同種異體去細胞外周神經支架與細胞外ATP誘導聯(lián)合移植的實驗研究.pdf

1、目的:制備去細胞同種異體神經支架并利用其對神經軸突生長的引導作用,聯(lián)合細胞外ATP對神經軸突生長的誘導作用和延緩失神經支配骨骼肌萎縮作用,修復大鼠坐骨神經10nm缺損,研究該聯(lián)合方法修復神經缺損的效果,為臨床應用提供理論依據(jù)。
　　 方法:取材大鼠的雙側坐骨神經,采用TritonX-100與脫氧膽酸鈉序貫脫細胞處理、降低其免疫原性,制備成僅有細胞外組織的同種異體神經支架;將SD大鼠64只,隨機分4組,每組16只;分別是實驗組(G

2、roupA)、自體神經移植組(GroupB)、空白組(GroupC)、正常組(GroupD),前三組做成右側坐骨神經缺損模型后分別如下處理:A組:用脫細胞異體神經橋接坐骨神經缺損,術后右側腓腸肌注射ATP;B組:用自體坐骨神經原位橋接坐骨神經缺損;C組:做成動物模型后縫合皮膚。術后3個月、6個月做足印實驗,計算坐骨神經功能指數(shù)(SFI)、電生理檢測計算坐骨神經傳導速度(NCV)、甲苯氨藍染色檢查,計算神經軸突平均面積和密度、透射電鏡觀察

3、再生神經超微細結構、測定肌濕重、乙酰膽堿酯酶(AchE)染色觀察運動終板(MEP)形態(tài)變化。
　　 結果:大體觀察:手術的三組大鼠術后均出現(xiàn)不同程度的右后足失神經性營養(yǎng)不良改變,以C組明顯,A組和B組相似。術后三個月和六個月,A組和B組有部分功能恢復,且兩組6個月時恢復效果好于3個月,但仍差于D組;C組于3個月和6個月均無可視性功能恢復。A組與B組再生神經外觀與正常神經組織相似;C組無神經或其它組織相連。坐骨神經功能指數(shù)與腓腸肌

4、濕重:不論是術后3個月還是6個月,A、B組間差別無統(tǒng)計學意義,均好于C組而差于D組,且6個月時好于3個月;A組再生神經有髓神經纖維軸突的密度不及B組,與D組間差別無統(tǒng)計學意義;A組有髓神經纖維軸突的面積大于B組,小于D組;3個月時B組坐骨神經傳導速度(NCV)大于A組,小于D組;6個月時A、B組差別無統(tǒng)計學意義,但均小于D組;空白對照組無神經再生證據(jù)。
　　 結論:1、去細胞同種異體神經支架可以引導神經軸突的再生,不引起明顯的排