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1、本研究以華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獅子山的土樣中所分離得到的一株抗植物病原菌的放線菌M34為研究對(duì)象,對(duì)該菌株的分類、發(fā)酵液的抗菌活性和穩(wěn)定性及抗菌物質(zhì)的初步鑒定進(jìn)行了研究,主要結(jié)果如下: 1.通過對(duì)M34菌株的形態(tài)觀察、培養(yǎng)特征和生理生化特征的研究,初步得出M34菌株屬于放線菌的灰褐類群。 2.抑制菌絲生長(zhǎng)生測(cè)結(jié)果表明,M34菌株發(fā)酵液在測(cè)定的13種供試真菌中,對(duì)玉米小斑病菌(Bipolariamaydis)和油菜菌核病菌(Scle
2、rotiniasclerotiorum)的抑制效果最好,分別達(dá)到93.2%和90.3%;對(duì)水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)、棉花炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)的抑制率都在80%以上;對(duì)甘蔗風(fēng)梨病菌(Thielaviopsisparadoxa)、小麥赤霉病菌(Gibberellazeae)、草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)、蘋果青霉病菌(Penicilliumital
3、icum)的抑制率都在70%以上。管碟法生測(cè)結(jié)果表明M34菌株在31℃,36h的發(fā)酵液對(duì)根癌土桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、都有明顯的抑菌作用,其抑菌圈直徑分別為31mm、23mm,而對(duì)蘇云金芽胞桿菌(Bacillusthuringiensi)、甜豌豆帶化菌(Rhodococcusfacians)、發(fā)根土桿菌(Agrobacteriumrhizoge
4、ns)的抑菌作用不強(qiáng),抑菌圈直徑只有17mm、15mm、12mm,而對(duì)花生青枯菌(Ralstoniasolanacearum)則沒有抑菌作用。盆栽試驗(yàn)表明M34菌株發(fā)酵液對(duì)油菜菌核病(Sclerotiniasclerotiorum)有一定的保護(hù)和治療作用,防治效果分別為76.01%和55.13%。 3.穩(wěn)定性研究結(jié)果表明:M34菌株經(jīng)連續(xù)10次轉(zhuǎn)管培養(yǎng)后,其第10代的抑菌圈直徑比出發(fā)菌株減少了37.5%(9mm),可見其傳代穩(wěn)定
5、性一般。其發(fā)酵液的活性成分對(duì)熱不穩(wěn)定,70℃時(shí)加熱30min時(shí)其抑菌圈直徑減小8.9%,活性有明顯的下降。其有效成份對(duì)酸堿不穩(wěn)定,在pH值6~8范圍以外,常溫條件下,其活性有較明顯的下降;對(duì)紫外光有較強(qiáng)的穩(wěn)定性。 4.經(jīng)典的pH紙層析和紙電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,初步判斷M34菌株發(fā)酵液中有效成分為中性化合物。萃取試驗(yàn)表明M34發(fā)酵液中抗菌活性物質(zhì)極性較強(qiáng),Doskochilova溶劑系統(tǒng)紙層析結(jié)果表明,M34菌株發(fā)酵液產(chǎn)生的抗菌活性物
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