PTEN和線粒體在游離脂肪酸引起胰島βTC3細(xì)胞功能改變中的作用.pdf

1、隨著對糖尿病與肥胖癥認(rèn)識的不斷深入，肥胖和2型糖尿病之間的聯(lián)系也越來越明確。肥胖和2型糖尿病的共同特征之一為血漿游離脂肪酸(FFAs)水平升高。最近一些研究表明，PTEN在胰島素代謝中起重要作用，有關(guān)PTEN是否參與FFAs對胰島β細(xì)胞功能的損害尚未見報道；近來發(fā)現(xiàn)，解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)及線粒體與游離脂肪酸引起的胰島β細(xì)胞功能障礙有關(guān)，但是其具體機制尚不明確。本實驗對此作初步研究。 目的:通過觀察游離脂肪酸(FFAs)對胰島

2、β細(xì)胞PTENmRNA、線粒體膜電位和UCP2表達(dá)的慢性影響，探討FFAs損害胰島β細(xì)胞功能的機制。 方法:將0mmol/L，0.3mmol/L，0.4mmol/L，0.5mmol/L油酸作用于培養(yǎng)的胰島βTC3細(xì)胞： 1.用放射免疫法檢測基礎(chǔ)和葡萄糖刺激的胰島素分泌量(GSIS)； 2.MTT法分析細(xì)胞增殖能力； 3.RT-PCR法分析PTENmRNA的表達(dá)量； 4.膜片鉗技術(shù)檢測ATP敏感鉀電

3、流(IKATP)； 5.流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測線粒體膜電位； 6.RT-PCR和Westernblot方法分析UCP2表達(dá)。 7.油酸和PPARγ配體羅格列酮共同作用于培養(yǎng)的胰島βTC3細(xì)胞，觀察UCP2mRNA和蛋白表達(dá)。 結(jié)論:結(jié)果表明，F(xiàn)FAs對胰島β細(xì)胞內(nèi)PTEN的表達(dá)和線粒體功能具有影響；在FFAs引起的胰島β胞功能障礙中，F(xiàn)FAs一方面通過增加PTEN的表達(dá)，從而導(dǎo)致KATP開放而減少胰島素