石油降解菌的篩選及生物學(xué)特性研究.pdf

1、隨著石油工業(yè)的發(fā)展，石油污染問題日益嚴(yán)重。目前微生物法成為處理石油污染的重要手段之一，具有廣泛的應(yīng)用前景。微生物法存在的問題之一是缺少穩(wěn)定及適應(yīng)性強(qiáng)的菌株。本論文選取被石油污染的土樣，通過系統(tǒng)的富集篩選分離，獲得純種石油降解菌株，并對(duì)分離的菌株進(jìn)行了微生物形態(tài)學(xué)觀察、16SrDNA序列分析、降解性能研究及石油烴分解代謝基因的PCR檢測(cè)，以期為處理石油污染廢水及修復(fù)石油污染土壤的實(shí)際應(yīng)用提供相關(guān)理論依據(jù)和基礎(chǔ)。
　　 從石油污染土

2、壤樣品經(jīng)富集篩選、分離純化得到了36株具有石油降解能力的菌株。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)其中8株具有較明顯的石油降解能力，分別為KB1、2182、1217、122、1241、1321、2352、2323。選擇其中降解能力和生長較好的KB1菌株，進(jìn)行了系統(tǒng)研究。結(jié)果表明KB1菌落呈圓形，表面光滑且不透明，縱剖面低凸起，邊緣規(guī)整，顏色為淺黃色;革蘭氏染色為陽性，無芽孢，綜合形態(tài)學(xué)觀察、16SrDNA序列分析鑒定KB1為紅平紅球菌(Rhodococcus

3、erythropolis)。對(duì)KB1生長特征研究發(fā)現(xiàn)其在0-4h為停滯期，該期內(nèi)細(xì)菌生長緩慢，4-32h達(dá)到對(duì)數(shù)生長期，菌體數(shù)量成對(duì)數(shù)增加，32-64h為穩(wěn)定期，細(xì)胞的生長速率與死亡速率達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，64h之后菌體的生長進(jìn)入衰亡期。采用紫外分光光度法測(cè)得KB13d后對(duì)原油的降解率高達(dá)36.67％。根據(jù)微生物降解石油烴的主要代謝相關(guān)基因烷烴單氧酶(alkB1、alkB2)、萘雙加氧酶(ndoB)、甲苯雙加氧酶(todC1)、鄰苯二酚雙加氧