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文檔簡介
1、該研究擬探討vWF基因Rsa I、Sma Ⅰ多態(tài)性與血栓性疾病的發(fā)生有無相關(guān)關(guān)系;并對基因芯片技術(shù)在SNP檢測上的應(yīng)用進行探討.研究中,我們首先建立vWF基因Rsa I、Sma I多態(tài)性寡核苷酸陣列檢測方法.設(shè)計、合成兩組寡核苷酸探針,使用3甲氧基氨基丙基硅烷、戊二醛等化學物質(zhì),實現(xiàn)探針與固相支持物玻片的連接.應(yīng)用不對稱PCR方法擴增Rsa I、Sma I多態(tài)性片段,在擴增體系中摻入熒光標記dUTP,獲得被測片段的單鏈標記產(chǎn)物.對核酸雜
2、交反應(yīng)的溫度、動力學和離子濃度變化進行研究,獲得最佳的雜交鑒別條件.隨機抽取20名正常人,酶切法確定多態(tài)性基因型,再用寡核苷酸陣列法檢測,以驗證該方法的準確性.使用該方法對50例血栓病人進行檢測,探討血栓性疾病的發(fā)生與vWF基因Rsa I、Sma I多態(tài)性的關(guān)系.結(jié)果表明,寡核苷酸陣列法和酶切法對20例標本檢測的符合率為100﹪;血栓病人與正常人之間兩位點多態(tài)性的基因型和等位基因頻率的差異均無顯著意義(P>0.05).因而該研究成功建立
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