慢病毒載體介導(dǎo)的sTRAIL及聯(lián)合ATO對消化道腫瘤細(xì)胞作用的研究.pdf

1、目的: 構(gòu)建含有人可溶性TRAIL(sTRAIL)基因的重組慢病毒載體，觀察sTRAIL在不同靶細(xì)胞中的表達(dá)，并觀察聯(lián)合三氧化二砷(ATO)對細(xì)胞周期變化和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的影響。 方法: 構(gòu)建攜帶人sTRAIL的重組慢病毒載體，在體外感染正常人肝細(xì)胞HL-7702、人胚肺成纖維細(xì)胞HFL-1、人胃癌細(xì)胞SGC-7901、人胰腺癌細(xì)胞SW 1990，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)評(píng)價(jià)sTRAIL蛋白在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)，采用F

2、CM檢測細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期的變化。 結(jié)果: 成功包裝出含有sTRAIL基因的重組慢病毒，滴度可達(dá)(1.68±0.54)×106IU/ml；重組慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)使sTRAIL在消化道腫瘤細(xì)胞中高效表達(dá)，聯(lián)合ATO可誘導(dǎo)SGC-7901和SW 1990細(xì)胞凋亡，而對HL-7702等人正常細(xì)胞無明顯誘導(dǎo)凋亡作用。 結(jié)論: 成功構(gòu)建了重組慢病毒表達(dá)載體pXZ208-sTRAIL，包裝后在體外可以有效感染人胚腎細(xì)胞(293T)、HFL