小鼠X染色體性發(fā)育啟動數(shù)量性狀基因座(QTL)的精細定位.pdf

1、性發(fā)育是指個體性成熟并獲得生殖能力的過程,受到遺傳、環(huán)境等多種因素的影響。下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)控制著人類生殖系統(tǒng)的發(fā)育、成熟及功能的維持,對哺乳動物性發(fā)育起著決定性的作用,其所分泌的各種激素水平直接影響或調控青春期發(fā)育。性發(fā)育的啟動時間是性發(fā)育過程中相當關鍵的一個性狀。該性狀是一個復雜性狀,在個體水平上受多種遺傳因素和環(huán)境因素的影響。有研究表明X染色體存在與性發(fā)育啟動相關的調控基因。我們之前的研究在小鼠X染色體確定了一個和小鼠陰門開

2、啟相關的~25cM(DXMit103~DXMit119,LOD=3.86)的QTL區(qū)段。本研究利用特異性區(qū)段同類系的家系構建策略將該QTL精細定位到~2.5cM(DXMit68~RS29053133(50~60Mb))的區(qū)間長度內。本實驗選擇性發(fā)育起始時間差異較大的兩種近交品系小鼠C3H/HeJ和C57BL/6作為親本,親本通過正反交產生F1代,F1代自交產生F2代,針對初步定位確定的X染色體目標QTL區(qū)段通過基因分型篩選在該區(qū)段內至少

3、發(fā)生1次重組的F2代雄鼠個體。篩選出的F2代雄鼠個體與C3H/HeJ雌性親本回交產生F3代,F3代雌性個體與C3H/HeJ雄性親本回交產生F4代,篩選在目標區(qū)段內發(fā)生一次重組的F4代雄性個體構建特異性區(qū)段同類系。我們成功構建了13種針對目的區(qū)段的同類系以及1種對照同類系(F5雌鼠個體基因型為XC3XC3)。篩選出的F4代雄性個體與C3H/HeJ雌性親本回交產生F5代,記錄F5代雌鼠的性發(fā)育啟動(陰門開啟)時間。通過統(tǒng)計分析軟件SPSS

4、15.0對基因型表型數(shù)據進行單因素方差分析(One-Way ANOVA),將目標QTL精細定位到區(qū)間DXMit68~RS29053133(50~60Mb)內。對精細定位獲得的QTL區(qū)段進行候選基因分析,初步確定有三個基因可能參與了性發(fā)育啟動的調控;Pgrmcl(progesterone receptormembrane component 1,孕酮受體膜蛋白組分元件),Gria3(谷氨酸受體),Plac 1(Placental spec