殼聚糖修飾PLGA納米球作為玻璃體腔給藥載體的探索性研究.pdf

1、眼底疾病是極具視覺損傷和致盲風險的眼部病變。臨床上藥物治療眼底疾病的主要方式包括：系統(tǒng)給藥、局部眼外給藥和玻璃體腔注射等。然而由于角膜屏障和血—視網膜屏障的存在，系統(tǒng)給予大劑量藥物達到藥效的同時為機體帶來了較大的毒副作用；局部眼外給藥時藥物很難到達眼后節(jié)；玻璃體腔注射具有操作簡便，眼內藥物濃度高，相對安全性高等特點，成為目前較為廣泛應用的給藥方法。但這種方法存在一定缺陷：首先，給藥后眼內藥物半衰期較短，代謝速度快，多次給藥增加眼內并發(fā)癥

2、發(fā)生的幾率；其次藥物對病變部分的特異性差，發(fā)揮藥效的同時對眼內正常組織造成非特異性損傷；更重要的是，不同類型的眼底疾病其病變累及視網膜不同亞層，如視網膜靜脈阻塞、糖尿病視網膜病變等主要是視網膜內層受累；老年性黃斑病變，其病變在脈絡膜層，患者主要是視網膜外層受累等。然而經玻璃體腔注射給藥后，藥物隨機分布在視網膜各亞層，減低了藥效。因此，本論文的目的在于構建出操作簡便、高效、緩釋時間長、損傷小的理想型給藥系統(tǒng)。
　　聚乳酸-羥基乙酸共

3、聚物(poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA)和殼聚糖(Chitoson,CS)以良好的生物相容性和降解性在臨床眼科給藥中廣泛的應用[1,2]，以PLGA為原料制備出具有強緩釋作用，表面帶負電并裝載地塞米松磷酸鈉(Dexamethasone Sodium Phosphate,DEX)的納米球，利用殼聚糖衍生物-季銨化殼聚糖（HTCC）和羧化殼聚糖(CMC)對其表面電荷進行修飾。在眼內微電場作用下，此創(chuàng)新性給

4、藥體系經玻璃體腔注射后能夠靶向、粘附于視網膜表面，解決生物利用度低，毒副作用大等問題，并能夠進一步實現(xiàn)對視網膜各亞層病變部位的多級靶向作用。論文主要內容如下：
　　1.不同電荷載藥納米球給藥系統(tǒng)的構建和評價。
　　首先，采用改良的乳化/溶劑蒸發(fā)法制備出表面帶負電的DEX-PLGA載藥納米球,快速膜乳化技術保證了納米球粒徑均一，實現(xiàn)了批次間的可重復性。其次，利用殼聚糖陽離子衍生物季銨化殼聚糖HTCC對DEX-PLGA納米球的表

5、面電荷修飾，分別得到表面帶較大正電荷（電位36.4mV、粒徑388.6nm）的DEX-PLGA：HACC（++）、較小正電荷（電位16.5mV、粒徑355.7nm）的DEX-PLGA：HACC（+）和中性電荷（電位-0.22mV、粒徑361.5nm）的DEX-PLGA：HACC（0）；用帶負電的羧化殼聚糖CMC修飾DEX-PLGA：HACC表面，使其成為表面帶不同程度負電荷（電位-32.6mV、粒徑359.2nm和電位-16.6mV、粒

6、徑341.8nm）的DEX-PLGA：HACC：CMC（--）和DEX-PLGA：HACC：CMC（-），并對納米球表面樣貌，粒徑大小，表面電荷和藥物釋放行為進行測定。最后，模擬納米球給藥系統(tǒng)在微電場中的運動情況，結果表明納米球的運動速度與其表面所帶電荷呈正相關，電性不同運動方向不同。
　　2、細胞水平上考察不同電荷納米球細胞毒性作用、在微電場（100mV）作用下對細胞單層通透性作用。本論文通過猴脈絡膜-視網膜細胞RF/6A考察納

7、米球的毒性作用，結果表明濃度在250μg/ml以內，納米球表現(xiàn)出較好的安全性。在微電場作用下，帶正電荷的納米球對細胞的通透性得到較大的提高。
　　3、在動物水平上考察了在微電場作用下納米球對離體豬視網膜穿透作用；評價了給藥后納米球在活體眼內的分布、滯留情況；對視網膜的通透能力以及對脈絡膜新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）模型給藥后進行藥效評價。在微電場作用下納米球對視網膜的穿透作用與其表面