聲動力療法對腹水型S180腫瘤細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能的影響.pdf

1、本文研究了聲動力療法對腹水型S180腫瘤細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能的影響。文章在綜合國內(nèi)外研究進(jìn)展的基礎(chǔ)上，采用頻率為1.8MHz，2W/cm2的處理條件研究了超聲激活血卟啉處理對腹水型S180腫瘤細(xì)胞膜的作用，取得的實驗結(jié)果如下： 1.對細(xì)胞膜蛋白的影響：采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測處理后膜表面受體EGFR、Ras、Fas、FasL表達(dá)的變化以及硝酸鉛法檢測膜表面ACL酶和GCL酶活性的變化，結(jié)果表明超聲結(jié)合血卟啉的聯(lián)合作用對膜表面受體和酶

2、的抑制作用顯著高于單純超聲，單純血卟啉沒有抑制作用。說明聲動力療法顯著增強單純超聲的作用，抑制膜蛋白的表達(dá)和酶活性。其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的機制包括：阻斷由EGFR和Ras組成的生長信號傳遞通路；抑制膜表面ACL酶和GCL酶的活性；使FasL失活以及激活死亡受體Fas系統(tǒng)，從而介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。 2.對膜脂的作用：應(yīng)用TBA法、比色法和熒光偏振法檢測腹水型S180細(xì)胞在超聲激活血卟啉處理后膜脂質(zhì)過氧化程度，游離脂肪酸含量和膜流動性。

3、結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單純超聲可使腫瘤細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化，磷脂降解而降低膜流動性，超聲結(jié)合血卟啉顯著增強單純超聲的作用，單純血卟啉無作用。聲動力療法處理后，膜流動性的下降與脂質(zhì)過氧化和磷脂降解呈顯著相關(guān)，其中與磷脂降解關(guān)系更為密切。聲動力療法能使腫瘤細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化程度明顯升高，磷脂降解加劇，從而使膜流動性顯著降低，抑制腫瘤細(xì)胞的惡性增殖。 3.誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡通路的研究：采用AV-PI染色檢測細(xì)胞凋亡程度，用SP免疫組織化學(xué)染色法檢測Fas

4、、FasL、caspase-8和caspase-3在超聲激活血卟啉處理后表達(dá)量的動態(tài)變化。結(jié)果表明，F(xiàn)as和FasL在S180細(xì)胞表面高表達(dá)，超聲激活血卟啉處理后1h、3hUH組表達(dá)均下降，5h時FasL繼續(xù)下降而Fas保持在一定水平；UH組caspase-8和caspase-3在1h時即有一定表達(dá)量，3h后表達(dá)均達(dá)到最高，5h后同時下降。AV-PI雙染表明，聲動力處理后1h時，即有大量細(xì)胞發(fā)生凋亡，細(xì)胞膜為綠色熒光，3h后細(xì)胞核呈紅色