達(dá)下調(diào)對平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移等生物學(xué)特性的影響。同時(shí)觀察哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)作用對氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響以探討NOGOB在哮喘氣道結(jié)構(gòu)重塑中的可能作用。方法一、人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白的表達(dá)情況選用體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞以HELA細(xì)胞作為陽性對照先提取細(xì)胞總RNA及蛋白然后通過RTPCR及WESTERNBLOTTING等方法觀察了支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白表達(dá)情況。二、下調(diào)NOGOB表達(dá)對氣道平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡和遷移的影響一在采用陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的SIRNA干擾的方法下調(diào)入支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB的表達(dá)后檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞總數(shù)CCK8法并比較其差異以評價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對人支氣管平滑肌細(xì)胞增殖的影響。二在采用SIRNA干擾的方法有效下調(diào)了人支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB的表達(dá)后以TNFΑ刺激各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞一定時(shí)間以誘導(dǎo)凋亡然后采用ANNEXINVPI雙染法于流式細(xì)胞儀上計(jì)數(shù)各實(shí)驗(yàn)組早期凋亡的細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的比例以評價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對TNFΑ誘導(dǎo)的人支氣管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響。三將人支氣管平滑肌細(xì)胞接種于MILLICELL小室中繼而采用SIRNA干擾的方法下調(diào)細(xì)胞NOGOB的表達(dá)。在RNA干擾起效后通過調(diào)高M(jìn)ILLICELL小室外室的血清濃度以開始細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。通過檢測各實(shí)驗(yàn)組發(fā)生遷移的細(xì)胞總數(shù)以評價(jià)NOGOB表達(dá)下調(diào)對人支氣管平滑肌細(xì)胞遷移的影響。三、哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響在完成上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上選擇哮喘相關(guān)的炎癥介質(zhì)IL4、IL13分別以IL410NGML、IL1310NGML及兩者的組合各10NGML刺激體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞采用REALTIMEPCR及WESTERNBLOTTING等方法分別檢測不同時(shí)間點(diǎn)MRNA及蛋白表達(dá)的變化以評價(jià)哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響。結(jié)果一、人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOBMRNA及蛋白的表達(dá)情況提取人支氣管平滑肌細(xì)胞及HELA細(xì)胞的總RNA及蛋白后RTPCR結(jié)果顯示在300BP處HELA細(xì)胞及人支氣管平滑肌細(xì)胞均可見NOGOBMRNA特異性條帶表達(dá)。而WESTERNBLOTTING顯示在約37KD處人支氣管平滑肌細(xì)胞及HELA細(xì)胞均可見NOGOB蛋白表達(dá)。從而證實(shí)人支氣管平滑肌細(xì)胞中存在NOGOB的表達(dá)。二、下調(diào)NOGOB表達(dá)對人支氣管平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡和遷移的影響一采用SIRNA干擾下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB表達(dá)后72小時(shí)細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示CCK8法與陰性SIRNA對照組比NOGOB表達(dá)下調(diào)組細(xì)胞數(shù)高于陰性對照組但兩者無顯著性差異。NOGOB表達(dá)下調(diào)組1244±0188陰性對照組11974±0114P＞005。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)對人支氣管平滑肌細(xì)胞的增殖無明顯影響。二在采用SIRNA干擾下調(diào)入支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的基礎(chǔ)上ANNEXINVPI雙染法結(jié)果顯示TNFA處理前后NOGOB表達(dá)下調(diào)組凋亡細(xì)胞增加數(shù)明顯低于陰性對照組兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異陰性對照組965±042％NOGOB表達(dá)下調(diào)組002±011％P＜001。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)可減少TNFA誘導(dǎo)的支氣管平滑肌細(xì)胞凋亡。三在采用SIRNA干擾下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的基礎(chǔ)上分別對NOGOB下調(diào)組、陰性SIRNA對照組發(fā)生遷移的細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)結(jié)果顯示與陰性SIRNA對照組相比NOGOB表達(dá)下調(diào)組減少了44倍兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異陰性對照組0616±004NOGOB表達(dá)下調(diào)組0164±0006P＜001。提示NOGOB表達(dá)下調(diào)可抑制人支氣管平滑肌細(xì)胞的遷移功能。三、哮喘相關(guān)炎癥介質(zhì)對氣道平滑肌細(xì)胞NOGOB表達(dá)的影響一IL410NGML、IL1310NGML單獨(dú)刺激24小時(shí)未能使人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB的表達(dá)水平發(fā)生顯著變化而IL4和IL13各10NGML共同作用后NOGOBMRNA表達(dá)出現(xiàn)降低其中1H時(shí)表達(dá)量較OH基礎(chǔ)值下降約7倍相對CT值0小時(shí)11小時(shí)0136±0009P＜001隨著時(shí)間推移其表達(dá)逐漸恢復(fù)。且IL4、IL13共同作用12小時(shí)后人支氣管平滑肌細(xì)胞中NOGOB蛋白表達(dá)開始下降至24小時(shí)時(shí)下降最為明顯各時(shí)間點(diǎn)的空白對照無明顯變化。提示NOGOB可能作為哮喘氣道炎癥導(dǎo)致氣道重塑的下游通路蛋白而參與了哮喘的氣道結(jié)構(gòu)重塑。結(jié)論一、體外培養(yǎng)的原代人支氣管平滑肌細(xì)胞存在NOGOB的表達(dá)下調(diào)NOGOB的表達(dá)可抑制人支氣管平滑肌細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞遷移能力但對細(xì)胞的增殖無明顯影響。二、哮喘相關(guān)的炎癥介質(zhì)IL4、IL13共同作用可時(shí)間依賴性的下調(diào)人支氣管平滑肌細(xì)胞的NOGOBRNA及蛋白水平的表達(dá)。

