放線菌M34菌株及其發(fā)酵液抗菌活性物質(zhì)的初步研究.pdf

1、本研究以華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獅子山的土樣中所分離得到的一株抗植物病原菌的放線菌M34為研究對象，對該菌株的分類、發(fā)酵液的抗菌活性和穩(wěn)定性及抗菌物質(zhì)的初步鑒定進行了研究，主要結(jié)果如下： 1.通過對M34菌株的形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征和生理生化特征的研究，初步得出M34菌株屬于放線菌的灰褐類群。 2.抑制菌絲生長生測結(jié)果表明，M34菌株發(fā)酵液在測定的13種供試真菌中，對玉米小斑病菌(Bipolariamaydis)和油菜菌核病菌(Scle

2、rotiniasclerotiorum)的抑制效果最好，分別達到93.2％和90.3％；對水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)、棉花炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)的抑制率都在80％以上；對甘蔗風(fēng)梨病菌(Thielaviopsisparadoxa)、小麥赤霉病菌(Gibberellazeae)、草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)、蘋果青霉病菌(Penicilliumital

3、icum)的抑制率都在70％以上。管碟法生測結(jié)果表明M34菌株在31℃，36h的發(fā)酵液對根癌土桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、都有明顯的抑菌作用，其抑菌圈直徑分別為31mm、23mm，而對蘇云金芽胞桿菌(Bacillusthuringiensi)、甜豌豆帶化菌(Rhodococcusfacians)、發(fā)根土桿菌(Agrobacteriumrhizoge

4、ns)的抑菌作用不強，抑菌圈直徑只有17mm、15mm、12mm，而對花生青枯菌(Ralstoniasolanacearum)則沒有抑菌作用。盆栽試驗表明M34菌株發(fā)酵液對油菜菌核病(Sclerotiniasclerotiorum)有一定的保護和治療作用，防治效果分別為76.01％和55.13％。 3.穩(wěn)定性研究結(jié)果表明：M34菌株經(jīng)連續(xù)10次轉(zhuǎn)管培養(yǎng)后，其第10代的抑菌圈直徑比出發(fā)菌株減少了37.5％(9mm)，可見其傳代穩(wěn)定

5、性一般。其發(fā)酵液的活性成分對熱不穩(wěn)定，70℃時加熱30min時其抑菌圈直徑減小8.9％，活性有明顯的下降。其有效成份對酸堿不穩(wěn)定，在pH值6～8范圍以外，常溫條件下，其活性有較明顯的下降；對紫外光有較強的穩(wěn)定性。 4.經(jīng)典的pH紙層析和紙電泳實驗結(jié)果表明，初步判斷M34菌株發(fā)酵液中有效成分為中性化合物。萃取試驗表明M34發(fā)酵液中抗菌活性物質(zhì)極性較強，Doskochilova溶劑系統(tǒng)紙層析結(jié)果表明，M34菌株發(fā)酵液產(chǎn)生的抗菌活性物