我國野生菰米的血糖生成指數(shù)及其調控脂毒性改善大鼠胰島素抵抗的作用.pdf

1、目的:(1)了解我國野生菰米的血糖生成指數(shù)，為糖尿病病人的日常膳食指導與應用提供參考依據(jù)。(2)觀察我國野生菰米對高脂膳食誘導的胰島素抵抗大鼠的血脂血糖水平、炎性因子和脂肪因子含量的影響，胰島β細胞葡萄糖刺激胰島素分泌(GSIS)功能和胰島β細胞胰島素合成能力，肝臟組織中過氧化物酶體增殖物激活受體（PPA Rα)、胰島素受體底物1(IRS-1)、胰島素受體底物2(IRS-2)、核轉錄因子(NF-κB)和脂肪組織中過氧化物酶體增殖物激活受

2、體（PPARγ）、胰島素受體底物1(IRS-1)、胰島素受體底物2(IRS-2)、核轉錄因子(NF-κB) mRNA表達水平的影響，探討我國野生菰米如何通過調控脂毒性改善胰島素抵抗的作用，為發(fā)現(xiàn)新的作用靶點以及菰米用以營養(yǎng)干預防止和延緩T2DM提供新的理論依據(jù)。
　　方法:(1)8位受試者空腹10-14小時后，清晨抽取靜脈血，然后再分別抽取服用口服葡萄糖溶液后以及食用熟制菰米后第15、30、45、60、90、120min時的靜脈血

3、，并測定血清葡萄糖濃度，利用Jenkins和Wolever公式，繪制AUC曲線圖，依據(jù)血糖曲線下增值面積比，計算并分析我國野生菰米的血糖生成指數(shù)GI。(2)50只雄性SD大鼠適應性喂養(yǎng)一周后，斷尾采血，分離出血清，測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)。根據(jù)血糖水平，將試驗大鼠隨機分成陰性對照組(N)、胰島素抵抗模型組(Y)、

4、高劑量菰米組(G)、低劑量菰米組(D)和米面組(M)。(3)在AIN-93動物合成飼料配方的基礎上適當調整蛋白質和蔗糖的比例，增加飽和脂肪酸的含量，同時用菰米粉、大米粉和面粉按一定比例代替高脂飼料中蔗糖和淀粉部分，配制成高劑量菰米組、低劑量菰米組和米面組飼料。陰性對照組給予基礎飼料，其他四組分別給予高脂飼料、高劑量菰米飼料、低劑量菰米飼料和米面飼料。(4)按以上飼料供給，連續(xù)喂養(yǎng)8周，每2周尾靜脈采血測定大鼠FPG、FINS、TC、TG

5、、HDL-C和LDL-C;實驗結束后頸椎脫臼處死大鼠，股動脈取血測定游離脂肪酸(FFAs)、糖化血紅蛋白(GHbAIc)、胰高血糖素(GC)、超敏C反應蛋白(hs-CRP)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素-6（IL-6）、脂聯(lián)素(ADP)、瘦素(Lep)、抵抗素(Res)，并分離出肝臟、脾臟、腎周和睪周脂肪，稱重，計算臟體比和脂體比，同時檢測各組大鼠肝臟組織病理學的改變。計算大鼠的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)和敏感指數(shù)(IS

6、I)。(5)采用Dextran密度梯度離心法分離純化大鼠胰島，然后分別在含5.5 mmol/L和27.0 mmol/L葡萄糖濃度的RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)48h，收集培養(yǎng)液和胰島β細胞以測定大鼠葡萄糖刺激胰島素分泌GSIS及胰島β細胞內(nèi)胰島素的含量。(6)運用半定量RT-PCR技術測定大鼠肝組織中PPAR、IRS-1、IRS-2、NF-κB及大鼠脂肪組織中PPARγ、IRS-1、I RS-2、NF-κB mRNA的表達。
　　

7、結果:(1)我國野生菰米的血糖生成指數(shù)GI為53.72。(2)動物實驗結果表明，與胰島素抵抗模型組、米面組大鼠相比，高劑量菰米組大鼠的體重、FPG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、內(nèi)臟脂肪重量及臟體脂體比、FFAs、GHbAlc、GC，hs-CRP、TNF-α、IL-6、Lep、Res水平均明顯下降(P＜0.05），HDL-C、ADP以及ISI水平均明顯上升(P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組和陰性對照組之間無顯著性差異(

8、P＞0.05），且高劑量菰米組對血脂血糖的改善作用優(yōu)于低劑量菰米組;米面組與胰島素抵抗模型組水平相當。實驗大鼠HE切片結果顯示，菰米組可以顯著減輕大鼠肝臟脂肪變性和炎性程度，并且高劑量菰米組要比低劑量菰米組效果明顯。(3)與陰性對照組相比，胰島素抵抗模型組和米面組大鼠胰島β細胞葡萄糖刺激胰島素分泌GSIS功能明顯下降（P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組與陰性對照組之間GSIS功能無顯著差異(P＞0.05)，且高劑量菰米組GSIS

9、功能高于低劑量菰米組;米面組接近胰島素抵抗模型組。(4)高劑量菰米組較胰島素抵抗模型組、米面組大鼠肝臟組織中PPARα、IRS-1、IRS-2表達顯著升高(P＜0.05)，NF-κB表達顯著下降(P＜0.05)，脂肪組織中PPARγ、IRS-1、IRS-2表達顯著升高(P＜0.05)，NF-κB表達顯著下降（P＜0.05）;高劑量菰米組、低劑量菰米組和陰性對照組之間表達水平無顯著差異（P＞0.05）;米面組和胰島素抵抗模型組表達水平相當