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文檔簡介
1、本實驗以南瓜葉為原材料,研究了南瓜葉乙醇提取物的制備條件以及南瓜葉乙醇提取物的急性毒性和對小鼠免疫功能的影響,主要結論如下:
1.以多酚化合物和維生素C的含量為考察指標,通過比較南瓜鮮葉、50℃干燥葉和100℃干燥葉的差異,得到50℃干燥處理南瓜葉為較優(yōu)研究材料。同時,比較了水、50%乙醇、50%丙酮、50%甲醇、50%乙酸乙酯作為提取溶劑時提取物中多酚類化合物和維生素C的含量,綜合考慮選擇乙醇為最終提取溶劑。
2、 結合單因素試驗和正交試驗,確定南瓜葉乙醇提取物中多酚化合物和維生素C含量影響因素的次序為乙醇體積分數(shù)>提取溫度>提取時間>料液比,優(yōu)化的提取條件為乙醇體積分數(shù)55%、提取溫度50℃、提取時間2h和料液比1∶16 g/mL。提取物主要成分測定表明:水分的質量分數(shù)為10.32±0.58%,粗蛋白質的質量分數(shù)為15.96±0.71%,粗脂肪的質量分數(shù)為5.01±0.12%,總糖的質量分數(shù)為29.62-±0.69%,粗灰分的質量分數(shù)為10.
3、77±0.11%,同時,多酚化合物和維生素C含量分別達到35.24±0.37 mg/g和8.73±0.47 mg/g。
2.急性毒性試驗表明:南瓜葉乙醇提取物屬于無毒級。各劑量組均未表現(xiàn)出毒性反應,得知南瓜葉乙醇提取物的LD50>18.0g/kg·bw,根據(jù)LD50劑量分級標準,屬無毒級。南瓜葉乙醇提取物對小鼠的生長性能影響不顯著,且性別與體重增長和食物利用率無相關性。
分析發(fā)現(xiàn),除白細胞計數(shù)外各劑量組小鼠血
4、液學其他指標均在正常范圍內,而在高劑量時,白細胞和血小板指標與各劑量組間有差異顯著性,同時也表現(xiàn)出不同性別之間的差異;給藥將劑量在8g/kg·bw以下,未顯示出差異顯著性。同時,各主要臟器的臟體比均在正常范圍內,且隨乙醇提取物劑量增加,胸腺指數(shù)呈下降的趨勢,脾臟指數(shù)呈上升趨勢。
3.環(huán)磷酰胺免疫造模前,各組小鼠體重增長趨勢相近,無差異顯著性(P>0.05);造模成功后,免疫低下劑量組和模型組均出現(xiàn)體重下降的現(xiàn)象。同時,小鼠
5、臟器均未出現(xiàn)病變,顏色和形狀均正常,其臟體比均在正常范圍內,尤其驗證了保肝護肝作用和對胸腺和脾臟生長的促進功能。
免疫調節(jié)作用研究表明,南瓜葉乙醇提取物對小鼠免疫功能有促進作用。南瓜葉乙醇提取物能增強細胞免疫功能,能顯著提高小鼠的T淋巴細胞增殖能力和促進T細胞介導的免疫反應;南瓜葉乙醇提取物可提高體液免疫應答,當在較高濃度時可促進小鼠抗體生成能力,對血清溶血素的分泌影響不顯著;南瓜葉乙醇提取物還可增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞
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