峨參石油醚部位與5-FU聯用對結腸癌立體多細胞球及裸鼠移植瘤的影響.pdf

1、目的:本次實驗研究首先在細胞層面上，探討混合物峨參石油醚部位與5-FU聯用對人結腸腺癌DLD-1立體多細胞球模型和人結腸癌細胞HCT116立體多細胞球模型的作用和可能的作用機制，在動物層面上探討峨參石油醚部位對人結腸癌HT-29荷瘤裸鼠模型的療效觀察，為了闡述峨參石油醚部位作為一個混合物開發(fā)新藥的價值，為今后的藥物研發(fā)和臨床提供實驗參考價值。
　　方法:
　　(1)cck8法檢測峨參石油醚部位分別對人結腸腺癌細胞DLD-1和

2、人結腸癌細胞HCT116平面和立體多細胞球模型的抑制作用，并探討這種抑制作用與峨參石油醚部位藥物濃度的關系;
　　(2)流式細胞技術分析峨參石油醚部位與5-FU聯用對人結腸腺癌細胞DLD-1和人結腸癌細胞HCT116立體多細胞球模型的細胞周期以及細胞凋亡的作用，并探討這種作用與峨參石油醚部位藥物濃度的關系;
　　(3) Western blot技術分析峨參石油醚部位與5-FU聯用對人結腸腺癌細胞DLD-1和人結腸癌細胞HCT

3、116立體多細胞球模型中p-AKT和INOS蛋白的表達;
　　(4)在細胞層面上，cck8法檢測峨參石油醚部位與5-FU聯用對人結腸癌HT-29細胞立體多細胞球模型的抑制作用。在動物層面上，峨參石油醚部位與5-FU聯用對HT-29荷瘤裸鼠給藥，觀察裸鼠的活動狀態(tài)，記錄裸鼠的體重，測量腫瘤的體積，計算抑瘤率。
　　結果:
　　(1)峨參石油醚部位對人結腸癌細胞DLD-1、HCT116平面模型、立體多細胞球模型都有不同程度

4、的抑制作用，對DLD-1平面模型IC50=56.67μg/ml，立體多細胞球模型IC50=89.78ug/ml，對HCT116平面模型IC50=35.79μg/ml，立體多細胞球模型IC50=60.59ug/ml，隨著峨參石油醚部位藥物濃度的升高，這種抑制作用會逐漸地增強;
　　(2)峨參石油醚部位與5-FU聯用可以提高對DLD-1、HCT116立體多細胞球模型的抑制作用，這種抑制作用隨峨參石油醚部位藥物濃度的升高而增強;

5、　　(3)5-FU作為周期特異性藥物可阻滯DLD-1、HCT116細胞于S期，而峨參石油醚部位則阻滯DLD-1細胞于G0/G1期，阻滯HCT116細胞于G2/M期，兩種藥物聯合使用，可以使DLD-1細胞阻滯在S期和G0/G1期，使HCT116細胞阻滯在S期和G2/M期;
　　(4)混合物峨參石油醚部位和臨床常用藥5-FU兩藥單用都可以促進DLD-1、HCT116細胞的凋亡，兩種藥物聯合使用可以增強抑制作用，誘導更多的細胞凋亡，并且

6、當峨參石油醚部位濃度的升高，DLD-1細胞和HCT116細胞的凋亡率也逐漸增加;
　　(5)峨參石油醚部位與5-FU聯用可以抑制DLD-1、HCT116細胞中p-AKT蛋白與INOS蛋白的表達;
　　(6)峨參石油醚部位與5-FU兩藥單藥可以抑制HT-29移植瘤的生長，使裸鼠的腫瘤體積變小。兩藥聯用可以增強療效，并且抑制作用隨著峨參石油醚部位藥物濃度的增加而增強。
　　結論:
　　(1)峨參石油醚部位對人結腸腺癌

7、DLD-1細胞和人結腸癌HCT116細胞平面、立體多細胞球模型都可以抑制細胞的增殖，降低細胞的活力。這種抑制作用隨峨參石油醚部位藥物濃度的升高而增強;
　　(2)峨參石油醚部位與5-FU聯用對人結腸腺癌DLD-1和人結腸癌HCT116細胞的抑制作用，導致兩個細胞的周期阻滯發(fā)生了變化，細胞的凋亡率也有所升高，這種作用可能與影響了細胞中p-AKT和INOS蛋白的表達有關;
　　(3)峨參石油醚部位與5-FU兩藥單藥可以抑制HT-