雜交技術(shù)在低溫高產(chǎn)草菇菌株選育中的應(yīng)用.pdf

1、草菇是生長在熱帶、亞熱帶地區(qū)的一種真菌，因其營養(yǎng)豐富、美味可口很受歡迎，市場前景廣闊。長期以來困擾草菇發(fā)展的主要有兩大問題，一是草菇喜溫喜濕，對溫度敏感，不耐低溫，所以栽培受到地域和季節(jié)的限制;二是草菇相對于其他食用菌生物轉(zhuǎn)化率低，只有10-40％。
　　為了解決草菇不耐低溫，產(chǎn)量低的難題，研究培育低溫高產(chǎn)的草菇新品種是一個重要的途徑。本文通過草菇菌種VH3和泰國NO.1雜交，通過低溫篩選、分子鑒定初步篩選出耐低溫的雜交菌株，再經(jīng)

2、過出菇驗(yàn)證、綜合農(nóng)藝性狀分析從而篩選出性狀良好的低溫高產(chǎn)菌株。
　　研究主要分為以下幾方面:
　　1.雜交親本的選擇:對11個草菇菌株進(jìn)行遺傳多樣性分析，不同草菇菌株間的遺傳距離從0.0723到0.4680之間不等，說明選取的11個草菇菌種種質(zhì)資源在分子水平上有較高的遺傳多樣性。兩親本VH3和泰國NO.1的遺傳距離為0.3180。選取這兩個菌種作為親本，一方面VH3是已經(jīng)驗(yàn)證過的耐低溫的菌株，雜交后代中可能會有耐低溫的特性;

3、另一方面兩者間遺傳距離較遠(yuǎn)，相對于一般雜交而言有更有可能產(chǎn)生較豐富的遺傳重組等變異，通過兩者雜交以期獲得耐低溫的高產(chǎn)菌株。
　　2.耐低溫雜交菌株的獲得:10株VH3單孢與20株泰國單孢兩兩配對，每個配對組合分別從中間和左右兩邊挑取菌塊，初步得到600對雜交組合。將初步獲得的雜交子0℃低溫處理10h后恢復(fù)生長3d，與耐低溫的親本VH3做對照，恢復(fù)生長好于VH3的則視為耐低溫菌株。經(jīng)低溫篩選后得到269株耐低溫雜交子。再通過RAPD

4、分子鑒定雜交子的真實(shí)性，共得到132株真實(shí)雜交子。
　　3.出菇試驗(yàn)驗(yàn)證:選取45株雜交株連同親本進(jìn)行28℃低溫出菇試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)菌株V6T3-1，V7T3-1生物轉(zhuǎn)化率分別為28.26％，18.57％，有明顯的超親優(yōu)勢。
　　4.農(nóng)藝性狀相關(guān)性分析:對草菇菌絲生長速度、蛋形期橫徑、縱徑、外菌膜厚度、原基出現(xiàn)時間、采收時間、生物轉(zhuǎn)化率做相關(guān)性分析。菌絲生長速度與生物轉(zhuǎn)化率呈正相關(guān)，說明菌絲生長越旺盛，長速越快的菌株，產(chǎn)量越高，所