慢病毒載體介導(dǎo)人TNF-β基因?qū)Y(jié)直腸癌細(xì)胞的作用.pdf

1、目的探討慢病毒載體介導(dǎo)人TNF-β基因?qū)Y(jié)直腸癌細(xì)胞HCTll6作用的研究
　　 方法:培養(yǎng)HCTll6細(xì)胞系，通過慢病毒載體介導(dǎo)TNF-β基因的感染，將細(xì)胞分為感染慢病毒載體介導(dǎo)TNF-β基因細(xì)胞組（實(shí)驗(yàn)組），無TNF-β基因的慢病毒細(xì)胞組（陰性對(duì)照組），HCTll6細(xì)胞（空白對(duì)照組）。采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)感染后TNF-β基因mRNA水平表達(dá)情況，通過MTT實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)三組細(xì)胞生長(zhǎng)活性。
　　 結(jié)果:通過在熒

2、光顯微鏡下觀察HCTll6細(xì)胞內(nèi)綠色熒光蛋白的表達(dá)發(fā)現(xiàn)慢病毒感染細(xì)胞后48h，細(xì)胞的感染效率大于95％，慢病毒對(duì)HCTll6細(xì)胞的感染效率非常高。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)分析顯示慢病毒載體介導(dǎo)的TNF-β基因感染HCT116細(xì)胞后TNF-βmRNA的表達(dá)在12h、24h、48h、72h和5d均明顯高于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05），而陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組之間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。