脂肪干細(xì)胞復(fù)合不同生物支架促進(jìn)裸鼠皮下血管化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、1.研究背景及目的：
　　近30年來，自體脂肪移植已廣泛應(yīng)用于整形美容外科，其已成為進(jìn)行軟組織充填的重要方法，但單純的自體脂肪移植吸收率高、存活率低，從而限制了其進(jìn)一步的推廣應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)將脂肪來源干細(xì)胞分別與脂肪顆粒、透明質(zhì)酸鈉、Ⅰ型無菌膠原以適當(dāng)比例混合，從而構(gòu)建脂肪干細(xì)胞-生物支架復(fù)合物。將其注射于裸鼠皮下軟組織，探討其對(duì)裸鼠皮下軟組織血管化的影響，為脂肪干細(xì)胞移植及相關(guān)生物支架的篩選提供依據(jù)，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

2、　　2.方法：
　　將脂肪組織用膠原酶消化法進(jìn)行分離，并收集原代脂肪干細(xì)胞，按照4×105個(gè)/ml密度置于低糖DMEM培養(yǎng)液傳代，收集所培養(yǎng)的第3代脂肪干細(xì)胞作為種子細(xì)胞。將種子細(xì)胞接種并完全貼壁后向普通培養(yǎng)液中加入誘導(dǎo)劑（10-6mmol/L地塞米松、10mg/L胰島素、0.5mmol/L/L3-異丁基-1-甲基黃嘌呤和0.2mmol/L吲哚美辛）培養(yǎng)2周。
　　將本實(shí)驗(yàn)分為五組:A組（脂肪干細(xì)胞復(fù)合脂肪顆粒），B組（脂肪

3、干細(xì)胞復(fù)合透明質(zhì)酸鈉），C組（脂肪干細(xì)胞復(fù)合Ⅰ型無菌膠原），D組為單純脂肪干細(xì)胞組，E組為單純脂肪顆粒組，在裸鼠皮膚上標(biāo)記五個(gè)點(diǎn)，將五組試劑分別于標(biāo)記點(diǎn)下注射到裸鼠皮下。3個(gè)月后將動(dòng)物處死，完整取出移植物，并進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)和分析。
　　3.結(jié)果：
　　3.1、大體觀察取材時(shí)，裸鼠背部注射部皮下有一團(tuán)狀組織塊，呈淡黃色，質(zhì)軟，界限清晰，包膜完整，易分離，脂肪組織形狀不規(guī)則，大小不一。
　　3.2.微血管密度A、B、C組明顯

4、高于D組、E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(＜0.01);D組明顯高于E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);A、B、C組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.3.存活率比較(％)A、B、C組明顯高于D組、E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);D組明顯高于E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);A、B、C組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3.4.濕重測(cè)定A、B、C組明顯高于D組、E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0

5、.01);E組與D組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);A、B、C組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4.結(jié)論：
　　1.脂肪干細(xì)胞免疫原性較低，局部注射不會(huì)產(chǎn)生致熱反應(yīng)及炎癥反應(yīng);2.ADSCs具有促血管化作用;3.脂肪組織、透明質(zhì)酸鈉、Ⅰ型膠原可加速ADSCs的促血管化作用，且三種生物支架無顯著差異;4.ADSCs和生物支架具有一定的協(xié)同作用;5.脂肪干細(xì)胞復(fù)合相關(guān)生物支架做為可注射性材料具有一定的可行性，希望為整形