脂肪來源干細(xì)胞促進(jìn)任意型皮瓣成活的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探索從健康成人的脂肪組織中提取、培養(yǎng)并鑒定脂肪干細(xì)胞，探索脂肪干細(xì)胞在促進(jìn)任意型皮瓣成活過程中的作用。
　　方法：用健康成人的脂肪組織，剔除血管和纖維結(jié)締組織后剪碎并用膠原Ⅰ酶消化，獲得脂肪干細(xì)胞在體外培養(yǎng)及進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)鑒定。使用第5代已經(jīng)DIO熒光標(biāo)記的活的脂肪干細(xì)胞,2×106懸浮于0.5mlDMEM培養(yǎng)基中。于大白兔背部對(duì)稱地設(shè)計(jì)兩個(gè)蒂在頭側(cè)的任意型皮瓣（長(zhǎng)6cm寬2cm），左側(cè)為對(duì)照組，右側(cè)為實(shí)驗(yàn)組，將懸浮有ADS

2、Cs的DMEM0.5ml分5點(diǎn)注入大白兔實(shí)驗(yàn)組任意型皮瓣模型中(n=10)，作為比較，對(duì)照側(cè)同樣分5點(diǎn)注入DMEM0.5ml，觀察實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組皮瓣成活情況，于術(shù)后7日分別計(jì)算皮瓣成活面積；隨機(jī)作冰凍切片，在激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察切片熒光顯影情況；隨機(jī)作常規(guī)切片 HE染色，光鏡下觀察皮瓣組織毛細(xì)血管分布密度。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析脂肪干細(xì)胞在促進(jìn)任意型皮瓣成活過程中的作用。
　　結(jié)果：1、可以從健康成人脂肪組織中分離出間充質(zhì)干細(xì)胞，在體外

3、環(huán)境穩(wěn)定擴(kuò)增傳代，使用第5代細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面高度表達(dá)CD29，CD44，CD105等，表明具有間充質(zhì)干細(xì)胞特性。2、使用第5代已經(jīng)熒光標(biāo)記的活的脂肪干細(xì)胞注入大白兔皮瓣模型中，觀察實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組皮瓣成活情況，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)組皮瓣成活面積（7.17±0.30cm2）顯著高于對(duì)照組（5.57±0.45cm2）（p<0.01）。組織學(xué)檢查證實(shí)實(shí)驗(yàn)組皮瓣毛細(xì)血管密度顯著增多，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察顯示：實(shí)驗(yàn)組皮