五加科人參屬中藥皂苷類化合物的分離提取及抗氧化活性研究.pdf

1、人參、西洋參和三七系五加科人參屬藥材中的三種重要代表，其主要有效成分均為達瑪烷型人參皂苷。大量研究結果表明：皂苷類化合物具有較強的生物活性，因此，對于人參皂苷的研究和開發(fā)具有重要的理論意義和實際應用價值。
　　 （1）分別采用回流、超聲和溫浸提取法對人參、西洋參和三七中的皂苷類化合物進行了分離提取對比研究，并應用高效液相色譜法（HPLC）對皂苷類化合物進行定量分析，對比研究表明超聲提取法快速、安全、簡便、成本低且不破壞成分，在此

2、基礎上，采用超聲提取法對三種藥材中的皂苷類化合物進行大量的分離提取，總皂苷粗提物應用高速逆流色譜技術進行分離純化研究。
　　 （2）本文采用高速逆流色譜技術（HPCPC）和蒸發(fā)光檢測器（ELSD）的聯(lián)用技術對皂苷類化合物進行分離純化，建立了HPCPC-ELSD法分離五加科人參屬中藥的皂苷類化合物的新方法。采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v)為溶劑體系，經一次分離從三七總皂苷粗提物中分離純化得到三七皂苷R1，人參皂苷

3、Rg1、Re和Rb1；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v)為溶劑體系，從西洋參總皂苷粗提物中分離得到了Re、Rb1和Rc；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(0.8:1.2:2，v/v/v)為溶劑體系，從人參總皂苷粗提物中分離得到了人參皂苷Rb1和Rb2兩種單體皂苷。應用HPLC-ELSD技術對分離得到的皂苷類化合物進行分析，通過與已知化合物的保留時間相對比，進行定性分析；根據(jù)其峰面積百分比，確定其純度均在95％以上。應用電噴霧串聯(lián)

4、質譜（ESI-MSn）進一步確定化合物的結構。結果表明，應用HPCPC-ELSD從中草藥粗提物中分離無紫外吸收或者紫外末端吸收的活性物質是一種高效可行的分離技術，HPLC-ELSD和MSn為皂苷類化合物純度檢驗和鑒定分析提供了較好的分析方法。
　　 （3）以人參、西洋參和三七的回流、超聲和溫浸提取的皂苷類化合物為研究對象評價其抗氧化活性。首次采用Photochemi-luminescence (PCL)抗氧化活性體外評價體系為分

5、析平臺系統(tǒng)考察皂苷類化合物的抗氧化活性，并利用DPPH法進行對照評價。結果表明：三七總皂苷，超聲提取物抗氧化能力最佳，在PCL法中相當于2.53 nmol Vc，在DPPH法中其清除率為32.57％，其總皂苷含量為209.62 mg/g；回流提取物1.71nmol、30.82％，總皂苷128.97 mg/g；溫浸提取物1.07 nmol、18.60％，總皂苷100.44 mg/g，其抗氧化能力和皂苷含量呈量效關系。對于西洋參和人參總皂苷

6、，超聲提取物皂苷含量最高（73.27 mg/g和17.48 mg/g），依次為回流（52.26 mg/g和10.42 mg/g）和溫浸提取物（48.62 mg/g和9.89 mg/g）；但在抗氧化實驗中，回流提取物清除自由基能力（2.28 nmol和23.62％，0.63 nmol和22.98％）比超聲提取物強（2.18 nmol和23.51％，0.61nmol和21.20％），但兩者相差不大；溫浸提取物抗氧化能力最低（1.07 nmo