醒腦靜注射液改善高血氨大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的分子機(jī)制.pdf

1、目的:
　　(1)為了明確高血氨對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響;
　　(2)探討高血氨影響大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的分子機(jī)制;
　　(3)為了明確醒腦靜注射液改善高血氨大鼠學(xué)習(xí)記憶功能;
　　(4)探討醒腦靜注射液改善高血氨大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的分子機(jī)制。
　　方法:
　　36只SD大鼠（清潔級(jí)，雄性），按照EXCEL表隨機(jī)法分為3組（每組12只）:正常對(duì)照組、高血氨模型組和醒腦靜治療組。高血氨模型組大鼠腹腔內(nèi)注射5％

2、氯化銨，劑量為5ml/kg，間隔1小時(shí)后腹腔內(nèi)注射生理鹽水(NS)5ml/kg;醒腦靜治療組大鼠在注射氯化銨液間隔1小時(shí)后，腹腔內(nèi)注射醒腦靜注射液，劑量為5ml/kg;正常對(duì)照組大鼠腹腔內(nèi)2次注射生理鹽水作為對(duì)照;各組均為每周前4天給藥，連續(xù)四周。實(shí)驗(yàn)第五周開(kāi)始，水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠，記錄平均逃避潛伏期和游泳總距離（反映學(xué)習(xí)記憶功能的兩個(gè)參數(shù)）。
　　水迷宮實(shí)驗(yàn)后，腹腔內(nèi)注射水合氯醛麻醉，下腔靜脈采血，肝素抗凝血離心分離得血漿，

3、生化分析儀檢測(cè)血氨。大鼠腦組織分離的海馬和皮層組織，一部分以4％的多聚甲醛中固定，用于蘇木素-伊紅(Hematoxylin-eosin，HE)染色以及免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NMDAR1表達(dá);另一部分新鮮腦組織超低溫保存，分別用RT-qPCR和Western Blot法檢測(cè)CREB基因和蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)三組大鼠試驗(yàn)前后體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，所有大鼠均有足夠體力完成Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。
　　(2)高血氨

4、模型組和醒腦靜治療組大鼠的血氨水平均明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，但高血氨模型組和醒腦靜治療組兩組之間的血氨水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(3)高血氨模型組大鼠較正常對(duì)照組平均逃避潛伏期延長(zhǎng)(P＜0.05)，同時(shí)游泳總距離增加(P＜0.05);提示高血氨模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降。
　　(4)高血氨模型組大鼠大腦皮層與海馬組織NMDAR1的表達(dá)較正常組大鼠明顯下降(P＜0.05)，且高血氨模型組大鼠大腦皮層與海馬組織CREB

5、基因和蛋白表達(dá)均較正常組顯著下降(P＜0.05)。
　　(5)醒腦靜治療組大鼠較高血氨模型組，其平均逃避潛伏期縮短(P＜0.05)，游泳總距離也縮短(P＜0.05)。
　　(6)與高血氨模型組比較，醒腦靜治療組大鼠腦組織（皮層與海馬組織）NMDAR1基因表達(dá)均升高明顯（P＜0.05），且CREB基因和磷酸化蛋白表達(dá)升高均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1)高血氨能夠?qū)е聦W(xué)習(xí)記憶功能的下降。