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文檔簡介
1、紫杉醇是從紅豆杉科紅豆杉屬植物中分離出的一個(gè)具有獨(dú)特作用機(jī)制的抗癌二萜類化合物,對(duì)卵巢癌、乳腺癌等癌癥具有很好的治療作用。紫杉醇的臨床需求量大,但來源少,從紅豆杉植物中提取仍然是紫杉醇的主要來源。在紅豆杉中,紫杉醇的干重僅為0.02%,而7-木糖-10-去乙酰紫杉醇(7XDT)的含量是紫杉醇的10倍以上,但都作為廢物未被利用。7XDT去掉C-7位木糖基即轉(zhuǎn)變?yōu)?0-去乙酰紫杉醇(10DT),再在其10位上經(jīng)過酰化反應(yīng)即可形成紫杉醇。因此
2、,如何利用這一資源成為該研究領(lǐng)域的一個(gè)重要課題。
本研究從紅豆杉植物的枝葉及其生長的土壤、檜柏樹下腐葉覆蓋的土壤中篩選出的多種菌株復(fù)篩,并通過4-甲基傘形花內(nèi)酯-7B-D-木糖作為熒光標(biāo)記底物進(jìn)行菌種純化,結(jié)合薄層層析(TLC)、高效液相色譜技術(shù)(HPLC)、高效液相色譜紫外光譜聯(lián)用(LC-UV)等方法獲得了一個(gè)具有選擇性水解7XDT上7位木糖殘基的細(xì)菌菌株,命名為imm-21。進(jìn)一步研究了培養(yǎng)基成分、溫度、pH值、菌量和
3、底物濃度等因素對(duì)菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT的影響,在優(yōu)化條件下,分析了菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT的動(dòng)態(tài)。結(jié)果表明:麥麩培養(yǎng)基比LB培養(yǎng)基更有利于菌株imm-21轉(zhuǎn)化7XDT;麥麩培養(yǎng)基含0.4%硫酸銨顯著提高imm-21菌株轉(zhuǎn)化7XDT的效率:在麥麩培養(yǎng)基中無論是添加燕麥木聚糖還是樺木木聚糖對(duì)轉(zhuǎn)化效率沒有明顯影響;26℃不僅適合imm-21菌株的生長,也非常適合其對(duì)7XDT的轉(zhuǎn)化;pH6.0為imm-21菌株轉(zhuǎn)化7XDT為10DT的
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