細胞支架復合體促進大鼠腹部預構皮瓣存活及其再血管化的實驗研究.pdf

1、目的:探討通過構建大鼠羊膜上皮細胞膠原海綿支架復合體,觀察預構皮瓣血管束附近細胞支架復合體的作用,及其對預構皮瓣成活影響的實驗研究。
　　方法:體外培養(yǎng)羊膜上皮細胞,將第3代的大鼠羊膜上皮細胞與膠原海綿構筑成細胞支架復合體后,光鏡下及熒光標記法分別觀察細胞種植前后的生長增殖情況;ELISA法檢測羊膜上皮細胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量,并通過熒光標記技術觀察羊膜上皮細胞支架植于體內后細胞的存活情況;同時將軟骨細胞植

2、于膠原蛋白海綿支架。實驗分為空白對照組、軟骨細胞組、羊膜上皮細胞組和正常對照組。一期手術時,空白對照組在預構皮瓣血管神經束的兩側植入膠原海綿空支架,軟骨細胞組和羊膜上皮細胞組均植入帶有相應細胞的膠原海綿支架復合體。術后第7、14天各組分別取皮瓣組織行促血管生成因子的ELISA檢測。二期手術時,將皮瓣四邊掀起后原位縫合,術后1周比較各組皮瓣存活情況,并取存活部位軟組織測定微血管數(shù)目及密度,進行分析。正常對照組大鼠未經任何手術過程,當其它三

3、組大鼠分別經過兩期手術后,正常對照組大鼠取腹部相應位置的皮膚軟組織作相關指標的檢測。
　　結果:羊膜上皮細胞在膠原海綿支架上生長情況良好,細胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量隨時間增長呈不斷上升趨勢,將細胞支架移植于體內后經過觀察發(fā)現(xiàn)細胞仍存活良好。組織內各因子含量以羊膜上皮細胞組最高,其余依次為正常對照組、空白對照組及軟骨細胞組,各組之間均有差異。并且各組14天較7天的分泌量無明顯下降。空白對照組與軟骨細胞組間皮瓣存