復(fù)制缺陷型腺病毒載體介導(dǎo)人VEGF cDNA 促進(jìn)兔靜脈分葉皮瓣成活的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討以復(fù)制缺陷型腺病毒介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子165基因(Ad-VEGF165)局部應(yīng)用對兔靜脈分葉皮瓣成活的影響。
　　方法:選用健康新西蘭大白兔24只,雌雄不論,體質(zhì)量1.5~2.0 kg,兔齡4個(gè)月。將新西蘭大白兔隨機(jī)分成3組,每組8只,在兔側(cè)胸腹壁胸背靜脈自肩胛下靜脈發(fā)出點(diǎn)與髂腰靜脈吻接點(diǎn)之間設(shè)計(jì)一大小為8×5cm的一橢圓形分葉皮瓣。術(shù)前5天分別皮下注射Ad-VEGF165(Ⅰ組)、攜帶β半乳糖苷酶基因的腺病毒(Ad

2、-Gal)(Ⅱ組)和生理鹽水(Ⅲ組)。5天后掀起皮瓣原位縫合。術(shù)后7天進(jìn)行皮瓣存活率、常規(guī)組織切片、免疫組化、β-半乳糖苷酶組織原位染色、新生血管計(jì)數(shù)檢測。
　　結(jié)果:術(shù)后7天Ad-VEGF165組、攜帶β半乳糖苷酶基因腺病毒組和生理鹽水組皮瓣成活率分別為(76.281±2.298)％,(50.408±1.577)%,(48.748±2.130)%,Ad-VEGF165組成活率顯著高于攜帶β半乳糖苷酶基因腺病毒組和生理鹽水組(P<

3、0.01),攜帶β半乳糖苷酶基因腺病毒組與生理鹽水組比較差異無顯著性意義(P>0.05)。3組皮瓣平均血管數(shù)目分別為(37.76±2.21),(22.68±2.15),(23.31±3.38)個(gè)/cm2,Ad-VEGF165組平均血管數(shù)目顯著高于攜帶β半乳糖苷酶基因腺病毒組和生理鹽水組,具有顯著差異性(P<0.05)。免疫組化顯示,Ad-VEGF165組皮瓣中有大量VEGF表達(dá)。組織學(xué)切片顯示,Ad-VEGF165組皮瓣中肉芽組織增生,

4、新生血管大量形成。β-半乳糖苷酶組織原位染色顯示,攜帶β半乳糖苷酶基因腺病毒組皮瓣中有β-半乳糖苷酶蛋白表達(dá)。
　　結(jié)論:1.靜脈分葉皮瓣術(shù)前5d局部注射Ad-VEGF165,Ad-VEGF165能在皮瓣中轉(zhuǎn)染成功,并持續(xù)表達(dá)VEGF蛋白,促進(jìn)皮瓣新生血管行成,增加皮瓣的血運(yùn),增大術(shù)后皮瓣存活面積,是一種簡單有效的基因治療方法。
　　2.靜脈分葉皮瓣術(shù)前5d局部注射Ad-VEGF165,可促進(jìn)靜脈分葉皮瓣的成活,為臨床整形外