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文檔簡介
1、心房顫動(dòng)(atrial fibrillation,AF)是一種最常見的快速性心律失常,房顫的發(fā)病率有隨著年齡增加而增加的趨勢(shì)。在中國,成人房顫患病率約為0.77%,在英國65歲以上的老年人群中,約5%的人患有房顫,而在75歲以上的人群中房顫患者則高達(dá)10%。房顫的發(fā)生機(jī)制比較復(fù)雜,包括電生理機(jī)制、機(jī)械學(xué)機(jī)制和分子生物學(xué)機(jī)制等多方面致病因素。雖然已有諸多研究對(duì)房顫的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行探索,但到目前為止房顫的發(fā)生機(jī)制仍未完全明確。因此,從分子水平
2、對(duì)房顫的病因進(jìn)行研究,對(duì)明確房顫的發(fā)病機(jī)制及探索房顫新的治療方法和預(yù)防措施具有重要的意義。近年來,關(guān)于房顫的分子遺傳學(xué)方面的機(jī)制研究有了很大的進(jìn)展,越來越多的遺傳學(xué)證據(jù)被證實(shí)與房顫的發(fā)生相關(guān)。在這些房顫的遺傳學(xué)機(jī)制研究中,參與早期心臟發(fā)育的基因與房顫的相關(guān)性研究卻少有報(bào)道。肺靜脈的異常電活動(dòng)在陣發(fā)性房顫的發(fā)生中起著重要的作用,有學(xué)者對(duì)小鼠模型的研究發(fā)現(xiàn),Pitx2和Nkx2-5轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)異??捎绊懶∈蠓戊o脈的正常發(fā)育。TBX5是心臟發(fā)
3、育過程中一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子,國內(nèi)外諸多研究證實(shí)該基因突變或表達(dá)異??蓪?dǎo)致Holt-Oram綜合征(HOS)和人類單純性先天性心臟病(CHD),有研究證實(shí)該基因的rs3825214位點(diǎn)多態(tài)性與PR間期異常存在相關(guān)性。但是,Pitx2、Nkx2-5和TBX5基因的單核苷酸多態(tài)性在中國漢族人群中與房顫是否相關(guān)卻少有報(bào)道。
在本實(shí)驗(yàn)中,我們?nèi)脒x了房顫和非房顫患者共207例,進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性(SNPs)與房顫之間的關(guān)聯(lián)分析,旨在從遺傳
4、學(xué)角度考證rs2200733、rs251253和rs3825214位點(diǎn)多態(tài)性與房顫是否存在相關(guān)性。
目的:探討rs2200733、rs251253和rs3825214位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性與心房顫動(dòng)的相關(guān)性。
方法:
1.根據(jù)入選標(biāo)準(zhǔn),選擇符合入選條件的房顫病例和非房顫患者共207例進(jìn)行rs2200733、rs251253和rs3825214單核苷酸多態(tài)性與房顫的關(guān)聯(lián)性研究。
2.所有研究對(duì)象均采集外
5、周靜脈血,采用天根血液基因組DNA提取試劑盒進(jìn)行基因組DNA的提取。
3.采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)(PCR-RFLP)對(duì)含目的等位基因的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。
4.采用特定的限制性內(nèi)切酶對(duì)rs2200733、rs251253和rs3825214多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切反應(yīng),檢測(cè)樣本的基因型。
5.將標(biāo)本PCR產(chǎn)物回收進(jìn)行基因測(cè)序。
結(jié)果:
1.rs220073
6、3位點(diǎn)在入選人群中存在多態(tài)性,分別為TT、CT和CC型,其基因型頻率在房顫組和對(duì)照組分別依次為21.0%,65.0%,14.0%和29.0%,46.7%,24.3%?;蛐头植荚诜款澖M和對(duì)照組間有顯著差異(P=0.027),CT基因型頻率在房顫組明顯高于對(duì)照組(P=0.032)。C和T等位基因頻率在兩組間的分布無顯著差異(P>0.05)。
2.rs251253位點(diǎn)在入選人群中存在多態(tài)性,分別為GG、AG和AA基因型,其基因型頻
7、率在房顫組和對(duì)照組分別依次為70%,28%,2%和70.1%,25.2%,4.7%,基因型分布、G和A等位基因頻率在房顫組和對(duì)照組間均無顯著差異(P>0.05)。
3.rs3825214位點(diǎn)在入選人群中存在多態(tài)性,分別為GG、AG和AA型,其基因型頻率在房顫組和對(duì)照組分別依次為28.0%,60.0%,12.0%和15.9%,50.5%,33.6%。GG基因型在房顫組的頻率分布顯著高于對(duì)照組(P=0.035),AA基因型在房顫組
8、的頻率分布明顯低于對(duì)照組(P<0.001)。G和A等位基因頻率在房顫組和對(duì)照組分別為56.0%,44.0%和41.1%,48.9%,G和A等位基因頻率在兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。
結(jié)論:
1.rs251253位點(diǎn)多態(tài)性與房顫無明顯相關(guān)性。
2.rs2200733位點(diǎn)多態(tài)性與房顫存在相關(guān)性,CT基因型可能是房顫患者的一個(gè)遺傳易感因素。
3.TBX5基因rs3825214位點(diǎn)多態(tài)性與
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