Exendin-4對游離脂肪酸介導(dǎo)的βTc6細胞GK和GLUT2表達改變的干預(yù)作用.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩53頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:1.探討游離脂肪酸(FFA)對小鼠胰島素瘤細胞系β Tc6細胞葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)表達改變的影響。
   2.應(yīng)用Exendin-4干預(yù)FFA介導(dǎo)的胰島β細胞損害,觀察Exendin-4干預(yù)后上述研究指標的變化,探討Exendin-4對脂毒性狀態(tài)下的胰島β細胞是否具有保護作用及其可能的機制。
   方法:
   1.體外培養(yǎng)β Tc6細胞,不同濃度FFA(0.25mmol/L、

2、0.5mmol/L、1.0mmol/L)作用24小時,應(yīng)用RT-PCR和Westem Blot檢測GK和GLUT2表達情況,并觀察細胞形態(tài)變化。
   2.應(yīng)用不同濃度Exendin-4(5nmol/L、10nmol/L、50nmol/L)孵育β Tc6細胞不同時限(6小時、12小時、24小時),再予1.0mmol/L FFA作用24小時,應(yīng)用RT-PCR和Western Blot檢測GK和GLUT2表達情況,并觀察細胞形態(tài)變化

3、。
   結(jié)果:
   1.經(jīng)過0.25mmol/L FFA24h作用后,可見細胞團問凋亡小體逐步增多,但未見細胞形態(tài)學(xué)上的明顯變化。0.50mmol/L~1.00mmol/L FFA24h作用之后,β Tc6細胞呈現(xiàn)凋亡趨勢,細胞內(nèi)可見脂滴積聚,細胞間連接融合明顯減少,細胞團有崩解的趨勢,隨著濃度的增大,上述現(xiàn)象愈加明顯。
   2.經(jīng)0.25mmol/L FFA作用24小時,β Tc6細胞GK和GLUT2 m

4、RNA及其蛋白表達水平并未發(fā)生明顯改變,但在0.50~1.00mmol/L FFA作用組β Tc6細胞GK和GLUT2 mRNA和蛋白表達水平逐步減低。
   3.Exendin-4干預(yù)對脂毒性狀態(tài)下β Tc6細胞形態(tài)學(xué)上的影響:
   (1)Exendin-4干預(yù)時間為6小時時,各濃度組未見脂毒性狀態(tài)下β Te6細胞形態(tài)上的改善。
   (2)Exendin-4干預(yù)時間延長至12小時,5nmol/L Exend

5、in-4干預(yù)組未見細胞形態(tài)上的改善,在10nmol/LExendin-4干預(yù)組雖然細胞仍呈現(xiàn)出皺縮、變圓、核濃縮的形態(tài),但胞內(nèi)脂滴積聚減輕,細胞團崩解減少,細胞貼壁的活性部分恢復(fù)。將Exendin-4濃度進一步提高至50mol/L時,β Tc6細胞的形態(tài)未見進一步改善。
   (3)Exendin-4干預(yù)時間進一步延長至24小時,5nmol/L Exendin-4干預(yù)組細胞形態(tài)未見明顯改善,但細胞內(nèi)脂滴積聚減輕。將Exendin

6、-4干預(yù)濃度提高到10nmol/L時,細胞出現(xiàn)抱成團的特性以及連接融合的趨勢,脂滴進一步減少,部分細胞胞漿內(nèi)可見顆粒狀分泌小泡。我們進一步將Exendin-4預(yù)干預(yù)濃度提高到50nmol/L,在顯微鏡下尚未見β Tc6細胞形態(tài)的進一步改善。
   4.Exendin-4干預(yù)對脂毒性狀態(tài)下βTc6細胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表達的影響:
   (1)Exendin-4干預(yù)6小時,各濃度組未見脂毒性狀態(tài)下βTc6細胞G

7、K、GLUT2mRNA和蛋白表達的明顯改善。
   (2)Exendin-4干預(yù)時間延長至12小時,在5nmol/L、10mol/L和50nmol/LExendin-4作用下,在脂毒性狀態(tài)下的β Tc6細胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表達逐步升高。
   (3)Exendin-4干預(yù)時間延長至24小時,在5nmol/L和10nmol/L Exendin-4干預(yù)組,隨著濃度的增加,β Tc6細胞GK、GLUT2mRNA和

8、蛋白的表達進一步逐漸升高;但是在50nmol/L Exendin-4干預(yù)組,β Tc6細胞GK、GLUT2mRNA和蛋白表達水平并沒有比10nmol/LExendin-4干預(yù)組有進一步升高。
   結(jié)論:
   1.短期低濃度FFA作用時,胰島β細胞的GK和GLUT2表達未受到影響,但隨著FFA作用濃度的增加,β細胞的GK和GLUT2表達水平逐漸下調(diào)。
   2.短期低濃度FFA作用對胰島β細胞生長沒有產(chǎn)生明顯的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論