泰萬菌素防控豬繁殖與呼吸綜合征病毒的體外和體內(nèi)研究.pdf

1、PRRSV仍然是危害生豬養(yǎng)殖業(yè)的重大疫病之一，給全世界的生豬養(yǎng)殖業(yè)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。PRRSV感染引起母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃伊胎以及返情等繁殖障礙問題，公豬精液帶毒，各生產(chǎn)階段的豬均可出現(xiàn)呼吸道癥狀。感染豬體內(nèi)持續(xù)的病毒血癥與臨床癥狀嚴(yán)重程度有相關(guān)性，帶毒動(dòng)物可排毒傳染周圍的易感動(dòng)物，妊娠母豬處于病毒血癥期可發(fā)生垂直傳播導(dǎo)致胚胎先天感染PRRSV。泰萬菌素為泰樂菌素的衍生物，已被多項(xiàng)研究證實(shí)可抑制 PRRSV的復(fù)制，為新一代的獸用抗病

2、毒藥物。本研究從體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、人工感染豬的病毒血癥變化、攻毒保護(hù)試驗(yàn)、市場(chǎng)推廣應(yīng)用等方面研究泰萬菌素防控 PRRS的機(jī)理和應(yīng)用，為生豬養(yǎng)殖業(yè)使用該藥物防控PRRSV提供參考。
　　體外實(shí)驗(yàn)采用0μg/ml、0.1μg/ml、1.0μg/ml、10μg/ml、50μg/ml的泰萬菌素孵育Marc145細(xì)胞，每個(gè)濃度梯度設(shè)立接種PRRSV組和對(duì)照組，接毒組按1％劑量接種PRRSV CH-1r株毒液。試驗(yàn)結(jié)果表明，泰萬菌素對(duì)Marc14

3、5無細(xì)胞毒性，不影響細(xì)胞生長(zhǎng)，泰萬菌素孵育的接毒組對(duì)應(yīng)TCID50分別為107.22、106.62、106.26、104.68、102.52、空白對(duì)照組的TCID50為0，泰萬菌素在1.0μg/ml濃度時(shí)可見PRRSV的CPE減少，泰萬菌素50μg/ml濃度能很好的抑制PRRSV復(fù)制，與Stuart、M Takagi、Zhaoz等人的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致，本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)泰萬菌素能抑制PRRSV CH-1r毒株復(fù)制，且濃度越高抑制PRRSV復(fù)制

4、的能力越強(qiáng)。
　　體內(nèi)試驗(yàn)為驗(yàn)證泰萬菌素對(duì) PRRSV人工感染豬的病毒血癥的影響，將經(jīng)ELISA和PCR檢測(cè)雙陰性的仔豬分A、B和C組3組，A組口服150ppm泰萬菌素，試驗(yàn)第7天攻毒，A組和B組試驗(yàn)動(dòng)物分別肌注和滴鼻3ml105.0 TCID50/mL PRRSV JXA-1株，C組滴鼻和注射等量的生理鹽水，攻毒后第0、3、5、7、10、14、21日采血實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)血液中的PRRSV病毒拷貝數(shù)，給藥組攻毒后第3天檢測(cè)

5、血液中病毒拷貝數(shù)為0，而陽性對(duì)照組在攻毒3天后血液病毒拷貝數(shù)達(dá)到104，第5天達(dá)到最高峰108.5，之后逐漸下降，陰性對(duì)照組無病毒血癥出現(xiàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明泰萬菌素在體內(nèi)可抑制 PRRSV病毒復(fù)制，減少感染豬PRRSV的病毒血癥或縮短PRRSV病毒血癥持續(xù)時(shí)間。
　　攻毒保護(hù)試驗(yàn)是將ELISA和PCR檢測(cè)雙陰性的25日齡斷奶仔豬15頭分為A、B、C三組，A組口服給藥泰萬菌素150ppm，B組為陽性對(duì)照，C空白對(duì)照。藥物組給藥7天后和陽

6、性對(duì)照組同時(shí)分別肌注和滴鼻3ml105.0 TCID50/ml的PRRSV JXA-1毒株，攻毒當(dāng)天計(jì)為第0天，攻毒后連續(xù)21天測(cè)量直腸體溫，觀察各組仔豬的食欲變化，精神狀態(tài)以及是否死亡；第-7、0、7、14、21天整組稱重，對(duì)比各組體重增加值和日增重（ADG）。試驗(yàn)過程中如有死亡立即解剖，其余動(dòng)物在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)安樂死解剖觀察臟器病變，并統(tǒng)計(jì)肺部病變計(jì)分。結(jié)果顯示A組僅在攻毒第0-2天有發(fā)熱，第3天基本恢復(fù)正常，B組第3-10天體溫急劇升

7、高，其中2頭仔豬（B1和B5）分別在第11天和12天死亡。肺部病變計(jì)分A、B、C三組的平均分分別為16.4、53.2、12.2。
　　田間試驗(yàn)結(jié)果顯示目前該藥物臨床主要應(yīng)用于保育豬和育肥豬的呼吸道疾病預(yù)防保健，減少仔豬的死淘率，以及母豬妊娠階段和哺乳階段使用降低農(nóng)場(chǎng)流產(chǎn)率和返情率。獲得發(fā)明專利的英國(guó)伊科動(dòng)保集團(tuán)在全球市場(chǎng)泰萬菌素的銷售額以11%年增長(zhǎng)，在中國(guó)以18%年增長(zhǎng)。
　　總之，體外Marc145細(xì)胞試驗(yàn)表明泰萬菌素可