Trihydrophobin 1與PAK 1的相互作用及其生物學(xué)功能的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Rac1/Cdc42的效應(yīng)子PAK被不同的信號級聯(lián)反應(yīng)活化,包括酪氨酸激酶受體和integrins受體,并且它也調(diào)控著大量的生物學(xué)過程,如細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移等。PAK的活化曾被報道對RAF-MEK-MAPK信號通路的最大活化是必須的,可能是因為PAK能夠同時活化PAF和MEK的緣故。在本論文中,我們證實了起初被鑒定為A-RAF激酶特異負(fù)調(diào)節(jié)子的TH1在細(xì)胞中也和PAK1有相互作用。熒光共聚焦顯微鏡分析顯示TH1和PAK1在細(xì)胞核和胞漿中

2、都有共定位,這種現(xiàn)象和我們目前的結(jié)果相一致。GSTpull-down和免疫共沉淀實驗證實了TH1和PAK1能直接相互作用,并且選擇性的結(jié)合到PAK1C端的激酶域上。TH1和PAK1結(jié)合的能力隨著PAK1的活化而增強.和PAK1的這種結(jié)合形式暗示了他們間的相互作用部分是被PAK1激酶活性所調(diào)控的。正如體外激酶活性分析和Western Blot檢測所顯示的,TH1抑制了PAK1激酶活性并且負(fù)調(diào)節(jié)了MAPK信號的傳導(dǎo)。有趣的是,TH1在體內(nèi)和

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