不同產(chǎn)地烤煙化學(xué)成分指紋圖譜差異研究.pdf

1、煙草的化學(xué)成分非常復(fù)雜，而煙草中相關(guān)化學(xué)組分的種類和含量直接與其質(zhì)量相對應(yīng)，對其組分的確認(rèn)即相當(dāng)于對質(zhì)量的確認(rèn)，因而可利用“指紋圖譜”的原理實(shí)現(xiàn)煙草質(zhì)量評價。目前，液相色譜技術(shù)主要多酚類物質(zhì)的分離鑒定，關(guān)于HPLC指紋圖譜的研究較少，因此，完成指紋歸屬工作，構(gòu)建完善的烤后煙葉化學(xué)物質(zhì)的指紋圖譜對指導(dǎo)烤煙的質(zhì)量評價工作具有重要意義。
　　 本文采用溶劑超聲萃取高效液相色譜法分離提取煙草中的化學(xué)成分，采用梯度洗脫，色譜柱：water

2、s-nova-pak C18液相色譜柱(4μm，3.9*150mm)；流動相A：100％乙腈，流動相B：3％乙酸；檢測波長327nm；流速：1ml/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL；梯度洗脫：0min(97％B)→10min(97％B)→35min(50％B)→45min(50％B)→50min(10％B)→60min(5％B)→75min(5％B)。
　　 本文以高效液相色譜分析方法為基礎(chǔ)，研究了烤煙樣品化學(xué)成分的高效液

3、相色譜指紋圖譜。本文所建立的指紋圖譜構(gòu)建方法，具有較強(qiáng)的精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性，所建立的指紋圖譜基線較為平穩(wěn)、響應(yīng)值高、分離度良好。完成了新綠原酸、隱綠原酸、綠原酸、蕓香苷、莨菪亭5種對照品的對比，圖譜顯示，5種標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間與烤煙HPLC指紋圖譜中5個特征峰的保留時間一致，完全可能是同一種物質(zhì)。本文采用LC-MS技術(shù)對HPLC指紋圖譜的主要色譜峰的結(jié)構(gòu)進(jìn)行指認(rèn)與確定，選用14號樣品進(jìn)行LC-MS檢測，以14號樣品數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果表

4、明，其中5個色譜峰經(jīng)與對照品對比，保留時間、紫外光譜、質(zhì)譜均一致，分別為新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、蕓香苷、莨菪亭。
　　 通過對15批不同產(chǎn)地的烤煙樣品進(jìn)行了HPLC指紋圖譜分析，確定了烤煙HPLC指紋圖譜的對照圖譜，并對15批樣品進(jìn)行相似度分析，結(jié)果表明，其中13號、4號樣品指紋圖譜與對照圖譜的相似度較低，這可能與當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境、生產(chǎn)條件相關(guān)，其他樣品指紋圖譜與對照圖譜的相似度均達(dá)到0.900以上。通過對15批樣品不同產(chǎn)地烤

5、煙HPLC指紋圖譜共有色譜峰相對保留時間及相對峰面積進(jìn)行考察，結(jié)果表明，不同產(chǎn)地烤煙的HPLC指紋圖譜共有峰相對保留時間差別較小，說明以上15批不同產(chǎn)地烤煙化學(xué)成分基本相同。但是共有峰相對峰面積差別較大，這說明以上15處產(chǎn)地的烤煙由于生長的地理環(huán)境和氣候條件的不同而導(dǎo)致其主要化學(xué)成分含量差別較大。
　　 為了考察烤煙HPLC指紋圖譜在煙草領(lǐng)域的應(yīng)用，本文采用DPS軟件，對不同產(chǎn)地的烤煙樣品同時聚類分析，分類結(jié)果基本區(qū)分了濃香型煙