三種烏頭類中藥神經(jīng)毒性體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、烏頭類中藥附子、川烏、草烏及其炮制品均為臨床上常用中藥，具有鎮(zhèn)靜、消炎鎮(zhèn)痛、強(qiáng)心、抗腫瘤等作用，常用于多種疼痛的治療。其主要藥效成份烏頭生物堿(烏頭堿、中烏頭堿、次烏頭堿等)具有心臟毒性并可損害外周神經(jīng)系統(tǒng)如脊髓，但缺乏深入系統(tǒng)的研究。以往研究均采用烏頭生物堿，不能完全反映烏頭類中藥藥理毒理學(xué)的特征。本課題采用大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)與胚胎大鼠海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)方法，研究三個(gè)具有代表性的烏頭類中藥的神經(jīng)毒性，為揭示其潛在的神經(jīng)毒性、闡明毒性特征及合

2、理的臨床應(yīng)用提供充分的科學(xué)依據(jù)。 體外研究采用胚胎大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中，用不同濃度的生川烏、生草烏、生附子提取物處理海馬神經(jīng)元不同時(shí)間后，檢測(cè)細(xì)胞存活狀況，計(jì)算細(xì)胞生存抑制率與半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞生存抑制率逐漸增，生川烏IC<,50>約為17.5 mg/ml，生草烏tC50約為8.02 mg/ml，生附子IC<,50>約為22.04 mg/ml，這表明生川烏、生草

3、烏和生附子對(duì)體外海馬神經(jīng)元均具有較明顯的細(xì)胞毒性；對(duì)體外海馬神經(jīng)元細(xì)胞的毒性強(qiáng)度依次為生草烏>生川烏>生附子。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)分別設(shè)立了生川烏及生草烏各三個(gè)劑量組和對(duì)照組。各實(shí)驗(yàn)組大鼠連續(xù)灌胃給藥90天，每天一次，定期觀察大鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)狀況、腺體分泌、瞳孔變化等情況。給藥結(jié)束后宰殺三分之二大鼠，測(cè)定其血液學(xué)、血液生化指標(biāo)；稱量腦組織，計(jì)算臟器系數(shù)，并觀察腦組織的病理學(xué)改變。剩余大鼠停藥30天后解剖，檢查上述各項(xiàng)指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥期間

4、各組大鼠精神狀態(tài)良好，活動(dòng)正常，皮毛光澤良好，未見異常的神經(jīng)行為學(xué)改變，如嗜睡、不安、肌顫、驚厥等。血液學(xué)指標(biāo)中，生川烏與生草烏高、中、低劑量組的血小板計(jì)數(shù)(PLT)低于對(duì)照組；生川烏高、低劑量組的平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)高于對(duì)照組；生草烏中劑量組的平均紅細(xì)胞容積(MCV)低于對(duì)照組；生川烏高劑量組的平均紅細(xì)胞血紅蛋白(MCH)低于對(duì)照組，上述差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但無劑量效應(yīng)關(guān)系，且在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，因此無毒理學(xué)意義。其他血液

5、學(xué)指標(biāo)藥物組與對(duì)照比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。血液生化指標(biāo)中生川烏中、低劑量組的天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)，中劑量組的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)，高、中、低劑量組的總膽紅素(TBIL)均低于對(duì)照組，生草烏低劑量組的AST、ALT，高、中、低劑量組的TBIL低于對(duì)照組。上述指標(biāo)的差異雖然具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但均在正常范圍內(nèi)，無劑量效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)。此外，中、低劑量的生草烏肌酐(CREA)及尿素氮(UREA)與對(duì)照組比較均在正常范圍內(nèi)波動(dòng)。藥物組其余

6、各項(xiàng)血液生化指標(biāo)與對(duì)照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；謴?fù)期結(jié)束后，各給藥組大鼠精神、行為狀況均未見異常；藥物組的AST、TBIL在正常范圍內(nèi)波動(dòng)，其余血液學(xué)和血液生化指標(biāo)未見異常，腦臟器系數(shù)與腦組織學(xué)檢查也未見異常。因此，受試的兩種烏頭類中藥未表現(xiàn)出遲發(fā)性神經(jīng)毒性。 本課題研究表明，盡管受試烏頭類中藥對(duì)大鼠未產(chǎn)生明顯的神經(jīng)毒性，但在體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元試驗(yàn)中，表現(xiàn)出對(duì)神經(jīng)元生存的抑制效應(yīng)，表明受試烏頭類中藥對(duì)中樞神經(jīng)仍具有潛在的神經(jīng)毒性