脂肪干細(xì)胞移植促進(jìn)擴(kuò)張皮膚再生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)背景：
　　組織擴(kuò)張術(shù)是整形外科手術(shù)中的一項(xiàng)基本技術(shù)。由于皮膚有限的再生能力，使得臨床上一般需要4-6個(gè)月的擴(kuò)張周期。如何增加皮膚的再生能力，在較短時(shí)間內(nèi)獲得大面積的新生皮膚，仍是整形外科醫(yī)生面臨的難題。組織擴(kuò)張產(chǎn)生一個(gè)類似于組織創(chuàng)傷修復(fù)的內(nèi)環(huán)境。而ADSCs移植治療已被證明可以有效地促進(jìn)創(chuàng)傷修復(fù)。
　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?br>　　觀察ADSCs移植是否可以促進(jìn)擴(kuò)張皮膚再生，并探討其機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　(1

2、)觀察培養(yǎng)ADSCs的上清液對(duì)成纖維細(xì)胞遷移、增殖及I型膠原基因表達(dá)的影響；
　　(2)建立大鼠組織擴(kuò)張模型，根據(jù)移植細(xì)胞的不同，將大鼠分為 ADSCs組、成纖維細(xì)胞組、對(duì)照組。每周注水2次，保持?jǐn)U張器囊內(nèi)壓為60mmHg。擴(kuò)張4w后統(tǒng)計(jì)三組擴(kuò)張量、擴(kuò)張面積及回縮率；
　　(3)分別收取1w、2w、4w時(shí)的擴(kuò)張皮膚，觀察各組皮膚厚度及皮膚中增殖細(xì)胞的數(shù)量、膠原含量、血管密度、巨噬細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞密度；
　　(4)體外

3、誘導(dǎo)ADSCs向內(nèi)皮細(xì)胞和表皮細(xì)胞分化，并將BrdU標(biāo)記的ADSCs回植入體內(nèi)4w，觀察移植細(xì)胞的成活情況及分布；
　　(5)觀察ADSCs和成纖維細(xì)胞中及各組擴(kuò)張皮膚中VEGF、EGF及bFGF基因及蛋白的表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　(1)培養(yǎng)ADSCs的上清液可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞的遷移、增殖和I型膠原基因表達(dá)，其效果呈現(xiàn)劑量依賴性；
　　(2)ADSCs移植后組織擴(kuò)張量和擴(kuò)張面積均增加，而回縮率減??；擴(kuò)張結(jié)束后

4、ADSCs組各層皮膚厚度均高于其余兩組，而纖維囊的厚度未出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；
　　(3)ADSCs組擴(kuò)張皮膚中增殖細(xì)胞數(shù)量增多，主要出現(xiàn)于表皮基底層和毛囊中；ADSCs組擴(kuò)張皮膚中含有更多的羥脯氨酸，膠原排列也更致密；擴(kuò)張結(jié)束后ADSCs組的毛細(xì)血管密度高于其余兩組；7d時(shí)ADSCs組皮膚中的巨噬細(xì)胞密度和14d時(shí)的肌成纖維細(xì)胞密度和其余兩組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；
　　(4)體外誘導(dǎo)7d后，ADSCs可以分化為內(nèi)皮細(xì)胞和表皮細(xì)胞；Brd