EGCG抗消化道腫瘤作用及其分子機制的研究.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文EGCG抗消化道腫瘤作用及其分子機制的研究姓名：許琦申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學（消化系?。┲笇Ы處煟喝街救A20050401第一部分中文摘要目的：了解表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)是否誘導人胃癌細胞株MKN45凋亡，及其凋亡信號傳導途徑，為其臨床應用提供進一步的理論依據(jù)。方法：用四唑藍(MTT)比色法檢測EGCG以及caspase3抑制劑作用后MKN45細胞的生長率；用AnnexinVFITCPI雙染

2、色法測定EGCG以及caspase3抑制劑作用后MKN45細胞的凋亡率；用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測EGCG以及caspase一3抑制劑作用后MKN45細胞內(nèi)caspase3活性的改變；用Rhodaminel23染色檢測EGCG作用后MKN45細胞內(nèi)線粒體膜電位的改變情況。結(jié)果：EGCG作用后MKN45細胞發(fā)生凋亡，并且隨著EGcG作用時間的延長及濃度的增加細胞的凋亡率增加。其中，80／amol／L濃度在干預12h后凋亡細胞就

3、達到(997116)％，較對照組[(I184027)％】顯著增多(PO01)；干預18h后三種濃度EGCG誘導的凋亡細胞百分率都較對照組顯著增加(P005)。在EGCG作用8h后MKN45細胞內(nèi)的caspase一3活性開始升高，并于作用12h后活性明顯升高，80pmol／L濃度干預24h后caspase一3活性最高達到對照組的858倍。線粒體的膜電位于EGCG作用4h后就開始明顯下降，并與時間和濃度正相關。在409mol／L的EGCG干

4、預4h后線粒體的膜電位就降至(8950086m，較對照組顯著降低(PO01)，12小時后80Bmol／L干預組線粒體對Rhodamine_123的吸收率幾乎降到最低(1304O66)％。用caspase3抑制劑作用后，EGCG抑制細胞生長的作用明顯減弱，細胞的凋亡率下降，caspase3活性也顯著下降。結(jié)論：EGCG可以誘導人胃癌細胞株MKN45細胞的凋亡，并且其所誘導的凋亡與EGCG的作用時間及濃度呈正相關。MKN45細胞內(nèi)caspa