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1、目的:本研究通過(guò)比較不同時(shí)間中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后大鼠肝細(xì)胞凋亡、肝組織糖原含量、NO含量及Bcl-2與Bax的表達(dá),旨在探討大鼠肝細(xì)胞凋亡與不同時(shí)間中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)之間的關(guān)系。 方法:將30只10周齡健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組,每組6只:對(duì)照組(Control,C.不進(jìn)行運(yùn)動(dòng));中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)組:運(yùn)動(dòng)20min組(TwentyMinutesExercise,TME);運(yùn)動(dòng)1h組(OneHourExercise,OHE);運(yùn)動(dòng)2h組(Two
2、HoursExercise,THE);力竭運(yùn)動(dòng)組(ExhaustingExercise,EE)。運(yùn)動(dòng)組24只大鼠依據(jù)Bedford建立的大鼠運(yùn)動(dòng)模型方案進(jìn)行運(yùn)動(dòng):跑臺(tái)坡度為10°,速度為19.3m·min-1(相當(dāng)于76%VO2max)。按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),所有大鼠均在實(shí)施腹腔麻醉術(shù)后斷頭處死取肝臟組織,一部分肝組織用以測(cè)定大鼠肝糖原含量和NO含量,另一部分制備肝組織石蠟切片,用以檢測(cè)大鼠肝凋亡細(xì)胞和Bcl-2、Bax的表達(dá)。 結(jié)果:(
3、1)肝組織切片進(jìn)行HE染色顯示,對(duì)照組和運(yùn)動(dòng)20min組大鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,肝索清楚,核大,呈圓形;運(yùn)動(dòng)1h、2h組大鼠的肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)逐漸變化,至力竭后可見(jiàn)大鼠肝細(xì)胞明顯腫脹,間隙明顯增大,核變小,不規(guī)則,可見(jiàn)肝小葉輪廓改變等變化。 (2)TUNEL染色切片顯示,大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間增加,肝凋亡細(xì)胞的陽(yáng)染顆粒逐漸增多。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)20min、1h組間比較,肝細(xì)胞AI均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);運(yùn)動(dòng)2h、力竭組和對(duì)照組比較
4、,具有高度顯著性差異(p<0.01);運(yùn)動(dòng)組間的運(yùn)動(dòng)1h、2h、力竭運(yùn)動(dòng)組之間兩兩比較存在顯著性差異(p<0.01),以力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠的AI值最高。 (3)各組大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間的增加,肝糖原含量依次下降,運(yùn)動(dòng)致力竭時(shí),肝糖原含量接近耗竭:運(yùn)動(dòng)20min組與對(duì)照組大鼠比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);其余運(yùn)動(dòng)組與對(duì)照組比較均有高度顯著性差異(p<0.01);運(yùn)動(dòng)組間除運(yùn)動(dòng)2h與力竭運(yùn)動(dòng)大鼠間肝糖原含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(p>0.05)
5、,其余運(yùn)動(dòng)組間兩兩比較均具有高度顯著性差異(p<0.01)。 (4)運(yùn)動(dòng)20min、1h組與對(duì)照組大鼠比較,肝組織NO含量降低,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);運(yùn)動(dòng)2h、力竭組和對(duì)照組大鼠比較,均具有高度顯著性差異(p<0.01);運(yùn)動(dòng)組間1h、2h及力竭運(yùn)動(dòng)組大鼠之間兩兩比較,NO含量下降的差異均具有顯著性(p<0.05),運(yùn)動(dòng)1h、力竭組間大鼠NO含量差異高度顯著(p<0.01)。 (5)免疫組化染色切片觀察Bcl
6、-2和Bax的表達(dá)顯示,各組大鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)間的遞增,陽(yáng)染顆粒逐漸增多,染色灰度也逐漸加強(qiáng)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,Bcl-2和Bax的表達(dá)在對(duì)照組與運(yùn)動(dòng)組的運(yùn)動(dòng)20min、1h組但兩兩比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05);運(yùn)動(dòng)2h、力竭組和對(duì)照組比較,均具有高度顯著性差異(p<0.01);運(yùn)動(dòng)組間的運(yùn)動(dòng)1h、2h、力竭運(yùn)動(dòng)組之間兩兩比較均具有高度顯著性差異(p<0.01)。大鼠Bax/Bcl-2值顯示,對(duì)照組、運(yùn)動(dòng)20min、1h、2h組大鼠Bax/B
7、cl-2值逐漸增大,兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),力竭運(yùn)動(dòng)組與其它組Bax/Bcl-2值比較,差異均具有顯著性(p<0.05)。 (6)大鼠肝細(xì)胞凋亡指數(shù)與肝糖原含量、NO含量、Bcl-2及Bax的相關(guān)性顯示,肝細(xì)胞凋亡與肝糖原、NO含量之間均存在高度負(fù)相關(guān)(p<0.01),與Bcl-2、Bax的表達(dá)及Bcl-2/Bax值之間均存在高度正相關(guān)(p<0.01)。 結(jié)論:(1)中等強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)20min、1h對(duì)大鼠
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