尼克酰胺甲基轉(zhuǎn)移酶影響胃癌細(xì)胞的生物學(xué)功能和患者預(yù)后.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  在臨床實踐中,一些指標(biāo)被廣泛用于預(yù)測胃癌患者的預(yù)后。這些指標(biāo)包括如癌胚抗原(CEA)、ca199等分子標(biāo)志物的聯(lián)合檢測以及腫瘤分期與分級的劃分。但是,這些預(yù)測患者預(yù)后的方法依然有一定的局限性,所以,胃癌仍然是最致命的人類惡性腫瘤之一。代謝酶尼克酰胺甲基轉(zhuǎn)移酶(NNMT,EC.2.1.1.1)曾被報道參與各種癌的進(jìn)展和發(fā)展。然而,NNMT在胃癌中的預(yù)后和生物功能尚不清楚。
  方法:
  1.利用定量逆轉(zhuǎn)錄-

2、聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測胃癌患者新鮮組織(包括腫瘤組織和瘤旁組織)NNMT的mRNA表達(dá)是否存在差異。
  2.采用免疫組織化學(xué)(IHC)的方法,檢測蠟塊中良惡性胃粘膜上皮組織中的NNMT蛋白質(zhì)表達(dá)的差異。
  3.統(tǒng)計并評估患者胃癌組織中NNMT蛋白表達(dá)與臨床病理及預(yù)后的關(guān)系。
  4.利用siRNA介導(dǎo),抑制NNMT在胃腺癌細(xì)胞株MGC803、BGC823中的表達(dá),探究NNMT在胃癌細(xì)胞系體內(nèi)外的生物學(xué)功

3、能。
  5.充分檢索并分析數(shù)據(jù)庫TCGA,并利用cBioPortal網(wǎng)站計算并得出NNMT共表達(dá)基因列表,采用DAVID Bioinformatics Resources6.7對列表中的高表達(dá)相關(guān)性基因進(jìn)行富集分析。
  結(jié)果:
  1.通過qRT-PCR實驗發(fā)現(xiàn)與鄰近非癌組織相比,NNMT的mRNA和蛋白水平在胃癌組織中上調(diào);通過免疫組化實驗發(fā)現(xiàn)NNMT蛋白表達(dá)水平在胃癌組織中的表達(dá)明顯升高(56.8%vs31.9

4、%)。
  2.NNMT的蛋白表達(dá)水平與原發(fā)腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和TNM分期有相關(guān)性。
  3.單因素和多因素COX回歸生存分析驗證了NNMT的蛋白表達(dá)是胃癌患者總存活率的獨立預(yù)后因素。
  4.用siRNA干擾胃癌細(xì)胞系MGC803、BGC823中NNMT的表達(dá)水平,細(xì)胞增殖、侵襲和遷移在體內(nèi)外都受到了抑制。
  結(jié)論:
  總體而言,這項研究的結(jié)果表明NNMT的表達(dá)在胃癌組織中上調(diào),并能促進(jìn)胃

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