簡介：分類號R737．3密級單位代碼10114學(xué)號201010268MIF過表達(dá)對宮頸癌細(xì)胞株SIHA生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)研究THEEFFECTSOFMIFOVEREXPRESSIONONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCERVICALCARCINOMACELLLINESIHA研究申請學(xué)位門類級別科堂堂僮專業(yè)名稱婦主科堂研究方向婦抖鼬瘤二。一三年三月十五日山西醫(yī)科大學(xué)碩二I學(xué)位論文目錄中文摘要??????????????????????????????1英文摘要??????????????????????????????5英文名稱縮略表???????????????????????????9前言?????????????????????????????????????????．．。010日U舌?????????????????????????????????????????．．第一章MIF真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定1．材料與方法??????????????????????????122．結(jié)果?????????????????????????????183．討論?????????????????????????????????????．184．附圖?????????????????????????????19第二章基因轉(zhuǎn)染對宮頸癌SIHA細(xì)胞株中MIF表達(dá)的影響1．材料與方法??????????????????????????222結(jié)果????????????????????????????．．283．討論??????????????????????????????????????．314．附圖?????????????????????????????32第三章MIF過表達(dá)對SIHA細(xì)胞中相關(guān)因子表達(dá)及其生物學(xué)特性的影響1．材料與方法??????????????????????????342．結(jié)果?????????????????????????????383．J討論???????????????????????．．??????????????．．444．附圖?????????????????????????????45第四章PDTC對SIHA細(xì)胞中相關(guān)因子表達(dá)及其生物學(xué)特性的影響1．材料與方法??????????????????????????492．結(jié)果?????????????????????????????513．討{侖????????????．??????????????????????????554．附圖?????????????????????????????57結(jié)論?????????????????????????????????????????．．60參考文獻(xiàn)?????????????????????????????．61綜J丕?????????????????????????????????????????．．66攻讀學(xué)位期問發(fā)表文章情況????????????????????1．．75致謝??????????????????????????????．．7．．76個(gè)人簡歷?????????????????????????????．77

簡介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文嗜酸乳桿菌生物學(xué)特性及其在發(fā)酵乳中的應(yīng)用研究姓名劉希山申請學(xué)位級別碩士專業(yè)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程指導(dǎo)教師羅欣20050610山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要嗜酸乳桿菌作為一種益生菌，在促進(jìn)人體健康和預(yù)防疾病中具有重要作用，并曰益成為乳品科學(xué)研究的熱點(diǎn)。本課題對實(shí)驗(yàn)室保藏的嗜酸乳桿菌的生物學(xué)特性，與嗜熱鏈球菌的微生態(tài)關(guān)系及其發(fā)酵乳生產(chǎn)技術(shù)和應(yīng)用效果進(jìn)行了研究。該嗜酸乳桿菌在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11％的NFM培養(yǎng)基中培養(yǎng)8H酸度能達(dá)800T，活菌數(shù)達(dá)到79109CFU／ML，這證明其具有良好的產(chǎn)酸能力。其能在PH為25的環(huán)境中存活，2H后存活率為87】％在PH為35、45和55時(shí)不僅能夠存活，而且還有大量生長，說明其對低PH值具有較好的耐受性。該供試嗜酸乳桿菌能夠耐受濃度為O5％的膽汁鹽和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6％的食鹽，證明它能耐受人體胃腸道的膽汁鹽和滲透壓而存活下來。在本試驗(yàn)條件下該供試嗜酸乳桿菌16H內(nèi)能夠同化50％以上的膽固醇，能有效預(yù)防高脂血癥的發(fā)生。該嗜酸乳桿菌水解蛋白能力較好，能使發(fā)酵乳中的氨基酸含量提高150UG／ML。該嗜酸乳桿菌具有良好的發(fā)酵特性，它能夠在人體胃腸道內(nèi)定植，發(fā)揮健康促進(jìn)作用，因而可以作為發(fā)酵劑菌種應(yīng)用于發(fā)酵乳的生產(chǎn)。嗜酸乳桿菌和嗜熱鏈球菌混合培養(yǎng)時(shí)，其產(chǎn)酸速度加快，發(fā)酵乳的PH值降低，嗜酸乳桿菌的生長速度加快。嗜酸乳桿菌占的比例越大發(fā)酵乳的酸度越高。即兩菌混合培養(yǎng)時(shí)，嗜熱鏈球菌和嗜酸乳桿菌有一定的相互促進(jìn)作用，兩菌具有良好的共生關(guān)系。嗜酸乳桿菌和嗜熱鏈球菌混合發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵乳的最優(yōu)發(fā)酵條件是加糖量為8％，嗜熱鏈球菌和嗜酸乳桿菌比例為L4，接種量為4％，發(fā)酵溫度為40。C。在此條件下生產(chǎn)的發(fā)酵乳貯存至1L天時(shí)，其酸度為1050T，兩菌比例在1L～12之間，嗜酸乳桿菌活菌數(shù)在107CFU／ML以上。這仍在消費(fèi)者可接受的范圍內(nèi)，并能滿足充分發(fā)揮食療保健作用。該嗜酸乳桿菌發(fā)酵乳降低高脂血癥小白鼠血清中總膽固醇和甘油三酯含量以及動(dòng)脈硬化指數(shù)的作用顯著，而對血清中高密度脂蛋白的調(diào)節(jié)作用不明顯，這說明該發(fā)酵乳對高脂血癥具有較好的治療作用。關(guān)鍵詞嗜酸乳桿菌嗜熱鏈球菌發(fā)酵乳生物學(xué)功能