VEGF、PIGF與兒童星形細(xì)胞瘤分級(jí)及預(yù)后關(guān)系的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的：星形細(xì)胞瘤系在形態(tài)學(xué)或免疫表型上表明來(lái)源于神經(jīng)上皮組織的顱內(nèi)常見(jiàn)的腫瘤，占顱內(nèi)原發(fā)腫瘤的 60﹪<'[1]>。星形細(xì)胞瘤是兒章顱內(nèi)最常見(jiàn)的腫瘤之一，約占兒童顱內(nèi)腫瘤的 55﹪。星形細(xì)胞瘤由于其組織學(xué)形態(tài)復(fù)雜，病理分級(jí)煩瑣，免疫表型差異較大，故其預(yù)后差異顯著、難以判斷。近年來(lái)研究表明，血管新生與腫瘤生長(zhǎng)密切相關(guān)，星形細(xì)胞瘤又是富含血管的腫瘤，故為評(píng)價(jià)其預(yù)后而研究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族(vascular endothelial g

2、rowth factor，VEGF)尤為重要，胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(placenta growth factor，PIGF)系VEGF家族新成員，已發(fā)現(xiàn)在一些腫瘤中有不同程度的表達(dá)，但對(duì)星形細(xì)胞瘤而言研究甚少，尤其是兒童星形細(xì)胞瘤，至今國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)PIGF與之血管新生關(guān)系的報(bào)道，為了進(jìn)一步明確兒童星形細(xì)胞瘤預(yù)后影響因素，指導(dǎo)臨床治療，提高患兒生存率，選取病變典型的 105 例星形細(xì)胞瘤進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，并對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 材

3、料及方法： 1．材料 105 例兒童星形細(xì)胞瘤標(biāo)本來(lái)自沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院，時(shí)間從 1981 年至2005年診斷明確病例，年齡從0.5到14歲不等，男53例，女52例，活檢蠟塊重新切片，HE染色及形態(tài)學(xué)復(fù)習(xí)。 2．方法 免疫組化方法：P1GF 多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)SantaCruz公司，CD34、vEGF 單克隆抗體均由上海長(zhǎng)島試劑公司提供，采用鏈霉菌抗生物素蛋白一氧化物酶連接法(Streptavidin/Pe

4、roxidase，SP)按常規(guī)步驟進(jìn)行，除一抗分別為CD34、VEGF、PIGF外，其余步驟均相同。陰性對(duì)照采用0.01M PBS液體代替一抗，其他步驟不變，陽(yáng)性對(duì)照采用內(nèi)對(duì)照。 3．結(jié)果判定 3．1 腫瘤微血管密度(MVD)判斷標(biāo)準(zhǔn)：CD34標(biāo)記微血管，計(jì)算腫瘤內(nèi)著色的毛細(xì)血管和微小血管。按照Weidner的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)<'[2]>，凡呈現(xiàn)棕色單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇均作為1個(gè)血管計(jì)數(shù)，但肌層較厚及管腔而積大于8個(gè)紅細(xì)胞

5、直徑的血管不計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法：在200倍視野下計(jì)數(shù)每個(gè)視野內(nèi)CD34陽(yáng)性血管數(shù)，每例隨機(jī)選擇4個(gè)不重復(fù)的視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，求出平均值，計(jì)算每例單位視野內(nèi)平均血管數(shù)，即為該例腫瘤的微血管密度(microvessel-density，MVD)值(個(gè)/x200) 3.2 VEGF、PIGF判斷標(biāo)準(zhǔn)：VEGF與PIGF均在以細(xì)胞漿呈現(xiàn)棕黃色著色，CD34表達(dá)陽(yáng)性為血管內(nèi)皮細(xì)胞被染成黃褐色． 3.3統(tǒng)計(jì)分析：數(shù)掘統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS11.5軟件，

6、采用x<'2>檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和SDearman等級(jí)相關(guān)分析。 結(jié)果：免疫組化檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)。在105例兒童星形細(xì)胞瘤中，PIGF的表達(dá)值在Ⅰ、Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞瘤與高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ\級(jí))星形細(xì)胞瘤間均存在差異(P<0.05)。VEGF在Ⅰ、Ⅱ級(jí)與高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ級(jí))星形細(xì)胞瘤問(wèn)的表達(dá)也均有差異(P<0.05)，并且在Ⅰ級(jí)星形細(xì)胞瘤與高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ級(jí))星形細(xì)胞瘤的表達(dá)差異顯著(P<0.0 1)。MVD值在Ⅰ、Ⅱ級(jí)與高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ級(jí))星形細(xì)胞瘤互

7、相間均存在顯著性差異(P<0.01)。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，在高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ級(jí))星形細(xì)胞瘤中，VEGF表達(dá)與MVD值呈明顯正相關(guān)(r=0.541，P<0.01)，PIGF表達(dá)與MVD值亦呈明顯正相關(guān)(r=0.392，P<0.01)，而VEGF與PIGF在高級(jí)別(Ⅲ、Ⅳ級(jí))星形細(xì)胞瘤表達(dá)中兩者之間存在正相關(guān)(r=0.486 P<0.05)。 結(jié)論： 1.PIGF在三類(lèi)不同性質(zhì)兒童星形細(xì)胞瘤中均有不同程度的表達(dá)，且表達(dá)程度隨級(jí)別的