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文檔簡介
1、目的:
rs10911021是一個單核苷酸多態(tài)性,在糖尿病人群中,其基因型與冠心病發(fā)病率密切相關(guān)。本研究的主要目的為探討rs10911021基因型與糖尿病冠脈病變特點(diǎn)的關(guān)聯(lián)性。
方法:
1.樣本來源:根據(jù)實(shí)驗(yàn)各階段需要,抽取就診于河南省人民醫(yī)院的住院病人的全血樣本于EDTA抗凝管中。其中用于提取RNA的樣本及時提??;用于提取DNA的樣本于4℃保存,1月內(nèi)提取。
2.測序:用全血基因組DNA提取試劑
2、盒提取全血樣本DNA;用 primer premier6.0軟件以rs10911021為靶點(diǎn)設(shè)計引物;用普通PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增;PCR產(chǎn)物送去上海生工進(jìn)行測序分析。
3.冠脈特點(diǎn)判斷:利用定量冠狀動脈造影(Quantitative Coronary Angiography,QCA)法獲得相關(guān)數(shù)據(jù):病變狹窄程度及病變長度;同時由冠脈介入工作10年,每年造影手術(shù)臺數(shù)超過1000例的同一名臨床醫(yī)師判斷并驗(yàn)證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
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3、.用總RNA提取試劑盒(TRIzol法)提取RNA;實(shí)時熒光定量PCR分析GLUL基因表達(dá)量。
5.應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)方法分析rs10911021不同基因型同糖尿病冠脈病變特點(diǎn)的聯(lián)系;應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)方法分析rs10911021與GLUL基因表達(dá)量的關(guān)聯(lián)。
結(jié)果:
1.rs10911021基因型分為T/T、T/C和C/C三種,C/C組多支(雙支或三支)病變率多于T/C組(p=0.039﹤0.05),T/C組多于T/T組(
4、p=0.023﹤0.05);T/C+C/C組多于T/T組(p=0.009﹤0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.冠脈狹窄最重處狹窄程度,三種基因型之間差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.589?0.05);冠脈狹窄最重處狹窄程度與糖尿病病程之間存在差異,有統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.044﹤0.05)。
3.冠脈病變彌漫性病變最長段長度,各組之間存在差異:C/C組長于T/C組(p=0.041﹤0.05);T/C組長于T/T組(p=0.
5、017﹤0.05);C/C+T/C組長于T/T組(p=0.007﹤0.05)。
4.各組之間GLUL基因表達(dá)量存在差異,有統(tǒng)計學(xué)意義:C/C組少于T/T組(p=0.011﹤0.05);C/C+T/C組少于T/T組(p=0.033﹤0.05)。
結(jié)論:
1.在糖尿病人群中,rs10911021的基因型與冠脈多支病變率及彌漫性病變長度相關(guān)。
2.該位點(diǎn)基因型與病變狹窄程度沒有相關(guān)性。
3.在
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